用于检测生物标志物的方法技术

本发明专利技术涉及使用包括各自独立地包含本申请所述的捕获部分的表面的多种颗粒来分离和表征生物标志物(例如，用于阻塞性睡眠呼吸暂停)的方法。停)的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测生物标志物的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年7月27日提交的美国临时专利申请号62/711,415和2018年10月17日提交的美国临时专利申请号62/747,017的优先权权益。出于所有目的，上述每个申请的全部内容通过引用并入本申请。


[0003]本专利技术涉及使用含有表面的多种颗粒(例如，微粒、纳米颗粒；磁性的、非磁性的)来分离和表征生物标志物(例如，用于阻塞性睡眠呼吸暂停)的方法，所述表面各自独立地包含本申请所述的捕获部分。

技术介绍

[0004]实验室测试在健康评估、医疗保健乃至公众健康方面都起着至关重要的作用，并影响到每个生命阶段的人们。几乎每个人在其一生中都会经历一项或多项实验室测试。仅在美国，每年估计要进行70到100亿次实验室测试，并且实验室测试结果会影响大约70％的医疗决策。
[0005]此外，由于医疗保险和医疗补助服务中心(CMS)于2018年1月1日根据《保护性医疗保险法》(PAMA)的要求实施了新的临床实验室收费表(CLFS)，因此PAMA正在减少实验室测试的报销。更为关键的是，实验室结果在第一时间是准确的，故障排除的工作减少或花费更少的时间，并且不会影响实验室工作流程。
[0006]干扰物是存在于患者样本中的物质，它可以例如通过干扰物抗体结合来改变诊断测试结果的正确值，或者可以通过桥接、位阻或自身抗体机制增加或减少测定信号。虽然已知免疫测定容易受到干扰物，但是如果仪器(分析仪)或实验室未识别并标记出错误结果，或者如果医师未告知实验室患者结果不符合临床情况，则临床实验室仍可能报告错误结果。如果没有实际的方法来预先识别可能会引起问题的标本，则任何标本都可能意外地出现错误结果。这种干扰物的结果是错误的结果可能导致假阴性和假阳性测试结果，从而影响患者的护理，并可能导致不必要的侵入性、诊断性或治疗性程序或无法治疗患者。
[0007]尽管存在干扰物带来的复杂性，但生物标志物的筛选和诊断测试可能仍然很困难，例如，由于它们在生物样品中的存在率低或含量低。
[0008]用于阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的尿液和/或血液生物标志物可以用于促进儿童和成人疾病的诊断和成本有效治疗。尿液和/或血液生物标志物的总体目标是解决和测量OSA的最佳生物标志物信号。OSA是儿童和成人中高度流行的疾病，与心血管疾病、糖尿病和其他慢性病的风险增加相关。不幸的是，多达90％的OSA患者尚未得到诊断，也没有接受适当的治疗方法来治疗这种疾病。尽管关于对OSA的病理生理学和后果是已知的，但OSA的分子机制仍知之甚少。然而，基于蛋白质组学的技术的进步有利于发现新型生物标志物，这些生物标志物是包括OSA在内的许多疾病的潜在诊断和治疗靶标。
[0009]流行病学研究表明OSA影响6
‑
13％的成年群体和1
‑
4％的儿科群体。与一般人群相
比，患有心脏病或代谢性疾病的患者的OSA患病率≥50％。未经治疗的OSA会恶化生活质量，并带来长期后果，包括心血管疾病、高血压、糖尿病、肥胖症、中风、抑郁症和各种代谢性疾病。在儿童中，OSA可能导致认知和行为障碍，并可能被误诊为注意力缺陷障碍(ADD)。
[0010]当前，OSA的明确诊断需要使用基于实验室的多导睡眠图(PSG)进行的过夜睡眠研究。然而，诊断儿童和成人的OSA的睡眠研究费力、昂贵、难以获得且不方便。虽然鼓励使用便携式睡眠监视器进行家庭无人值守研究，但仍有56％的家庭诊断OSA仍需要实验室PSG睡眠研究的确认。需要通过简单且廉价的筛查或诊断测试来早期确认患者中的OSA，以防止OSA后果，例如以下技术：1)简化了已知OSA阳性患者样品中潜在OSA生物标志物的发现和分析，以及2)将多种生物标志物组合在一起可达到所需的敏感度和特异性，以准确诊断OSA并获得OSA治疗的功效。
[0011]需要开发阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)诊断测试方案，其中对低丰度生物标志物的准确、精确和灵敏的测量是正确加入/排除OSA和改善患者预后的关键。4300万美国人可能患有OSA，它可能导致肥胖、高血压、心脏病、糖尿病、行为问题和学习问题，并可能被误诊为儿童的注意力缺陷多动障碍(ADHD)。CDC估计，美国小儿OSA的患病率约为100万。OSA是当今诊断最多的疾病之一，而OSA诊断通常需要昂贵且不便的睡眠研究(多导睡眠图)。在儿科人群中，父母通常不愿意，孩子们可能不合作来接受睡眠研究。
[0012]因此，临床上需要一种简单、廉价、可自动化且有效的解决方案，以在诊断测试之前消除或最小化样品干扰物并富集生物标志物浓度，而不影响实验室工作流程和周转时间。

技术实现思路

[0013]本申请描述的是用于简单、有效和具有成本效益的检测生物样品中一种或多种生物标志物的方法，以例如管理和减轻多种已知的样品特异性干扰物，这些干扰物会导致错误的测试结果并增加患者安全风险，例如已用单克隆小鼠抗体治疗或已接受它们以用于诊断的患者体内的异源抗体。本申请所述的方法还可以管理和减轻由生物素引起的样品特异性干扰物，这些生物素可能来自消费者为健康和美容、减肥或治疗例如多发性硬化症的治疗而采取的非处方(OTC)补充剂、多种维生素和草药。
[0014]在一个方面，本申请提供了一种从生物样品中去除生物标志物的方法，所述方法包括：a)将所述样品与多种颗粒合并，其中每种颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标志物的颗粒复合物；c)去除或分离所述颗粒复合物，以提供消除的溶液；从而从所述生物样品中去除生物标志物。
[0015]在一个方面，本申请提供了一种从生物样品中分离生物标志物的方法，所述方法包括：a)将所述样品与多种颗粒合并，其中每种颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标志物的颗粒复合物；c)去除或分离所述颗粒复合物，以提供消除的溶液和富集的分离物；从而从所述生物样品中分离生物标志物。
具体实施方式
[0016]本申请描述了在生物样品中分离或富集一种或多种阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的生物标志物的方法，该方法包括将本申请所述的多种颗粒与本申请所述的生物样品结合。
[0017]在一个方面，本申请描述了一种从生物样品中去除OSA的生物标志物的方法，该方法包括：a)将样品与多种颗粒合并，其中每种颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标记物的颗粒复合物；c)去除或分离所述颗粒复合物，以提供消除的溶液；从而从生物样品中去除生物标记。
[0018]在一个方面，本申请描述了一种从生物样品中分离生物标志物的方法，该方法包括：a)将样品与多种颗粒合并，其中每个颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标志物的颗粒复合物；c)去除，或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种从生物样品中去除生物标志物的方法，所述方法包括：a)将所述样品与多种颗粒合并，其中每种颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标志物的颗粒复合物；和c)去除或分离所述颗粒复合物，以提供消除的溶液；从而从所述生物样品中去除生物标志物。2.一种从生物样品中分离生物标志物的方法，所述方法包括：a)将所述样品与多种颗粒合并，其中每种颗粒独立地包含捕获部分(即，捕获部分的类型或种类)，以提供混合物；b)混合所述混合物，以提供一种或多种生物标志物的颗粒复合物；和c)去除或分离所述颗粒复合物，以提供消除的溶液和富集的分离物；从而从所述生物样品中分离生物标志物。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在所述样品与所述多种颗粒合并之前，将调节剂添加到所述生物样品中。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述调节剂是pH调节剂、摩尔调节剂、干扰阻断剂或解放或释放剂。5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在对所述生物样品进行诊断测试之前执行所述方法。6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述多种颗粒包括多种捕获部分(例如，多种颗粒各自独立地共价或非共价地结合到多种捕获部分上)。7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第一捕获部分的第一颗粒。8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第二捕获部分的第二颗粒。9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第三捕获部分的第三颗粒。10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第四捕获部分的第四颗粒。11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第五捕获部分的第五颗粒。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第六捕获部分的第六颗粒。13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第七捕获部分的第七颗粒。14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第八捕获部分的第八颗粒。15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第九捕获部分的第九颗粒。16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述多种颗粒包括包含第十捕获部分的第十颗
粒。17.根据权利要求16所述的方法，包括从所述生物样品中去除或分离第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九或第十生物标志物。18.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述方法还包括向所述混合物中加入裂解试剂或释放剂以提供富集的分离物。19.根据权利要求1或2所述的方法，还包括对生物标志物进行诊断测试(例如，在所述的去除方法或分离方法之后)。20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述诊断测试同时检测两种或多种生物标志物的存在或不存在。21.根据权利要求8所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第二颗粒不同。22.根据权利要求9所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第三颗粒不同。23.根据权利要求10所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第四颗粒不同。24.根据权利要求11所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第五颗粒不同。25.根据权利要求12所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第六颗粒不同。26.根据权利要求13所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第七颗粒不同。27.根据权利要求14所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第八颗粒不同。28.根据权利要求15所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特性上与所述第九颗粒不同。29.根据权利要求16所述的方法，其中，所述第一颗粒在尺寸、形状、化学、颜色或其他特征上与所述第十颗粒不同。30.根据权利要求21
‑
29中任一项所述的方法，其中，所述特征是对所述的生物标志物的选择性、亲和力或亲合力。31.根据权利要求21
‑
29中任一项所述的方法，其中，所述尺寸是直径为50
‑
1000nm(例如，100
‑
500nm、200
‑
600nm)。32.根据权利要求21
‑
29中任一项所述的方法，其中，所述尺寸是直径为1
‑
3微米。33.根据权利要求1或2所述的方法，其中，第一颗粒群以比...

【专利技术属性】
技术研发人员：约书亚，
申请(专利权)人：维拉维斯公司，
类型：发明
国别省市：