一株假单胞菌DNF-23及提高假单胞菌脱氮效率的方法技术

本发明专利技术涉及微生物脱氮技术领域，提供了一株假单胞菌DNF‑23及提高假单胞菌脱氮效率的方法。本发明专利技术首次分离得到一株异养硝化‑好氧反硝化假单胞菌DNF‑23菌株，于2019年7月5日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC No:60713。本发明专利技术提供了一种纳米Fe

【技术实现步骤摘要】
一株假单胞菌DNF-23及提高假单胞菌脱氮效率的方法
本专利技术涉及微生物脱氮
，具体涉及一株假单胞菌DNF-23及提高假单胞菌脱氮效率的方法。
技术介绍
随着工农业的快速发展，水体污染问题日益加剧，污染物进入水体后超过了其自净能力，造成了水体污染，其中水体氮素污染现象较为严重，硝酸盐由于其高的水溶性特征，可能是水中主要的氮污染物。高浓度的硝酸盐会引起环境问题，如河流的富营养化和水源的恶化，以及危害人类健康。因此解决环境水体硝酸盐污染问题刻不容缓，目前用于含氮水体处理的方法主要分为物化法和生物脱氮法两种。由于生物脱氮处理成本低，且对环境无二次污染，成为目前最常用的污水脱氮方法之一，但传统的硝化-反硝化生物脱氮方法存在着工艺复杂、运行管理要求高等缺点，大大限制了生物脱氮技术的应用和发展。与传统硝化、异养反硝化菌相比，异养硝化-好氧反硝化菌能在一个生物反应器中同时进行硝化和反硝化，比传统硝化细菌具有更高的生长率、耐有机负荷能力，具有简化设备、节约成本、反硝化过程无需额外投加碳源等优点。近年来，陆续有学者筛选出一些具有异养硝化-好氧反硝化能力的假单胞菌(Pseudomonas)，例如：公布号为CN110669689A的中国专利公开了一株异样硝化-好氧反硝化菌及应用，该硝化-好氧反硝化施氏假单胞菌GEP-01在24h对氨氮的去除率为80％；公布号CN111607543A公开的一株具有好氧反硝化功能的施氏假单胞菌，该菌株在24h对硝态氮去除率可达91％以上；公布号为CN110655197A公开了一种利用异养硝化-好氧反硝化的假单胞菌菌株处理硝酸盐氮废水的方法，该菌在24h硝酸盐氮去除率可达90％以上。尽管目前已经发现很多具有较高脱氮性能的异养硝化-好氧反硝化菌，但它们去除水中氮素的速度通常较慢，很难在短时间内达到比较高的脱氮效率。如何寻找一种能够提高微生物脱氮效率的方法成为了微生物脱氮领域中越来越受关注的问题。
技术实现思路
为了丰富本专利技术异养硝化-好氧反硝化菌株资源库，本专利技术提供了一株假单胞菌DNF-23。本专利技术还提供了假单胞菌DNF-23在制备生物脱氮剂方面的应用。针对现有假单胞菌脱氮技术中的不足，本专利技术提供一种提高假单胞菌脱氮效率的方法。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：一株假单胞菌(Pseudomonassp.)DNF-23，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间为2019年7月5日，保藏编号为GDMCCNo:60713。本专利技术假单胞菌DNF-23菌株的16SrDNA基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。本专利技术还提供了假单胞菌DNF-23在水体脱氮方面的应用。本专利技术还提供了一种提高假单胞菌脱氮效率的方法，所述方法包括将纳米Fe2O3与所述假单胞菌DNF-23共同用于含氮水体脱氮。本专利技术提供了纳米Fe2O3与所述假单胞菌DNF-23共同用于脱氮的方法，其中，纳米Fe2O3能够更好的被假单胞菌DNF-23利用，有益于增强脱氮酶的活性，使得假单胞菌DNF-23的脱氮时间显著缩短，去除率也有所提升，纳米Fe2O3与假单胞菌DNF-23联用能够达到协同增强脱氮效率的作用。优选地，所述假单胞菌DNF-23在含氮水体的接种量为1％～5％。优选地，所述假单胞菌DNF-23在含氮水体的接种量为2％。优选地，所述纳米Fe2O3的浓度为1～150mg/L。更优选地，所述纳米Fe2O3的浓度为40～100mg/L。优选地，所述纳米Fe2O3的粒径为1～100nm。更优选地，所述纳米Fe2O3的粒径为50～100nm。优选地，所述含氮水体中包含硝态氮和/或氨氮。优选地，所述含氮水体的硝态氮浓度为10～600mg/L。更优选地，所述含氮水体的硝态氮浓度为100～300mg/L。优选地，所述含氮水体的氨氮浓度为10～600mg/L。更优选地，所述含氮水体的氨氮浓度为100～300mg/L。优选地，所述含氮水体的pH为7～9。优选地，所述含氮水体的温度为25～30℃。优选地，所述脱氮的时间为12～24h。优选地，所述含氮水体的COD/TN为7～9。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了一株假单胞菌(Pseudomonassp.)DNF-23及提高假单胞菌脱氮效率的方法，通过将假单胞菌DNF-23与纳米Fe2O3共同用于脱氮，较假单胞菌DNF-23单独使用耗时短，脱氮率高，纳米Fe2O3与假单胞菌DNF-23起到了协同增强脱氮的作用。当浓度为50mg/L的纳米Fe2O3与假单胞菌DNF-23共同加入含氮水体进行脱氮时，在12h内对水体中的氨氮、硝酸盐以及总氮的去除率分别为86.9％、85.7％、72.7％，较单菌株分别提升17.5％、16.2％、25.5％。本专利技术提供的纳米Fe2O3与假单胞菌DNF-23联用的新型生物脱氮方法，不仅能够快速高效地对水体进行脱氮处理，而且能够避免二次污染，具有良好的应用前景。附图说明图1为本专利技术菌株16SrDNA的系统发育树。图2为DNF-02菌株的扫描电镜图。具体实施方式以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。实施例中用到的培养基配方如下：LB培养基：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl10g/L。异养硝化培养基：(NH4)2SO40.95g/L，柠檬酸钠2.50g/L，维氏盐5.0％。好氧反硝化培养基：KNO31.45g/L，柠檬酸钠2.50g/L，维氏盐5.0％。维氏盐：K2HPO45.00g/L，NaCl2.50g/L，MgSO4·7H2O2.50g/L，FeSO4·7H2O0.05g/L，MnSO4·4H2O0.05g/L。以上所有培养基pH均应调节至7.4～7.6，固体培养基需另加2％的琼脂。培养基在使用前需在0.11MPa、120℃下灭菌30min，冷却后备用。实施例1异养硝化-好氧反硝化菌株的筛选1.驯化和富集：污泥取自广州猎德污水处理厂，将取来的活性污泥分成四份，分别置于4个好氧SBR反应器中，其中两个为硝化反应器，两个为好氧反硝化反应器。反应器进水运行方式包括进水→曝气→沉淀→出水，每24h为一个运行周期，对污泥进行驯化与富集。2.分离纯化：分别从4个反应器中取泥水混合液1mL，通过倍比稀释将样品稀释至10-1、10-3、10-5、10-7，4个不同的稀释度，用无菌移液枪将稀释后的样品移入到平板培养基上进行涂布，硝化反应器中的稀释液涂布在硝化固体培养基，反硝化反应器中的稀释液涂布在反硝化固体培养基中，并将涂布后的固体平板倒置于30℃的恒温培养箱中，培养48h。从中选出颜色形态本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株假单胞菌(Pseudomonas sp.)DNF-23，其特征在于，所述假单胞菌DNF-23保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间为2019年7月5日，保藏编号为GDMCC No:60713。/n

【技术特征摘要】
1.一株假单胞菌(Pseudomonassp.)DNF-23，其特征在于，所述假单胞菌DNF-23保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间为2019年7月5日，保藏编号为GDMCCNo:60713。


2.权利要求1所述假单胞菌DNF-23在水体脱氮方面的应用。


3.一种提高假单胞菌脱氮效率的方法，其特征在于，将纳米Fe2O3与权利要求1所述假单胞菌DNF-23共同用于含氮水体脱氮。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述假单胞菌DNF-23在含氮水体的接种量为1％～5％。


5.根据权利要求3所述的方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹刚，刘翔赫，王少娴，廖雨欣，潘涌章，冯乃宪，秦华明，龙焰，冯泽阳，莫测辉，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44