丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，该制备方法采用丙酚替诺福韦游离碱与含有碱性物质的水溶液为原料，以二氯甲烷作为反应溶剂，通过在特定的碱性物质、反应温度等反应体系下，使得反应液中原料转化率高达90.0％以上，且具有较高的反应选择性；分层后，将得到的水层经中压制备色谱纯化，目标产物的纯度高达99％以上，可作为杂质对照品使用，为丙酚替诺福韦的质量标准控制，安全用药提供重要的指导意义。

【技术实现步骤摘要】
丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法
本专利技术涉及药物化学领域，更具体地，涉及一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法。
技术介绍
丙酚替诺福韦(TenofovirAlafenamideFumurate，TAF)是核苷酸类逆转录酶抑制剂替诺福韦(Tenofovir)的靶向前药，由美国GileadSciences公司研发，商品名Vemlidy，于2016年11月在美国获批上市，用于一日一次治疗成年代偿性肝病患者的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染，于2018年11月在国内获批上市。TAF的化学名为N-[(S)-[[[(R)-1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基]氧]甲基](苯氧基)磷酰基]-L-丙氨酸异丙酯，(2E)-2-丁烯二酸盐(2∶1)，其化学结构如下：在合成TAF的过程中往往会伴随着一些副产物的生成，其中在丙酚替诺福韦的降解实验中就发现：降解杂质(R)-1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基)氧基)甲基)-N-((S)-1-异丙氧基-1-氧丙烷-2-基)膦酸(如式Ⅱ)较易产生，这势必影响TAF的的药品质量。因此，为了更好地对丙酚替诺福韦进行质量研究，非常有必要得到这个杂质的标准品，进而用于丙酚替诺福韦生产中杂质的定性及定量分析，从而提高丙酚替诺福韦的质量标准，为安全用药提供重要的指导意义。目前关于合成杂质式Ⅱ标准品的文献非常少，其中专利CN108101942A公开了半替诺福韦艾拉酚胺生产中潜在杂质的合成法，并具体公开了TAF-impurityC(相当于化合物式Ⅱ)的制备方法，其所采用的制备方法为：采用式V化合物先与酰化剂发生酰化反应，然后再与L-丙氨酸异丙酯发生酰胺反应，得到式C所示的TAF-impurityC。然而，该方法操作步骤长，所使用试剂多，反应时间长，反应选择性较差，后处理及分离较难。且所选一些试剂如酰化剂等有一定危险性。因此，提供一种原料转化率高、后处理简单、绿色环保、纯度高的制备丙酚替诺福韦降解杂质化合物式Ⅱ标准品的方法十分重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术中丙酚替诺福韦降解杂质化合物式Ⅱ合成中存在反应时间长、操作繁琐且后处理复杂，成本较高等技术问题，提供一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，该制备方法简单，快速且制得的杂质具有高纯度，可用作杂质标准品对替诺福韦的质量标准进行控制。本专利技术提供了一种如式Ⅱ所示的丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，包括以下反应步骤：步骤一：将丙酚替诺福韦游离碱式Ⅰ与含有碱性物质的水溶液在有机溶剂二氯甲烷中进行混合搅拌发生两相反应，控制反应温度为10～30℃，得到反应液；步骤二：将步骤一得到的反应液进行分层，收集水相，水层经高压制备色谱纯化，冻干，得到杂质化合物式Ⅱ；其中，步骤一碱性物质为碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂中的一种或几种。上述制备方法中，优选的，碱性物质为碳酸钾。上述制备方法中，优选的，步骤一中所述丙酚替诺福韦游离碱与碱性物质的摩尔比为1：1.0～3.0。更优选的，丙酚替诺福韦游离碱与碱性物质的摩尔比为1：2.0。上述制备方法中，优选的，步骤一中反应温度控制为20～25℃；上述制备方法中，优选的，步骤二中通过液相制备柱提取的方法为：采用等度冲洗分离；色谱纯化的方法中流动相为3％的乙腈纯水溶液。上述制备方法中，优选的，色谱纯化的方法中控制流速为20mL/min；色谱纯化的方法中进样量为100mg/针。本专利技术反应机理：由于本专利技术中的原料丙酚替诺福韦游离碱和产物丙酚替诺福韦降解杂质化合物式Ⅱ对碱性物质具有较高的敏感度，碱性物质的种类和用量的不同，可能都会引起原料一个或多个不同的活性位点发生水解(活性位点的标识见式Ⅳ)，对目标产物的产率和纯度均具有较大影响。本申请的专利技术人通过大量的实验探索发现，当碱性物质为碳酸锂、碳酸钾、碳酸钠中的一种或几种时，尤其是选自碳酸钾时，反应液中的原料转化率得到显著提升，且具有较高的水解选择性。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术提供了一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，经选择性水解，使得反应液中原料转化率≥90.0％，具有较高的反应选择性；反应液中有机溶剂和水相分层后，将得到的水相经高压制备色谱纯化，冻干即可得到丙酚替诺福韦降解杂质杂质化合物式Ⅱ，所得杂质化合物式Ⅱ的纯度≥98％，可作为杂质对照品使用。(2)本专利技术的原料简单易得，反应条件易控，产物纯度较高，后处理简单，适合生产丙酚替诺福韦降解杂质化合物式Ⅱ，有利于合成丙酚替诺福韦过程中对该杂质的检测监控，提高丙酚替诺福韦的质量标准，为安全用药提供重要的指导意义。附图说明图1为本专利技术制得的丙酚替诺福韦降解杂质式Ⅱ的核磁氢谱图。图2为本专利技术制得的丙酚替诺福韦降解杂质式Ⅱ的核磁碳谱图。图3为本专利技术制得的丙酚替诺福韦降解杂质式Ⅱ的红外光谱谱图。图4为本专利技术制得的丙酚替诺福韦降解杂质式Ⅱ的液相色谱图。图5为本专利技术制得的丙酚替诺福韦降解杂质式Ⅱ的质谱图。具体实施方式为了更清楚、完整的描述本专利技术的技术方案，以下通过具体实施例进一步详细说明本专利技术，应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本专利技术，并不用于限定本专利技术，可以在本专利技术权利限定的范围内进行各种改变。实施例1一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，包括以下步骤：步骤一.向反应瓶中加入5.0g丙酚替诺福韦游离碱，50mL二氯甲烷，搅拌溶解；另取2.9g碳酸钾以20mL水搅拌溶解后，于25℃下保温反应15小时，反应完成后，静置分层，二氯甲烷层弃去，将水相层控制内温10～30℃。S2.经高压制备色谱仪纯化后，收集含物料的组分溶液，冻干，得白色固体丙酚替诺福韦降解杂质化合物Ⅰ3.8g，HPLC纯度99.15％；其中高压制备色谱采用等度冲洗分离，流动相为3％的乙腈纯水溶液，流速为15mL/min，进样量为100mg/针。实施例2～4一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，与实施例1基本相同，其区别在于，丙酚替诺福韦游离碱与碳酸钾的摩尔比(在表1中用A表示)不同，具体见表1。表1不同投料比对产物收率的影响对比例1～4一种丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，与实施例1基本相同，其区别在于，碱性物质不同，具体见表2。表2不同碱性物质对产物纯度的影响项目碱性物质反应液LCMS结果中产物纯度实施列1碳酸钾99.5％对比例1碳酸钠8.1％对比例2碳酸氢钾0对比例3碳酸锂7.3％对比例4氢氧化钠0结果与讨论对实施例1中制得的丙酚替诺福韦降解杂质化合物Ⅰ进行了核磁共振氢谱、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种如式Ⅱ所示的丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，其特征在于，所述制备方法基于以下反应步骤：/n

【技术特征摘要】
1.一种如式Ⅱ所示的丙酚替诺福韦降解杂质的制备方法，其特征在于，所述制备方法基于以下反应步骤：



步骤一：将丙酚替诺福韦游离碱式Ⅰ与含有碱性物质的水溶液在有机溶剂二氯甲烷中进行混合搅拌发生两相反应，控制反应温度为10～30℃，得到反应液；
步骤二：将步骤一得到的所述反应液进行分层，收集水相，水层经高压制备色谱纯化，冻干，得到杂质化合物式Ⅱ；
其中，步骤一所述碱性物质为碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂中的一种或几种。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性物质为碳酸钾。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S1中所述丙酚...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹湘祁，马晓宁，廖正华，黄明强，谢明成，
申请(专利权)人：天地恒一制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43