本发明专利技术涉及含有外泌体的美白和抗衰老药物、保健品或者化妆品。本发明专利技术通过前期分离的多肽较好的抑制了黑色素瘤细胞的增殖,同时,通过分离制备了商用胚胎干细胞的外泌体,所述外泌体具有较好的抗衰老的效果,通过将多肽与外泌体以及维生素E一起使用,能够在抑制黑色素的同时还能较好的抑制衰老,具有较好的效果。
【技术实现步骤摘要】
含有外泌体的美白和抗衰老药物、保健品或者化妆品
本专利技术涉及药物或者化妆品领域,具体的涉及含有外泌体的美白和抗衰老药物、保健品或者化妆品。
技术介绍
随着社会的发展,以及人民对美好生活的向往和追求,爱美变成一个越来越重要的生活追求目标,使得人们对皮肤衰老认识越来越深刻。衰老的皮肤对美观的影响主要是皮肤干燥无光泽,粗糙、干裂、皱纹、松弛及下垂,以及脂褐质、老年斑明显增加。于是各种化妆品和药物被广泛使用,但是目前保持皮肤抗衰老以及美白的药物或化妆品也是千奇百种,其效果也是各不相同。近年来,随着干细胞技术研究的发展,使得干细胞用于药物或者化妆品成为了可能。干细胞是具有自我更新和分化特性的独特细胞群,能产生特定的细胞系或细胞。通常可分为两类:胚胎干细胞和成体干细胞具有多能性,能衍生出属于外胚层、内胚层和中胚层的子代细胞。ESCs具有多能性,很容易分化成不同类型的成熟细胞,是最具再生能力的干细胞。在整形外科领域,ESCs已成为用于组织缺损再生修复手术的重要选择。人胚胎干细胞((hESCs)是来自胚胎发育不同阶段的多能干细胞,其分化的内皮前体细胞((hESC-EPCs)能分泌高水平的生长因子和细胞因子,具有改善受损组织中血流灌注的功能,在衰老相关疾病治疗上特别具有吸引力。研究显示由多种生长因子和细胞因子组成的hESC-EPCs的条件培养基(CM)显著提高真皮成纤维细胞和表皮角质细胞的增殖和迁移,增强成纤维细胞的胶原合成。随机对照半脸治疗研究显hESC-EPCs分泌因子可改善皮肤老化,对色素沉着和皱纹有显著疗效,成为皮肤再生和抗衰老的一个潜在选择。胚胎间充质干细胞还可作为抗氧化剂,通过移植小鼠可以显著延长寿命,延缓小鼠皮肤衰老。此外,其他的干细胞比如ADSCs通常可从骨髓、脂肪、皮肤中分离出来,其多效性、易分离、多谱系分化等特性使其在临床应用中被广泛接受。由于容易获取,且对供体影响小,ADSCs被认为是一种很有前途的再生治疗选择,在维持皮肤稳态和严重损伤后修复中发挥着关键作用。干细胞其旁分泌功能对于抗衰老作用更是近年研究的热点。人们对干细胞旁分泌功能在抗衰老过程中的作用及机制研究日益关注。干细胞通过分泌一系列活性成分在抑制皮肤老化、美白肌肤、辅助脂肪移植、促进毛发再生等诸多抗衰老方面均有较显著的效果。此外,也有研究表明从健康产妇羊膜和新生儿脐带血单个核细胞分别提取扩增间充质干细胞和淋巴细胞,分别制备含人天然细胞因子的细胞提取物。检验提取物中碱性成纤维细胞生长因子((bFGF)、转化生长因子(TGF-X31)、干细胞因子(SCF)、Y干扰素(IFN-y)含量和这两种提取物对人皮肤成纤维细胞的促增殖活性以及促胶原蛋白合成能力。结果两种细胞提取物均对体外培养的皮肤细胞有明显促增殖作用,并能促进胶原蛋白的合成。这也充分的说明干细胞提取物有抗衰老功效。但是目前,针对干细胞作为抗衰老和美白的药物、保健品或者化妆品的研究还不多,社会需求迫切。
技术实现思路
本专利技术克服现有技术的缺陷,提供一种具有抗衰老和美白的药物、保健品或者化妆品。本专利技术中所述的胚胎干细胞均为商业化已建系的胚胎干细胞细胞系。一方面,本专利技术提供一种来自胚胎干细胞的外泌体及其制备方法。具体的,所述胚胎干细胞外泌体的制备方法为:胚胎干细胞H9(货号C-001,江苏斯坦福生物技术有限公司)来源的外泌体的分离:将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基(Stemcell,货号85850)中在37℃、5%CO2低氧培养箱中培养。等到细胞已长满(达85-95%)。即可进行传代,具体步骤如下:弃去培养液,用PBS洗涤1-2次,加入1.0ml胰酶消化液,37℃消化,加入双倍的含10%血清的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液,将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散,加入新鲜的含10%血清和100ng/mLIFN-γ的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基,重悬细胞,进行传代培养,传代比例为1:2,传代连续培养16h后收集上清。将细胞培养上清转移至50mL离心管,300g离心10分钟;留取上清,2000g离心15分钟;留存上清,10000g离心30分钟;将上清转移至Beckman超速离心管中,并用天平配平,100000g离心70分钟;弃上清,用经0.22μm滤器滤过的PBS重悬pellet,并用天平配平,100000g离心70分钟;弃上清,用PBS重悬外泌体;外泌体采用超滤离心管浓缩,调整外泌体浓度为1mg/mL备用。本专利技术另外提供一种前期通过多肽库筛选的能够抑制黑色素细胞增殖的多肽,所述多肽的序列如SEQIDNO:1所示。本专利技术的外泌体来自人体细胞,安全无毒。序列1的多肽通过小鼠安全性试验同样具有较好的安全性,在以10mg/kg/d的大剂量给药测试中,小鼠没有致畸性,其安全存活大于100d,器官无变异现象发生。本专利技术进一步的,提供一种具有美白作用的化妆品、保健品或药物,所述化妆品或药物还有序列如SEQIDNO:1所示的多肽。在进一步的,本专利技术还提供一种具有美白和抗衰老作用的化妆品或药物,所述化妆品或药物中含有胚胎干细胞外泌体以及序列如SEQIDNO:1所示的多肽和维生素E。本专利技术还提供含有胚胎干细胞外泌体以及序列如SEQIDNO:1所示的多肽和维生素E在制备具有美白和抗衰老作用的保健品或者化妆品或药物中的用途。进一步的,本文所用术语“化妆品组合物”应当广义地理解,其包括那些旨在与人体外部接触的组合物(例如,皮肤,毛发系统,粘膜),专门或主要用于清洁,芳香,改变它们的外观,保护它们,保持它们的良好状态。在一些情况下,化妆品组合物还可包括其他美白或抗衰老物质本专利技术的组合物可另外包含常规化妆品添加剂和助剂,特别是选自脂肪,有机溶剂,离子或非离子增稠剂,柔软剂,抗氧化剂,特别是抗自由基抗氧化剂,遮光剂,稳定剂,润肤剂,硅氧烷。-羟基酸,消泡剂,水合物,维生素,香料,防腐剂,表面活性剂,填料,驱虫剂,螯合剂,聚合物,推进剂,碱化剂或酸化剂,染料和着色剂,或通常用于化妆品中的任何其它成分,特别是用于制备水包油型乳液形式的防晒剂/化妆品组合物。根据本专利技术的化妆品组合物可任选地进一步包括具有生物活性的试剂。这些试剂包括,例如,抗痤疮剂,抗菌剂,抗炎剂,镇痛药,抗红斑剂,止痒剂,抗皮肤剂,抗牛皮癣剂,抗真菌剂,皮肤保护剂,维生素,抗氧化剂,清除剂,抗刺激剂,抗菌剂,抗病毒剂,抗老化剂,原保护剂,毛发生长促进剂,毛发生长抑制剂,毛发去除剂,去屑剂,抗脂溢剂,剥落剂,创伤愈合剂,抗外寄生物剂,皮脂调节剂,免疫调节剂,激素,植物药,保湿剂,收敛剂,清洁剂,感受器,抗生素,麻醉剂,类固醇,组织愈合物质,组织再生物质,羟烷基脲,氨基酸,肽,矿物质,神经酰胺,生物透明质酸,维生素,皮肤增白剂,自鞣剂,辅酶Q10,烟酰胺,辣椒素,咖啡因,以及上述任何物质的任意组合。本专利技术的组合物可以根据本领域技术人员公本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.胚胎干细胞外泌体和多肽以及维生素E在制备美白和抗衰老的药物中的用途;其中,胚胎干细胞外泌体分离自商用的胚胎干细胞细胞系,所述多肽为SEQ ID NO:1所示的多肽;其中,所述外泌体的制备方法如下:将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基中在37℃、5%CO
【技术特征摘要】
1.胚胎干细胞外泌体和多肽以及维生素E在制备美白和抗衰老的药物中的用途;其中,胚胎干细胞外泌体分离自商用的胚胎干细胞细胞系,所述多肽为SEQIDNO:1所示的多肽;其中,所述外泌体的制备方法如下:将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基中在37℃、5%CO2低氧培养箱中培养;等到细胞已长满即可进行传代,具体步骤如下:弃去培养液,用PBS洗涤1-2次,加入1.0ml胰酶消化液,37℃消化,加入双倍的含10%血清的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液,将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散,加入新鲜的含10%血清和100ng/mLIFN-γ的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基,重悬细胞,进行传代培养,传代比例为1:2,传代连续培养16h后收集上清;将细胞培养上清转移至50mL离心管,300g离心10分钟;留取上清,2000g离心15分钟;留存上清,10000g离心30分钟;将上清转移至超速离心管中,并用天平配平,100000g离心70分钟;弃上清,用经0.22μm滤器滤过的PBS重悬,并用天平配平,100000g离心70分钟;弃上清,用PBS重悬外泌体;外泌体采用超滤离心管浓缩,即可得到外泌体。
2.胚胎干细胞外泌体和多肽以及维生素E在制备美白和抗衰老的化妆品中的用途;其中,胚胎干细胞外泌体分离自商用的胚胎干细胞细胞系,所述多肽为SEQIDNO:1所示的多肽;其中,所述外泌体的制备方法如下:将胚胎干细胞H9在mTeSR1人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基中在37℃、5%CO2低氧培养箱中培养;等到细胞已长满即可进行传代,具体步骤如下:弃去培养液,用PBS洗涤1-2次,加入1.0ml胰酶消化液,37℃消化,加入双倍的含10%血清的人ES/iPS细胞无饲养层完全培养基,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液,将细胞收集于离心管中离心1000rpm/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散,...
【专利技术属性】
技术研发人员:彭菲,李静,
申请(专利权)人:北京岳昊科技发展有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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