间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法技术

本发明专利技术公开了一种间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法。本发明专利技术用平衡盐溶液间歇性饥饿处理1‑5小时/天并持续5‑15天，处理结束后换成心肌细胞培养基，检测相关成熟指标提高。发现平衡盐溶液间歇性饥饿处理心肌细胞，可诱导了心肌细胞形态结构，代谢和电生理上的成熟，操作简单，成本低。因此，这是一种创新性的诱导心肌成熟的方式，有助于解决心肌细胞成熟度低的问题，同时也可推动多能干细胞在心血管病中的临床应用。

【技术实现步骤摘要】
间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及一种间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法。
技术介绍
心血管疾病已成为人类健康的头号杀手，最常见的疾病类型是心肌梗死，其主要特征是由冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死。由于成年心肌细胞的再生能力有限，原代人心肌细胞在体外难以获得和维持，心脏疾病研究和治疗面临瓶颈。人多能干细胞(PSC)主要包括胚胎干细胞(ESC)和诱导多能干细胞(iPSC)，其可在体外高效诱导分化为心肌细胞，且操作简单。在心脏病建模、药物发现和细胞治疗等方面显示出巨大潜力。但由于体外培养环境的不同和培养技术上的局限，PSC来源心肌细胞(PSC-CM)的生理状态无法像成体心肌细胞那样成熟，而更接近于胎儿心肌细胞状态。PSC-CM的不成熟特征阻碍了心血管疾病的研究进程和治疗效果。所以，提高PSC-CM的成熟度是亟待解决的问题。心肌细胞成熟的主要特征包括成熟性肥大、有组织性规律性肌原纤维排列、线粒体DNA拷贝数增加、氧化磷酸化能力增加、以及电生理和钙生理能力增强等。目前，用于提高PSC-CM成熟的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、获得纯化的心肌细胞，清洗并去除表面培养液；/nS2、加入平衡盐溶液进行饥饿处理1～5小时，换回心肌细胞培养基培养19～23小时；/nS3、按照S1～S2步骤处理方法，连续处理5～15天进行间歇性饥饿；/nS4、间歇性饥饿后继续培养，获得成熟心肌细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种间歇性饥饿促进心肌细胞成熟的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、获得纯化的心肌细胞，清洗并去除表面培养液；
S2、加入平衡盐溶液进行饥饿处理1～5小时，换回心肌细胞培养基培养19～23小时；
S3、按照S1～S2步骤处理方法，连续处理5～15天进行间歇性饥饿；
S4、间歇性饥饿后继续培养，获得成熟心肌细胞。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的心肌细胞为多能干细胞分化的心肌细胞或分离的原代心肌细胞或商业化的心肌细胞系。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的商业化的心肌细胞系包括HL-1心肌细胞系或H9C2心肌细胞系。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在S1步骤中，清洗采用缓冲液进行清洗。


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【专利技术属性】
技术研发人员：胡士军，雷伟，杨静思，于淼，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32