一种牛胎盘外泌体的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种牛胎盘外泌体的制备方法。本发明专利技术结合胎盘的结构特点通过冻融、两次特定的超声、过滤等物理学方法有效地去除了牛胎盘组织中其他杂质成分，最终获得了富含外泌体的无菌产物。该方法对牛胎盘外泌体的提取率高，工艺稳定性好。实验表明，本发明专利技术制得的牛胎盘外泌体具有良好的完整性和生物学活性，在一定的浓度范围内，具有促进人皮肤成纤维细胞增殖的功效。

【技术实现步骤摘要】
一种牛胎盘外泌体的制备方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种牛胎盘外泌体的制备方法。
技术介绍
近年来动物胎盘的研究不断增多，许多动物胎盘如牛、羊、鹿、驴等的生理活性被不断发现。动物胎盘提取物是来源于动物胎盘的一类复合活性成分，含有丰富的氨基酸、蛋白质、卵磷脂、多糖体、维生素、矿物元素等，具有增强记忆、抗应激、调节内分泌、增强免疫力、延缓衰老等功效，根据目前相关研究报道，胎盘提取物具有促进末梢血液循环、促进细胞及组织呼吸、去除自由基、保湿、免疫赋活及美颜等多种生物学作用。目前，已有多种利用胎盘提取有效活性物质的专利。这些专利获取胎盘提取物的方法主要以下3种：(1)直接提取法：胎盘组织经匀浆后加提取液提取，或胎盘匀浆后反复冻融法提取，提取液离心、冻干即可。(2)超临界CO2萃取法：胎盘组织冻干、粉碎、超临界萃取后，萃取物匀浆、离心，冻干离心液。(3)酶辅助提取法：胎盘经1-2种蛋白酶适度酶解后，离心、冻干离心液。这些胎盘提取物的制备方法及产品存在以下缺点：(1)获得的胎盘提取物以大分子蛋白为主，人体吸收效率低；(2)缺乏提取液精制工艺，产本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牛胎盘外泌体的制备方法，其特征在于，包括：/n取牛胎盘匀浆，匀浆液冻融；/n将解冻后的匀浆液进行第一轮超声处理，过滤，滤液-80℃冷冻保存；/n滤液4℃解冻，离心，取上清液进行第二轮超声处理，经滤网多级过滤，获得牛胎盘细胞外泌体；/n所述第二轮超声为每间隔8s进行一次超声，每次超声时间为8s，所述第二轮超声的功率为100～700w，超声累计的总时间为30～60min。/n

【技术特征摘要】
1.一种牛胎盘外泌体的制备方法，其特征在于，包括：
取牛胎盘匀浆，匀浆液冻融；
将解冻后的匀浆液进行第一轮超声处理，过滤，滤液-80℃冷冻保存；
滤液4℃解冻，离心，取上清液进行第二轮超声处理，经滤网多级过滤，获得牛胎盘细胞外泌体；
所述第二轮超声为每间隔8s进行一次超声，每次超声时间为8s，所述第二轮超声的功率为100～700w，超声累计的总时间为30～60min。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述冻融为-80℃冻存12-24h后室温溶解；所述冻融的次数为1-5次。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一轮超声的功率为990w，时间为30min。

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【专利技术属性】
技术研发人员：陈海佳，李学家，姜交华，周爱梅，陶立，崔梓豪，陈东煌，
申请(专利权)人：广州赛莱拉生物基因工程有限公司，广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44