一种抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体3C11制造技术

本发明专利技术公开了一种抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体3C11，所述纳米抗体具有独特的CDR区，与抗绿脓杆菌外毒素A具有极高的亲和力，本还公开了筛选所述纳米抗体的方法。所述方法操作简单、筛选周期短，既避免了噬菌体污染的风险，又提高了筛选效率，大大较少了工作量，经济成本低，适合于工业化的大批量筛选要求。

【技术实现步骤摘要】
一种抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体3C11本专利技术专利申请是申请日为2018年2月12日，申请号为CN201810143471.6的中国专利技术专利申请“一种利用流式细胞分选筛选纳米抗体的方法”的分案申请。
本专利技术公开一种纳米抗体，属于多肽

技术介绍
1993年，Hamers-Casterman等研究发现，在骆驼科动物(骆驼，单峰骆驼和美洲驼)的体内发现了一类仅有重链二聚体抗体H2，其主要是IgG2和IgG3类型。此类抗体由于缺乏轻链，于是将这种抗体称为仅有重链的抗体(heavychain-only-likeAntibody，HCAbs)，而它们的抗原结合部位由一个结构域组成，称为VHH区，因此该类抗体也被称为单结构域抗体或者单域抗体(sdAb)。由于该类抗体为去除恒定区后的可变区序列，分子量只有15kD，大约10纳米的直径，因此也被称为纳米抗体(Nbs)。另外，在鲨鱼中也观察到这类单结构域抗体，称为VNAR。这种仅有重链的抗体原来只是作为一种人类B细胞增生性疾病(重链病)的病理形式被人们所认识，这种仅有重链的抗体可能是由本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的可变区具有3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1序列由SEQ ID NO.6所述氨基酸序列组成，CDR2序列由SEQ ID NO.7所述氨基酸序列组成，CDR3序列由SEQ ID NO.8所述氨基酸序列组成。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的可变区具有3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1序列由SEQIDNO.6所述氨基酸序列组成，CDR2序列由SEQIDNO.7所述氨基酸序列组成，CDR3序列由SEQIDNO.8所述氨基酸序列组成。


2.根据权利要求1所述抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的可变区序列由SEQIDNO.9所述氨基酸序列组成。


3.一种编码权利要求2所述抗绿脓杆菌外毒素A纳米抗体氨基酸序列的核苷酸，所述核苷酸序列由SEQIDNO.10所示。


4.权利要求1或2所述抗绿脓杆菌外毒素A的纳米抗体的筛选方法，所述方法步骤包括：
(1)收集被免疫靶抗原的骆驼科动物的外周血B淋巴细胞；
(2)应用靶抗原通过流式细胞术分选所述B淋巴细胞为单细胞，其中，所述靶抗原和所述B淋巴细胞分别被颜色相异的显色染料所标记，所述流式细胞术分选为双色筛选；
(3)将分选好的单个B淋巴细胞直接加热冷却后进行逆转录反应生成cDNA；
(4)以cDNA为模板，PCR扩增抗体重链序列并回收扩增产物；
(5)以步骤(4)扩...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋海鹏，刘原源，于建立，周宇杭，李飞，古一，
申请(专利权)人：深圳市国创纳米抗体技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44