基于DDX19A促进宫颈鳞状细胞癌转移的应用制造技术

本发明专利技术属于医药产品技术领域，公开了基于DDX19A促进鳞状细胞癌转移的应用。在功能上，发现DDX19A促进了宫颈鳞状细胞癌细胞体外的迁移和侵袭以及体内的肺转移。在机制上，过表达DDX19A增加了NOX1表达，增多了活性氧ROS产生，并诱导了宫颈鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭。挽救实验表明，过表达NOX1可以挽回敲低DDX19A导致宫颈癌鳞癌细胞侵袭和迁移以及ROS的生成，进一步发现，ROS抑制剂N

【技术实现步骤摘要】
基于DDX19A促进宫颈鳞状细胞癌转移的应用


[0001]本专利技术涉及医药产品
，更具体地，涉及基于DDX19A促进宫颈鳞状细胞癌转移的应用。

技术介绍

[0002]宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，也是全世界妇女癌症相关死亡的第二大主要原因。尽管在外科手术、化学治疗、放射治疗和免疫治疗方面取得了进步，宫颈癌患者的5年生存率已提高到80％。然而，一旦发生局部转移或远处转移，5年生存率将降低至约50％。转移是宫颈癌患者死亡的主要原因。宫颈鳞状细胞癌是最常见的病理类型，约占所有病例的80％。因此，阐明宫颈鳞状细胞癌转移的潜在机制并确定新的靶标极为重要。
[0003]DEAD
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box家族以保守的Asp
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Glu
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Ala
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Asp(DEAD)基序为特征，代表由37个成员组成的RNA解旋酶家族。DEAD
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box蛋白参与各种RNA代谢过程，包括转录，RNA转运和RNA降解。最近的研究表明，许多DEAD
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box蛋白在各种癌症中异常表达并在转移中起关键作用。例如，DDX39可以通过激活Wnt/β
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catenin途径来促进肝癌的发生和转移；而DDX3可以激活CBC
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eIF3介导的含uORF的致癌mRNA的翻译，从而促进头颈部鳞状细胞癌的转移；DDX1可以调节microRNA的成熟并抑制卵巢肿瘤的转移。但是，DEAD
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box蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达和功能尚不明确。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述问题，首先提供DDX19A基因或其表达产物的应用。本专利技术的第二个目的是提供一种包括但不限于提高宫颈鳞状细胞癌患者临床预后准确率的药盒或试剂盒。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
[0006]首先，本专利技术提供DDX19A基因或其表达产物在开发、筛选宫颈鳞状细胞癌功能产品方面的应用，所述功能产品对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用。
[0007]其次，本专利技术还提供对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用的功能产品在制备预防或/和缓解或/和治疗宫颈鳞状细胞癌的产品方面的应用。
[0008]另外，本专利技术对公共数据库临床样品的生物信息学分析表明，DDX19A在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达升高，并且高表达的DDX19A与转移和临床预后不良呈正相关。在功能上，发现DDX19A促进了宫颈鳞状细胞癌细胞体外的迁移和侵袭以及体内的肺转移。
[0009]最后，本专利技术通过体外细胞迁移和侵袭实验表明了敲低DDX19A可抑制宫颈鳞癌细胞的迁移和侵袭，而过表达DDX19A可显著增强宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭；另外，还研究了对体内肿瘤转移的影响，结果发现：敲低DDX19A细胞在裸鼠中可明显抑制肿瘤细胞的肺转移，相反，过表达DDX19A细胞可显著促进肿瘤细胞的肺转移。
[0010]因此，本专利技术还提供包括但不限于DDX19A基因或其表达产物在开发、筛选抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的功能产品方面的应用，所述功能产品对DDX19A基因或其
表达产物具有抑制作用。或者，本专利技术还提供对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用的功能产品在制备抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的产品方面的应用。同样，所述功能产品具有包括但不限于下调DDX19A基因的表达、转录、或其表达产物的功能。
[0011]本专利技术通过肺转移结节数和肿瘤重量测定，发现DDX19A敲低细胞在裸鼠中表现出较少数量的转移性肺结节的数目，以及更低的裸鼠体重，因此，所述功能产品用于抑制宫颈鳞状细胞癌细胞远处转移，同样也可以用于抑制宫颈鳞状细胞癌细胞转移引起的转移性肺结节的生长。因此更优选的，所述功能产品包括但不限于DDX19A核酸抑制剂，DDX19A蛋白抑制剂，DDX19A基因缺陷或沉默的免疫相关细胞、其分化细胞或者基因重组构建体中的一种或多种。
[0012]研究结果表明，DDX19A影响宫颈鳞状细胞癌细胞系中的NOX1表达，而DDX19A表达与宫颈鳞状细胞癌标本中的NOX1表达呈正相关。通过敲低和过表达DDX19A验证分析促进宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的功能。此外，过表达的NOX1恢复了稳定DDX19A导致宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的功能。总之，我们的数据表明DDX19A可以通过调控NOX1的表达在体外促进宫颈鳞状细胞癌癌细胞的迁移和侵袭，并在体内促进癌细胞的转移。在这项研究中，可以确定DDX19A是宫颈鳞状细胞癌转移的新型调节剂，它通过NOX1/ROS途径发挥促转移作用。目前的研究表明，DDX19A通过诱导NOX1介导的ROS产生而促进了宫颈鳞状细胞癌的转移。此外，DDX19A/NOX1可能作为宫颈鳞状细胞癌患者转移的生物标志物和新的治疗靶标。
[0013]本专利技术通过研究机制发现：NOX1/ROS轴在DDX19A的下游发挥转移促进作用，因此本专利技术还提供NOX1/ROS在包括但不限于开发、筛选宫颈鳞状细胞癌功能产品方面的应用，所述功能产品对NOX1/ROS基因或其表达产物具有抑制作用。
[0014]本专利技术还提供对NOX1/ROS基因或其表达产物具有抑制作用的功能产品在制备预防或/和缓解或/和治疗宫颈鳞状细胞癌的产品方面的应用。
[0015]再优选地，所述功能产品包括以下任一种：
[0016](i)包括但不限于以DDX19A/NOX1转录本为靶序列，且能够提供抑制DDX19A/NOX1基因表达产物的表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；
[0017](ii)包括但不限于能表达或形成(i)中所述小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸构建体；
[0018](iii)包括但不限于含有DDX19A/NOX1互补序列，且能够在转入体内后形成抑制DDX19A/NOX1基因表达产物的表达或基因转录的干扰分子的构建体；
[0019](iv)抑制或敲除DDX19A/NOX1基因序列后包括但不限于免疫相关细胞、其分化细胞或构建体。
[0020]本专利技术在上述研究发现的基础上，列举出了上述功能产品，上述功能产品均具有下调/抑制/DDX19A/NOX1基因表达的特性，当然，除了上述功能产品，分子生物学
中一些常规方法也可以实现下调/抑制/DDX19A/NOX1基因表达，例如：基于CRISPR/Cas9技术实现的基因敲低或敲除。
[0021]本专利技术通过研究发现：DDX19A敲低可以减少SiHa细胞中ROS的产生，而过表达在SiHa细胞中产生了相反的作用，因此，可以确定DDX19A是新型的ROS生产调节剂，因此，本专利技术还提供DDX19A基因或其表达产物作为非治疗目的的ROS生产调节剂的应用。
[0022]DDX19A促进了宫颈鳞状细胞癌细胞体外的迁移和侵袭以及体内的肺转移。从机制上讲，过表达DDX1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.DDX19A基因或其表达产物在开发、筛选宫颈鳞状细胞癌功能产品方面的应用，所述功能产品对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用；或对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用的功能产品在制备预防或/和缓解或/和治疗宫颈鳞状细胞癌的产品方面的应用。2.DDX19A基因或其表达产物在开发、筛选抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的功能产品方面的应用，所述功能产品对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用；或对DDX19A基因或其表达产物具有抑制作用的功能产品在制备抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭的产品方面的应用。3.根据权利要求1或者2所述的应用，其特征在于，所述功能产品具有下调DDX19A基因的表达、转录、或其表达产物的功能。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述功能产品用于抑制宫颈鳞癌细胞远处转移。5.根据权利要求1或者2所述的应用，其特征在于，所述功能产品包括但不限于DDX19A核酸抑制剂，DDX19A蛋白抑制剂，DDX19A基因缺陷或沉默的免疫相关细胞、其分化细胞或者基因重组构建体中的一种或多种。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：何欢欢，陈勇，刘继红，蒋艳辉，王柏彬，黎永良，
申请(专利权)人：中山大学附属第五医院，
类型：发明
国别省市：