T7-RNA聚合酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种T7‑RNA聚合酶突变体，这种突变体是将野生型T7‑RNA聚合酶的氨基酸序列的从N端开始第43位的丝氨酸被A类氨基酸或B类氨基酸替代后得到的。A类氨基酸为酪氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸或天冬氨酸，B氨基酸为色氨酸、异亮氨酸、精氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸或脯氨酸。上述这种T7‑RNA聚合酶突变体适合内部含有终止信号的RNA以及末端形成发夹结构的RNA的合成，在体外转录、RNA合成、基因编辑、RNA药物合成、体内蛋白质表达或无细胞蛋白表达体外翻译系统、转录终止子研究、RNA依赖的RNA聚合酶活性研究、生物学转录调控元件合成等方面均能具有广泛应用。

【技术实现步骤摘要】
T7-RNA聚合酶突变体及其应用
本专利技术属于核酸工具酶与核酸生物领域，特别是噬箘体T7-RNA聚合酶突变体及其应用。
技术介绍
RNA(核糖核酸)作为遗传信息传递的一类生物大分子，在真核生物、原核生物、部分病毒及类病毒中广泛存在，并具有许多不同的种类及功能。除最初鉴定的三大类RNA：mRNA、rRNA以及tRNA外，后续发现的几类新颖的RNA如microRNA(miRNA)(Chengetal.,2005)、longnon-codingRNA(lncRNA)(Deyetal.,2014)、CircularRNAs(circRNA)(Memczaketal.,2013)等也成为近年来RNA研究中的热门领域。此外，RNA相关研究的逐渐深入揭示出RNA在疾病治疗方面有着非常重要的应用价值。体外合成的siRNA和mRNA可以成为RNA靶向治疗的重要药物(Sahinetal.,2014；Wittrupetal.,2015)，大型制药公司如Merck、Shire等都致力于开发RNA药物用于疾病治疗。此外，体外合成的mRNA由于具有在体内蛋白瞬时表达等优本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.T7-RNA聚合酶突变体，其特征在于，从SEQ ID NO.1所示的野生型T7-RNA聚合酶的氨基酸序列的N端开始第43位的丝氨酸被酪氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸或天冬氨酸替代的突变体。/n

【技术特征摘要】
1.T7-RNA聚合酶突变体，其特征在于，从SEQIDNO.1所示的野生型T7-RNA聚合酶的氨基酸序列的N端开始第43位的丝氨酸被酪氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸或天冬氨酸替代的突变体。


2.权利要求1所述T7-RNA聚合酶突变体在体外转录中的应用。


3.权利要求1所述T7-RNA聚合酶突变体在非编码RNA合成中的应用。


4.权利要求3所述的应用，其特征在于，所述非编码RNA为sgRNA、tRNA、mRNA、siRNA、snoRNA或寡核苷酸。

【专利技术属性】
技术研发人员：朱斌，吴慧，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42