HBV PreS1多肽修饰的人肝细胞特异靶向性的rAAV2载体及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了HBV PreS1多肽修饰的人肝细胞特异靶向性的rAAV2载体及其制备方法和用途。本发明专利技术运用同源重组法，将preS1多肽基因插入rAAV 2的衣壳质粒，构建得到改造质粒；然后通过三质粒共转染HEK293细胞对改造质粒进行包装，再对病毒载体进行纯化以及检测后，得到具有肝靶向性的改造病毒载体，在肝脏的基因编辑与基因治疗研究领域具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
HBVPreS1多肽修饰的人肝细胞特异靶向性的rAAV2载体及其制备方法和用途
本专利技术属于生物医学范畴中病毒载体
，具体涉及重组腺相关病毒载体及其临床应用前景。
技术介绍
我国是肝脏疾病的高发地区，肝癌更是危害我国国民健康的主要恶性肿瘤之一，迄今没有理想的根治药物。而随着生物医学科技的飞速发展，基因编辑与基因疗法有望成为人类战胜各类疾病的新技术之一。重组腺相关病毒(rAAV)作为常用的递送外源目的基因的载体之一，具有稳定性高、致病性低、免疫原性低、宿主范围广，能够介导外源基因长期表达等优点，因此被视为最有发展前景的基因治疗载体之一。但由于AAV的主要细胞受体硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)的广泛分布于各种细胞的细胞膜上，所以天然血清型的AAV不具有特定组织和器官的靶向性。因此，研究人员尝试通过多种手段以期赋予AAV新的靶向性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有基因编辑与基因治疗技术的不足之处，提供了HBVPreS1多肽修饰的人肝细胞特异靶向性的rAAV2载体及其制备方法和用途。本专利技术解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HBV PreS1多肽修饰的rAAV2载体，其特征在于：在所述HBV PreS1多肽修饰的rAAV2载体的氨基酸序列中含有PreS1多肽序列，所述PreS1多肽序列选自：氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的PreS1-1、氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的PreS1-2、氨基酸序列如SEQID No.5所示的PreS1-3、氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的PreS1-4、或氨基酸序列如SEQID No.8所示的PreS1-6。/n

【技术特征摘要】
1.一种HBVPreS1多肽修饰的rAAV2载体，其特征在于：在所述HBVPreS1多肽修饰的rAAV2载体的氨基酸序列中含有PreS1多肽序列，所述PreS1多肽序列选自：氨基酸序列如SEQIDNo.3所示的PreS1-1、氨基酸序列如SEQIDNo.4所示的PreS1-2、氨基酸序列如SEQIDNo.5所示的PreS1-3、氨基酸序列如SEQIDNo.6所示的PreS1-4、或氨基酸序列如SEQIDNo.8所示的PreS1-6。


2.一种编码HBVPreS1多肽修饰的rAAV2载体的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子的序列为：在pAAV-H22质粒的587号位点插入有编码PreS1多肽的基因序列；所述PreS1多肽选自：氨基酸序列如SEQIDNo.3所示的PreS1-1、氨基酸序列如SEQIDNo.4所示的PreS1-2、氨基酸序列如SEQIDNo.5所示的PreS1-3、氨基酸序列如SEQIDNo.6所示的PreS1-4、或氨基酸序列如SEQIDNo.8所示的PreS1-6。


3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：编码所述PreS1-1的基因序列的相应的引物对包括如SEQIDNo.9所示的上游引物和如SEQIDNo.10所示的下游引物，编码所述PreS1-2的基因序列的相应的引物对包括如SEQIDNo.11所示的上游引物和如SEQIDNo.12所示的下游引物，编码所述PreS1-3的基因序列的相应的引物对包括如SEQIDNo.13所示的上游引物和如SEQIDNo.14所示的下游引物，编码所述PreS1-4的基因序列的相应的引物对包括如SEQIDNo.15所示的上游引物和如SEQIDNo.16所示的下游引物，编码所述PreS1-6的基因序列的相应的引物对包括如SEQIDNo.19所示的上游引物...

【专利技术属性】
技术研发人员：许瑞安，刘艳君，崔秀灵，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：福建;35