MccJ25突变体及其制备方法和应用技术

技术编号:29148139 阅读:28 留言:0更新日期:2021-07-06 22:43
本发明专利技术属于生物工程领域,具体涉及一种MccJ25突变体及其制备方法和应用。该MccJ25突变体氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。以质粒pUC5725为模板,以SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的序列为引物进行PCR扩增得扩增产物;将所述扩增产物加入内切酶,去除pUC5725模板得所述MccJ25高水溶性突变体;然后将步骤(1)中所述质粒pUC5725为MccJ25编码基因序列根据AF061787优化合成后插入pUC57的EcoRI‑SalI位点中得到MccJ25高水溶性突变体。该MccJ25高水溶性突变体的稳定性和杀菌活性优于或等于野生型,而且对人工胃肠液的敏感性提高。

【技术实现步骤摘要】
MccJ25突变体及其制备方法和应用
本专利技术属于生物工程领域,具体涉及一种MccJ25突变体及其制备方法和应用。
技术介绍
MccJ25是由大肠杆菌EscherichiacoliAY25产生的长21AA的细菌素,分离自人粪便(Blond,A.,J.Péduzzi,C.Goulard,etal.1999.Thecyclicstructureofmicrocinj25,a21-residuepeptideantibioticfromescherichiacoli.FebsJournal,259(3),747)。MccJ25编码基因位于低拷贝质粒pTUC100上长4.8kb片段内,含有4个基因,分别是mcjA、mcjB、mcjC和mcjD(Solbiati,J.O.,M.Ciaccio,R.N.Farías,etal.1996.Geneticanalysisofplasmiddeterminantsformicrocinj25productionandimmunity.JournalofBacteriology,178(12),3661-3)。m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提高MccJ25水溶性的方法,其特征在于,将MccJ25表面第二个疏水区域内残基I13、T15分别突变为P和G小侧链氨基酸。/n

【技术特征摘要】
1.提高MccJ25水溶性的方法,其特征在于,将MccJ25表面第二个疏水区域内残基I13、T15分别突变为P和G小侧链氨基酸。


2.权利要求1所述的方法制备的MccJ25突变体,其特征在于,所述MccJ25突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示及其同一性大于90%的序列。


3.编码权利要求2所述的MccJ25突变体的核苷酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


4.包含权利要求3所述的核苷酸序列的重组质粒。


5.包含权利要求4所述的重组质粒的大肠杆菌。


6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄金秀杨飞云
申请(专利权)人:重庆市畜牧科学院
类型:发明
国别省市:重庆;50

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