褐藻糖胶的酶促水解制造技术

来自嗜冷单胞菌属的菌种的岩藻糖酶，包括P5AFcnA岩藻糖酶和P19DFcnA岩藻糖酶。还有与之相关的方法、系统、组合物等，包括在被这样的岩藻糖酶水解后具有降低的平均分子量的褐藻糖胶组合物。糖胶组合物。糖胶组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】褐藻糖胶的酶促水解

技术介绍

[0001]褐藻糖胶(包括岩藻多糖)是硫酸酯化的多糖。一般而言，这意味着褐藻糖胶是由许多糖基团组成的分子，并且还具有附接到糖基团上的硫原子。主要的糖基团称为“岩藻糖”，它是具有6个碳原子并且具有化学式C6H
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O5的糖。“岩藻多糖”(或墨角藻多糖)指示衍生自褐藻(海藻)的褐藻糖胶。褐藻糖胶可以单独存在，或者存在于其他糖的混合物中，例如存在于诸如木糖、半乳糖、葡萄糖、葡糖醛酸和/或甘露糖之类的糖的混合物中。这些其他糖可以与褐藻糖胶一起提取自海藻或其他来源。尽管褐藻糖胶目前衍生自天然来源诸如本文提及的褐藻(海藻)、海参等，但“褐藻糖胶”包括具有如本文所讨论的褐藻糖胶的化学和结构基序的聚合物分子，而与褐藻糖胶的一种或多种最终来源无关。
[0002]岩藻多糖可获自多种褐藻物种，包括但不限于：小腺囊藻(Adenocystis utricularis)、泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、绳藻(Chorda filum)、Cystoseirabies marina、南极公牛藻(Durvillaea antarc本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，其包含水溶液形式的P5AFcnA岩藻糖酶和添加的褐藻糖胶。2.一种组合物，其包含水溶液形式的P19DFcnA岩藻糖酶和添加的褐藻糖胶。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，所述添加的褐藻糖胶为原料褐藻糖胶组合物。4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中，所述组合物的pH为约6.5
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9.0。5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中，所述组合物的温度为约15℃
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40℃。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中，所述组合物处于这样的条件：所述条件使得所述岩藻糖酶能够水解褐藻糖胶中的糖苷键。7.一种通过真核实体产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4，其中，少于5％的密码子被取代。8.一种通过嗜冷单胞菌属的菌种(Psychromonas species)产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3，其中，至少1个密码子和少于5％的密码子被取代。9.一种通过嗜冷单胞菌属的菌种产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4，其中，少于5％的密码子被取代。10.一种通过除嗜冷单胞菌属的菌种以外的原核实体产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4，其中，少于5％的密码子被取代。11.一种通过真核实体产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8，其中，少于5％的氨基酸被取代。12.一种通过嗜冷单胞菌属的菌种产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7，其中，至少1个氨基酸和少于5％的氨基酸被取代。13.一种通过嗜冷单胞菌属的菌种产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8，其中，少于5％的氨基酸被取代。14.一种通过除嗜冷单胞菌属的菌种以外的原核实体产生的岩藻糖酶，所述岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8，其中，少于5％的氨基酸被取代。15.根据权利要求10或14所述的岩藻糖酶，其中，所述原核实体为大肠杆菌(E.Coli.)。16.一种方法，其包括：使用嗜冷单胞菌属岩藻糖酶在人造水溶液中选择性地酶促水解褐藻糖胶。17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，其中，少于5％的密码子被取代。18.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，其中，
少于3％的密码子被取代。19.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶由根据以下各项中的任一项的基因序列编码：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，其中，少于1％的密码子被取代。20.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8，其中，少于5％的氨基酸被取代。21.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8，其中，少于3％的氨基酸被取代。22.根据权利要求16所述的方法，其中，所述嗜冷单胞菌属岩藻糖酶包含根据以下各项中的任一项的氨基酸序列：SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8，其中，少于1％的氨基酸被取代。23.根据权利要求16所述的方法，其中，所述褐藻糖胶是从以下各项中的至少一项获得的岩藻多糖：小腺囊藻(Adenocystis utricularis)、泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、绳藻(Chorda filum)、Cystoseirabies marina、南极公牛藻(Durvillaea antarctica)、褐藻门昆布(Ecklonia kurome)、极大昆布(Ecklonia maxima)、爱森藻(Eisenia bicyclis)、岩藻(Fucus evanescens)、墨角藻(Fucus vesiculosis)、羊栖菜(Hizikia fusiforme)、伸长海条藻(Himanthalia Elongata)、笼目海带(Kjellmaniella crassifolia)、Laminaria brasiliensis、拟菊苣海带(Laminaria cichorioides)、极北海带(Laminaria hyperborea)、日本真海带(Laminaria japonica)、糖海带(Laminaria saccharina)、Lessonia trabeculata、巨藻(Macrocystis pyrifera)、Pelvetia fastigiata、沟鹿角菜(Pelvetia Canaliculata)、Saccharina japonica、糖海带(Saccharina latissima)、Sargassum stenophylum、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、海嵩子(Sargassum confusum)、马尾藻科植物羊栖菜(Sargassum fusiforme)及裙带菜(Undaria pinnatifida)。24.根据权利要求16所述的方法，其中，所述褐藻糖胶是从以下各项中的至少一项获得的岩藻多糖：Saccharina japonica、极北海带(Laminaria hyperborea)、巨藻(Macrocystis pyifera)和绳藻(Chorda filum)。25.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低至少5％。26.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约10％。27.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约20％。28.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约30％。29.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约40％。
30.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约50％。31.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约60％。32.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约70％。33.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约80％。34.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约90％。35.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶的平均分子量降低约95％。36.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶中的至少5％的糖苷键被水解。37.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶中的至少10％的糖苷键被水解。38.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶中的至少20％的糖苷键被水解。39.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶中的至少30％的糖苷键被水解。40.根据权利要求16
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24中任一项所述的方法，其中，所述褐藻糖胶中的至少40％的糖苷键被水解。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：A博拉斯顿，CJ维克斯，OE萨拉马阿尔伯，KT阿贝，
申请(专利权)人：ARC医疗器械股份有限公司，
类型：发明
国别省市：