抗CLL1抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了抗CLL1抗体及其应用，所述抗CLL1抗体可变区包括SEQ ID NO:1～6、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:7～11或SEQ ID NO:12～17的CDR。本发明专利技术的抗CLL1抗体对游离和细胞表面CLL1均具有显著的结合能力，经过人源化改造后，进一步提高了抗体与CLL1的亲和力，在肿瘤的临床诊断和/或治疗方面具有重要的应用前景。景。景。

【技术实现步骤摘要】
抗CLL1抗体及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及抗CLL1抗体及其应用。

技术介绍

[0002]C型凝集素样分子1(CLL1)，又称C型凝集素域家族12成员A(CLEC12A)，在文献和数据库中还有DCAL
‑
2、MICL、CD371等名称，是一种II型跨膜蛋白，全长265个氨基酸，分子量为30762道尔顿，编码基因位于chr12:9,951,268～9,995,694(GRCh38/hg38)。目前一些主流数据库中CLL1基因的识别码如下：Q5QGZ9(UniprotKB)、31713(HGNC)、160364(Entrez Gene)、ENSG00000172322(Ensembl)和(612088)OMIM。
[0003]研究表明，CLL1限制性地表达于造血细胞上，主要包括外周血和骨髓中髓系来源的细胞，比如单核细胞、树突状细胞、粒细胞以及大多数急性髓细胞白血病(AML)细胞。值得注意的是，虽然CLL1大量表达于外周血和骨髓中的髓细胞上，但是在外周组织中的髓系来源的细胞上不表达，比如组织巨噬细胞和组织树突状细胞均不表达CLL1。研究还发现，CLL1表达于AML干细胞(CD34+/CD38
‑
)以及一小部分造血祖细胞(CD34+/CD38+或者CD34+/CD33+)上，但是在正常的造血干细胞(CD34+/CD38
‑
或者CD34+/CD33
‑
)上不表达。由于这种特殊的表达模式，CLL1有望成为潜在的诊断和治疗AML的靶点。
[0004]目前已知的人CLL1基因包括7个转录本，其中5个编码蛋白质，人CLL1蛋白是一种膜受体，经典结构的胞外段具有C型凝集素结构域，胞内段具有免疫受体酪氨酸基序(ITIM)，磷酸化ITIM与含SH2结构域的磷酸酶结合，发挥负性调节粒细胞和单核细胞的功能。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了抗CLL1抗体及其应用，所述抗体单独和/或与其他药物联合用于癌症和自身免疫性疾病的治疗。
[0006]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供了抗CLL1抗体，所述抗CLL1抗体包括重链可变区和轻链可变区；
[0008]所述重链可变区包括SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:14所示的CDR3；
[0009]所述轻链可变区包括SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:17所示的CDR3；
[0010]所述重链可变区还包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0011]所述重链可变区还包括SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:13所示的CDR2；
[0012]所述轻链可变区还包括SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:15所示的CDR1；
[0013]所述轻链可变区还包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:16所示的CDR2。
[0014]本专利技术中，抗体的重链可变区的CDR1～3和轻链可变区的CDR1～3共同决定抗体对抗原的特异性识别结合能力，含有SEQ ID NO:1～6、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:7～11或SEQ ID NO:12～17的CDR的抗体对CLL1蛋白具有显著的结合能力。
[0015]在一个具体实施例中，所述抗CLL1抗体23D7的重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的CDR1、SEQ ID NO:2所示的CDR2、SEQ ID NO:3所示的CDR3；
[0016]所述抗CLL1抗体23D7的轻链可变区包括SEQ ID NO:4所示的CDR1、SEQ ID NO:5所示的CDR2、SEQ ID NO:6所示的CDR3；
[0017]SEQ ID NO:1：RYWMH；
[0018]SEQ ID NO:2：YIYPGSGTSNYDEKFKS；
[0019]SEQ ID NO:3：EARYTMDY；
[0020]SEQ ID NO:4：SASSSVSYIY；
[0021]SEQ ID NO:5：DTSNLAS；
[0022]SEQ ID NO:6：QQWSSFP。
[0023]本专利技术中，包含SEQ ID NO:1～3的重链可变区CDR和SEQ ID NO:4～6的轻链可变区CDR的抗CLL1抗体23D7具有CLL1蛋白结合活性。
[0024]优选地，所述抗CLL1抗体23D7的重链可变区包括SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列，轻链可变区包括SEQ ID NO:19所示的氨基酸序列；
[0025]SEQ ID NO:18：
[0026]QVQLQQPGSDLVRPGASVKLSCKASGYTFTRYWMHWVKQRPGHGLEWIGYIYPGSGTSNYDEKFKSKATLTVDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCTREARYTMDYWGQGTSVTVSS；
[0027]SEQ ID NO:19：
[0028]QIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYIYWYQQKPGSSPGLLIYDTSNLASGVPVRFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQWSSFPPTFGAGTKLELK。
[0029]在一个具体实施例中，所述抗CLL1抗体19C1的重链可变区包括SEQ ID NO:7所示的CDR1、SEQ ID NO:8所示的CDR2、SEQ ID NO:9所示的CDR3；
[0030]所述抗CLL1抗体19C1的轻链可变区包括SEQ ID NO:10所示的CDR1、SEQ ID NO:5所示的CDR2、SEQ ID NO:11所示的CDR3；
[0031]SEQ ID NO:7：SYWIE；
[0032]SEQ ID NO:8：EIFPGSGSIKYNEKFKG；
[0033]SEQ ID NO:9：GGTYNDYSLFDY；
[0034]SEQ ID NO:10：SASSSVSYMY；
[0035]SEQ ID NO:11：QQWSSYP。
[0036]本专利技术中，包含SEQ ID NO:7～9的重链可变区CDR和SEQ ID NO:5、10～11的轻链可变区CDR的抗CLL1抗体19C1具有CLL1蛋白结合活性。
[0037]优选地，所述抗CLL1抗体19C1的重链可变区包括SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列，轻链可变区包括SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列；
[0038]SEQ ID NO:20：
[0039]QVQLQQSGAELMKPGASVKISCKATGYTFSSYWIEWVKQRPGHGLEWIGEIFPGSGSIKYNEKF本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗CLL1抗体，其特征在于，所述抗CLL1抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:14所示的CDR3；所述轻链可变区包括SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:17所示的CDR3。2.根据权利要求1所述的抗CLL1抗体，其特征在于，所述重链可变区还包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:12所示的CDR1；优选地，所述重链可变区还包括SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:13所示的CDR2；优选地，所述轻链可变区还包括SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:15所示的CDR1；优选地，所述轻链可变区还包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:16所示的CDR2。3.根据权利要求1或2所述的抗CLL1抗体，其特征在于，所述抗CLL1抗体的重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的CDR1、SEQ ID NO:2所示的CDR2、SEQ ID NO:3所示的CDR3；所述抗CLL1抗体的轻链可变区包括SEQ ID NO:4所示的CDR1、SEQ ID NO:5所示的CDR2、SEQ ID NO:6所示的CDR3；优选地，所述抗CLL1抗体的重链可变区包括SEQ ID NO:7所示的CDR1、SEQ ID NO:8所示的CDR2、SEQ ID NO:9所示的CDR3；所述抗CLL1抗体的轻链可变区包括SEQ ID NO:10所示的CDR1、SEQ ID NO:5所示的CDR2、SEQ ID NO:11所示的CDR3；优选地，所述抗CLL1抗体的重链可变区包括SEQ ID NO:12所示的CDR1、SEQ ID NO:13所示的CDR2、SEQ ID NO:14所示的CDR3；所述抗CLL1抗体的轻链可变区包括SEQ ID NO:15所示的CDR1、SEQ ID NO:16所示的CDR2、SEQ ID NO:17所示的CDR3。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的抗CLL1抗体，其特征在于，所述抗CL...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗敏，李光超，丁雯，周兆，王学俊，
申请(专利权)人：广州百暨基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：