烟草转基因事件及用于检测与使用烟草转基因事件的方法技术

本发明专利技术提供多种产生胶原蛋白的植物事件、用于检测植物事件的DNA分子及所述DNA分子在植物育种方法中的用途。植物育种方法中的用途。植物育种方法中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】烟草转基因事件及用于检测与使用烟草转基因事件的方法
[0001]相关申请案
[0002]本申请主张于2018年7月31日提交的美国临时专利申请62/712,289的权益，其整体内容通过引用的方式并入本文中。
[0003]序列表声明
[0004]本申请的序列表为档案名称78292Sequence Listing.txt的ASCII文件，创建于2019年7月30日，包含131,072字节，所述序列表与本申请同时提交，并且通过引用的方式并入本文中。
[0005]
及
技术介绍

[0006]在本专利技术的一些实施例中，本专利技术涉及烟草转基因事件及用于检测与使用烟草转基因事件的方法。
[0007]胶原蛋白(Collagens)是构成脊椎动物及许多其他多细胞生物结构完整性的主要结构蛋白。I型胶原是骨头及肌腱的主要胶原成分，在皮肤、主动脉及肺中也能发现大量的I型胶原。I型胶原纤维具有极高的抗拉强度及有限的延展性。I型胶原最丰富的分子形式是由两个不同的α链[α1(I)]2及α2(I)组成的异三聚体。所有原纤维胶原分子都含有三条由重复的Gly本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在含有烟草DNA的一样品中可检测到的重组DNA分子，其特征在于：所述分子的核苷酸序列为：(a)与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同；或(b)与(a)完全互补的一核苷酸序列；其中所述重组DNA分子的存在用于诊断所述样品中的烟草事件A3
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18DNA或所述烟草事件A3
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18DNA的子代。2.一种DNA分子，其特征在于：所述DNA分子包括：一多核苷酸片段，具有足够的长度以作为一DNA探针，所述DNA探针在严格的杂交条件下与一样品中的烟草事件A3
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18的子代的一重组DNA进行特异性杂交，其中在所述严格的杂交条件下，所述DNA分子的杂交用于诊断所述样品中的所述烟草事件A3
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18的子代。3.如权利要求2所述的DNA分子，其特征在于：所述重组DNA分子包括：(a)与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同的一核苷酸序列；或(b)与(a)完全互补的一核苷酸序列。4.一种成对的DNA分子，其特征在于：所述成对的DNA分子包括：一第一DNA分子及一第二DNA分子，所述第一DNA分子及所述第二DNA分子在与一样品一起用于一扩增反应时作为引物，其中所述样品包括：烟草事件A3
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18的子代的一重组DNA，从而产生一扩增子以诊断所述样品中的所述烟草事件A3
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18的子代的所述重组DNA，其中所述扩增子包括：与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同的一核苷酸序列。5.一种检测一重组DNA的存在的方法，其特征在于：所述重组DNA分子的存在用于诊断一样品中的烟草事件A3
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18DNA的子代，所述方法包括：(a)在严格的杂交条件下，将所述样品与如权利要求2或3所述的DNA分子接触；以及(b)检测所述DNA分子与所述重组DNA的杂交；其中所述杂交用于诊断所述样品中的所述烟草事件A3
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18的子代的所述重组DNA的存在。6.一种在一样品中检测烟草事件A3
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18的子代的一重组DNA的存在的方法，其特征在于：所述方法包括：(a)将所述样品与如权利要求4所述的成对的DNA分子接触；(b)使用所述成对的DNA分子来进行足以产生一DNA扩增子的一扩增反应；以及(c)检测所述反应中所述DNA扩增子的存在；其中所述DNA扩增子包括：与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同的一核苷酸序列，以及其中所述扩增子的存在用于诊断所述样品中的所述烟草事件A3
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18的子代的所述重组DNA。7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述方法还包括：检测与SEQ ID NO:1至5、7至8、10至19具有至少99％相同的一核苷酸序列中的至少一个。8.一种烟草植物、植物部分或烟草植物的细胞，其特征在于：所述烟草植物、所述植物部分或所述烟草植物的细胞包括：与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同的一核苷酸序列。
9.如权利要求6至8任一项所述的方法或植物，其特征在于：所述方法或植物包括：检测LH3、P4Hb、胶原α1及/或胶原α2的存在及/或方向。10.如权利要求9所述的方法或植物，其特征在于：所述存在及/或方向与事件A3
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18的存在及/或方向至少99％相同。11.如权利要求9所述的方法或植物，其特征在于：所述存在及/或方向与事件A3
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18的存在及/或方向相同。12.如权利要求8所述的烟草植物、植物部分或烟草植物的细胞，其特征在于：所述烟草植物是包括所述烟草事件A3
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18的一烟草植物的任何世代的一子代。13.如权利要求8所述的烟草植物、植物部分或烟草植物的细胞，其特征在于：所述烟草植物、所述植物部分或所述烟草植物的细胞包括：与SEQ ID NO:1至5、7至8、10至19具有至少99％相同的一核苷酸序列中的至少一个。14.如权利要求1至12任一项所述的DNA分子、方法或植物，其特征在于：所述子代是一近交烟草植物或一杂交烟草植物。15.如权利要求14所述的DNA分子、方法或植物，其特征在于：所述子代是列于表20、21、21a及22中的任何一个。16.如权利要求1至12任一项所述的DNA分子、方法或植物，其特征在于：所述重组DNA分子源自列于表20、21、21a及22中任何一个的一烟草事件或所述烟草事件的子代。17.如权利要求1、3、4、5至12任一项所述的DNA分子、方法或植物，其特征在于：所述核苷酸序列如SEQ ID NO:34及35所示。18.一种生产前胶原的方法，其特征在于：所述方法包括：(a)种植如权利要求8至17任一项所述的植物；以及(b)从所述植物分离所述前胶原。19.一种前胶原，其特征在于：所述前胶原是根据权利要求18所述的方法而获得的。20.一种处理前胶原的方法，其特征在于：所述方法包括：(a)提供如权利要求8至18任一项所述的植物的一蛋白制剂；以及(b)将所述蛋白制剂与一有效量的一酶接触，所述酶能够将前胶原加工成胶原。21.如权利要求20所述的方法，其特征在于：所述酶包括无花果蛋白酶。22.一种烟草种子，其特征在于：所述烟草种子包括：一可检测量的一核苷酸序列，所述核苷酸序列与SEQ ID NO:6或9具有至少99％相同，或与SEQ ID NO:6或9完全互补。23.如权利要求22所述的烟草种子，其特征在于：所述烟草种子包括：一可检测量的一核苷酸序列，所述核苷酸序列与SEQ ID NO:1至5、7至8、10至19具有至少99％相同，或与SEQ ID NO:1至5、7至8、10至19完全互补。24.一种非活体的烟草植物材料，其特征在于：所述非活体的烟草植物材料包括一可检测量的如权利要求1所述的重组DNA分子。25.一种烟草植物及烟草植物部分，其特征在于：所述烟草植物及所述烟草植物部分包括：在一DNA扩增方法中被测试时作为一模板的一DNA，从而产生一扩增子以诊断事件A3
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18DNA的存在。26.一种确定包括事件A3
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18的一烟草植物或烟草种子的接合性的方法，其特征在于：所述方法包括：
将包括烟草DNA的一样品与一引物组接触，所述引物组能够产生一第一扩增子及一第二扩增子，其中所述第一扩增子用于诊断事件A3
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18，所述第二扩增子用于诊断不包括事件A3
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18的天然烟草基因组DNA；(i)将所述样品及所述引物组进行一核酸扩增反应；以及(ii)在所述核酸扩增反应中检测所述第一扩增子或所述第二扩增子，其中所述第一扩增子用于诊断事件A3
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18的天然烟草基因组DNA；其中只有所述第一扩增子的存在时用于在所述样品中诊断一纯合事件A3
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18等位基因的一烟草植物杂合子；或将包括烟草DNA的一样品与含有至少一第一探针及至少一第二探针的一探针组接触，所述第一探针特异性杂交事件A3
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18DNA，以及所述第二探针特异性杂交烟草基因组DNA，其中所述烟草基因组DNA因被插入事件A3
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18的异源DNA而被破坏，并且不与事件A3
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18DNA杂交；(i)在严格...

【专利技术属性】
技术研发人员：奥代德，
申请(专利权)人：科弗朗有限公司，
类型：发明
国别省市：