肿瘤乳酸微环境相关非编码小RNA分子谱及其应用制造技术

本发明专利技术属生物化学与分子生物学技术领域，具体涉及扩增和分析人类细胞编码的hsa‑miR‑9‑5p，hsa‑miR‑210‑3p，hsa‑miR‑7‑5p，hsa‑miR4521，hsa‑miR‑7974和tiRNA

【技术实现步骤摘要】
肿瘤乳酸微环境相关非编码小RNA分子谱及其应用
本专利技术属生物化学与分子生物学领域，具体涉及扩增和分析人类细胞编码的hsa-miR-9-5p，hsa-miR-210-3p，hsa-miR-7-5p，hsa-miR4521，hsa-miR-7974和tiRNAHisGUG，以及其表达情况，和应用于预测恶性淋巴瘤的预后效果和治疗。
技术介绍
现有技术公开了小分子RNA包括microRNA(miRNA)、转运RNA(tRNA)、Piwi蛋白相关RNA(piRNA)、小核仁RNA(snoRNA)、小核RNA(snRNA)和核糖体RNA(rRNA)等。miRNA是一类长度在18-25nt左右的非编码小RNA，在生物体内的表达具有时序性，保守性，组织特异性和疾病特异性，可通过与靶基因互补结合，负调控mRNA的表达，在细胞增殖分化、凋亡、胚胎发育、血管生成等多种生命活动中发挥作用，可作为肿瘤诊断性、治疗性、预测性的生物标记物。研究表明了肿瘤微环境(tumormicroenviroment,TME)是肿瘤细胞赖以生存的复杂内环境，由肿瘤细胞和其周围环本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定量小分子RNA的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：/n(1)收集样本；样本处于含有乳酸的环境，乳酸的浓度范围是100-250U/L；/n(2)茎环法定量PCR；/n(3)获得目标miRNA分子或者5’-tiRNA分子。/n

【技术特征摘要】
1.一种定量小分子RNA的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)收集样本；样本处于含有乳酸的环境，乳酸的浓度范围是100-250U/L；
(2)茎环法定量PCR；
(3)获得目标miRNA分子或者5’-tiRNA分子。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的样本是离体的实体瘤样本，或者加入乳酸用于模拟肿瘤微环境的样本。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的样本是体外培养的恶性淋巴瘤细胞。


4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括深度测序的步骤。


5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述目标miRNA分子是hsa-miR-9-5p、hsa-miR-210-3p、hsa-miR-7-5p、hsa-miR4521或者hsa-miR-7974；
所述的5’-tiRNA分子是5’-tiRNAHisGUG。


6.一种肿瘤检测标志物，其特征在于，它通过权利要求1的方法获得。


7.如权利要求6所述的肿瘤检测标志物，其特征在于，它含有hsa-miR-9-5p、hsa-miR-210-3p、hsa-miR-7-5p、hsa-miR4521、hsa-miR-7974或者5’-tiRNAHisGUG中的一种或者几种，或者这些RNA相对应的DNA。


8.如权利要求6所述的肿瘤检测标志物，其特征在于，
hsa-miR-9-5p的成熟核苷酸序列如SEQIDNO1所示；
hsa-miR-210-3p的成熟核苷酸序列如SEQIDNO2所示；
hsa-miR-7-5p的成熟核苷酸序列如SEQIDNO3所示；
hsa-miR4521的成熟...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡启良，陈小亭，莫小辉，都树娟，朱彩霞，王玉燕，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31