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一种提高L-组氨酸产量的方法技术

技术编号:28408640 阅读:92 留言:0更新日期:2021-05-11 18:13
本发明专利技术涉及一种提高L‑组氨酸产量的方法。本发明专利技术通过使用操作条件安全、温和、可控性强的ARTP诱变方法,获得了突变率更高的突变库,结合L‑组氨酸结构类似物筛选,经过十次传代后,获得了稳定的L‑组氨酸高产突变株,进一步分析了诱变后高产菌株的L‑组氨酸合成相关基因的突变情况,比对筛选得到能够促进L‑组氨酸产量提高的5‑磷酸核糖‑1‑焦磷酸合成相关基因Prs和ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG突变体,在生产L‑组氨酸的宿主菌中表达Prs和hisG基因中的一种或两种,能够有效提高L‑组氨酸的产量。为进一步代谢工程改造粘质沙雷氏菌或其他菌株生产L‑组氨酸奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种提高L-组氨酸产量的方法
本专利技术涉及代谢工程
,尤其涉及一种提高L-组氨酸产量的方法。
技术介绍
L-组氨酸,又名α-氨基-β-咪唑基丙酸,是分子中含有咪唑核的碱性氨基酸。在营养学的范畴里,组氨酸被认为是婴幼儿必需的氨基酸。L-组氨酸具有多种生理功能,对生长、组织修复以及治疗溃疡和胃酸过多等均具有重要的作用,还可以作为添加剂用于治疗过敏、风湿性关节炎以及贫血等疾病,因此,其被广泛应用于医药食品等行业。生产组氨酸的方法主要有蛋白水解法、化学合成法和微生物发酵法。其中水解蛋白质是组氨酸生产最为传统的方法,但是,这种方法主要取决于富含天然蛋白质的资源(如血粉或大豆)的可用性,很难满足人们对组氨酸日益增长的需求;而通过化学合成法生产组氨酸容易产生外消旋混合物,通常被认为是“非天然”化合物,难以获得食品药品监督管理局的批准,也较难被消费者接受;微生物发酵法是目前生产L-组氨酸的主流方法,因此L-组氨酸高产菌的选育成为当前的研究热点。
技术实现思路
为解决上述技术问题,本专利技术提供了一种提高L-组氨酸产量的方法,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高L-组氨酸产量的方法,其特征在于,所述方法是在生产L-组氨酸的宿主菌中表达5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG,所述的5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高L-组氨酸产量的方法,其特征在于,所述方法是在生产L-组氨酸的宿主菌中表达5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG,所述的5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的生产L-组氨酸的宿主菌为肠杆菌科菌株。


3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的肠杆菌科菌株为大肠杆菌或粘质沙雷氏菌。


4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的大肠杆菌为E.coliBL21。


5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,表达5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs和/或ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG是通过质粒表达或基因组表达。


6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的质粒表达,是将5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成基因Prs或ATP转磷酸核糖基酶编码基因hisG连接到pET28a载体上进行表达;或者是将5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘龙陈坚吕雪芹堵国成李江华刘延峰李梦莹
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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