一种多功能酶基因HG27及应用制造技术

本发明专利技术通过把中华竹鼠肠道微生物宏转录组拼接后的核酸序列与糖苷水解酶家族比对，筛选有较高同源性的序列，去除其原有的信号肽并添加猪腮腺分泌蛋白信号肽，通过猪密码子优化后连接到pcd3.1载体上。转染到猪肾上皮细胞进行表达验证，收集其细胞培养液进行酶活分析，比较其酶活力，选择最优的HG27基因，检测其最适pH、蛋白耐受和不同底物的酶促反应。从而，获得了一种多功能酶基因HG27，其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备，食品和药品行业等领域应用，以解决纤维素难降解吸收和排泄物污染环境的问题。境的问题。境的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种多功能酶基因HG27及应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，特别涉及一种多功能酶基因HG27及应用。

技术介绍

[0002]纤维素酶是组成最丰富的可再生资源木质纤维素的主要物质，普遍存在富含半纤维素和木质素的植物细胞壁中。但由于其不溶性和晶体结构，难以广泛用于饲料，生物燃料，果汁等领域，其中纤维素酶是生物燃料工业中使用的关键酶。动物肠道中广泛聚集大量的微生物，被认为是降解纤维素的最有效生态系统，如植食型动物牛、猪、竹鼠等。因此从动物肠道微生物中寻找纤维素酶或许是寻找优良的纤维素降解酶的最好的方式之一。由于传统的采用模拟自然培养法，不仅工作量大，而且操作繁琐，候选基因筛查效率较低，迄今为止，已有从各种物种的肠道菌群挖掘出来的能在真核表达系统表达的、活性较高的纤维素酶或葡聚糖酶，如表1所示。
[0003]表1适应真核细胞表达模式的纤维素酶和葡聚糖酶
[0004]
技术实现思路

[0005]本专利技术通过把宏转录组拼接后的核酸序列与糖苷水解酶家族有较高同源性的序列，去除原有的信号肽并添加猪腮腺分泌蛋白信号肽，通过猪密本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27的核苷酸序列包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。2.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27的核苷酸序列包括与SEQ ID NO:1具有80％同源性的序列。3.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27包含猪信号肽序列，其核苷酸序列包括如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。4.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。5.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27的氨基酸序列包括与SEQ ID NO:2具有85％同源性的氨基酸序列。6.一种多功能酶基因HG27，其中，所述多功能酶基因HG27包含猪信号肽序列，其氨基酸序列包括如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。7.一种具有纤维素酶和葡聚糖酶活性的多功能性酶，其中，所述的多功能性酶含有如权利要求4
‑
6任一项所述的氨基酸序列。8.权利要求1
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6任一项所述的多功能酶基因HG27在制备畜禽饲料酶制剂上的应用；优选的，在制备纤维素酶、微晶纤维素酶、低粘度羧乙基纤维素酶或葡聚糖酶任一项或多项酶制剂上的应用；优选的，在制备具有强胰蛋白酶耐受性的纤维素酶、微晶纤维素酶、低粘度羧乙基纤维素酶或葡聚糖酶任一项或多项酶制剂上的应用。9...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴珍芳，张献伟，黄广燕，王豪强，杨善欣，莫健新，蔡更元，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：