一种单面针薄层色谱鉴别方法技术

本发明专利技术公开了一种单面针薄层色谱鉴别方法。该方法以木兰花碱和氯化两面针碱为对照品，明确了单面针薄层色谱的特有斑点，可用于鉴别单面针、区分单面针与两面针。该方法重复性好、准确度高、分离好，斑点清晰，且简单可行、快速、成本低，适合用于区分单面针与两面针，以及单面针药材的质量控制和真伪鉴别。而且该方法安全性好、经济环保，安全，效率高，应用前景好。

【技术实现步骤摘要】
一种单面针薄层色谱鉴别方法
本专利技术属于医药
更具体地，涉及一种单面针薄层色谱鉴别方法。
技术介绍
单面针为芸香科(Rutaceae)花椒属(Zanthoxylun)蚬壳花椒(ZanthoxylumdissitumHemsley)和刺壳花椒(Z.echinocarpumHemsley)常绿木质藤本，主要以蚬壳花椒为名始载于《全国中草药汇编》，收载于《中国植物志》、《湖南省中药材标准》、《广西特色中草药资源选编》等中药专著中。民间常用于治疗腰痛、牙痛、跌打损伤、疝气痛、治妇女月经过多等。根、茎、叶均可入药，药用价值高，主治牙痛、腰痛、妇女月经过多，产后月经不调等症。单面针以蚬壳花椒为主作为妇科千金胶囊、妇科千金片等中成药的主要原料药，用途广泛。而两面针做为我国历史悠久的传统中药，也已经被《中国药典》所收录。两面针具有活血化瘀、行气止痛、祛风通络、解毒消肿的功效，主要用于跌扑损伤，胃痛，牙痛，风湿痹痛，毒蛇咬伤；外治烧烫伤等。单面针与两面针的外形极为相似，难以区分，两者的化学成分也较为相似。因单面针缺乏完善的质量控制标准，造成单面针与两面针混淆使用严重的现象。因此，单面针与两面针的比较研究亦越来越受到学者的重视。如本申请人的专利200710064499.2等，为了更好地控制单面针饮片的质量，完善了单面针饮片标准，申请人团队不断对单面针标准进行研究，提升单面针饮片的控制指标，有效保证单面针饮片的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种可用于鉴别单面针与两面针的薄层色谱检测方法，为区分单面针与两面针，以及单面针药材的质量控制和真伪鉴别提供了一种全新的方法。本专利技术经过大量实验探索得到一种可用于鉴别单面针与双面针、控制单面针质量和真伪的薄层色谱特征斑点，构建了鉴别单面针与两面针的薄层色谱检测方法，重复性好、准确度高，且简单可行、快速、成本低，适合用于区分单面针与两面针，以及单面针药材的质量控制和真伪鉴别。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：一种单面针薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：(1)制备供试品溶液，溶剂乙醇；(2)制备对照品溶液，对照品分别为木兰花碱和氯化两面针碱，溶剂乙醇；(3)薄层色谱检测：对照品溶液和供试品溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺为展开剂，展开剂蒸汽达到饱和后展开，取出，干燥，检视；(4)检视结果分析：供试品色谱图中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点：在Rf＝(0.76-0.88)和Rf＝(0.90-0.98)处有明显的两个红色斑点(分别命名为DD-1和DD-2)，则供试品为单面针，而两面针和伪品均无此斑点。上述方法中，为了更准确的控制鉴别结果的稳定性和准确性，优选地，步骤(1)中供试品溶液的制备：按照(1.2-2.8g)：(30-50ml)的比例取供试品加入乙醇中，密闭条件下超声处理60-90min，过滤，水浴蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。优选地，步骤(1)中木兰花碱对照品的浓度为0.8-1.5mg/mL，氯化两面针碱对照品的浓度为0.4-0.7mg/mL。更优选地，木兰花碱对照品的浓度为1mg/mL，氯化两面针碱对照品的浓度为0.5mg/mL。优选地，展开剂为三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺＝(35-45):(8-12):(0.5-1.2):(0.06-0.12)。更优选地，展开剂为三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺＝40:10:1:0.1。优选地，步骤(3)中展开剂蒸汽达到饱和15-30min后展开，展至6-12cm。更优选地，步骤(3)中展开剂蒸汽达到饱和20min后展开，展至8cm。优选地，步骤(3)中点样量：对照品溶液5-10μl，供试品溶液5-10μl。更优选地，步骤(3)中点样量：对照品溶液5μl，供试品溶液5-10μl。优选地，步骤(3)中硅胶薄层板为硅胶GF254薄层板。优选地，干燥方式为晾干。优选地，显色方式为碘熏至显色清晰。优选地，检视方式为254nm、366nm及显色后可见光。另外优选地，本文所用乙醇为95％乙醇。作为一种最优选的方案，所述单面针薄层色谱鉴别方法包括如下步骤：(1)制备供试品溶液：取2g供试品粉末过二号筛，加乙醇40ml，密闭，超声处理60min，过滤，水浴蒸干，残渣加2ml乙醇溶解，作为供试品溶液(优选加2ml乙醇溶解之后过滤一下再作为供试品溶液使用)；(2)制备对照品溶液：取木兰花碱对照品，加乙醇制成1mg/mL的对照品溶液；取氯化两面针碱对照品，加乙醇制成0.5mg/mL的对照品溶液；(3)薄层色谱检测：取对照品溶液5μl、供试品溶液5-10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺(40:10:1:0.1)为展开剂，展开剂蒸汽达到饱和20分钟后展开，展至8cm，取出，晾干，在366nm下检视；(4)检视结果分析：供试品色谱图中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点：在Rf＝0.85附近和Rf＝0.95附近处有明显的两个红色斑点(分别命名为DD-1和DD-2)，则供试品为单面针，而两面针和伪品均无此斑点。另外，为了获得更准确的检测结果，该方法实施过程需要控制环境的湿度不能过高，最好控制在50％RH以下(优选31％RH-45％RH)。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了一种可用于鉴别单面针与两面针的薄层色谱检测方法，明确了单面针薄层色谱的特有斑点，可用于鉴别单面针、区分单面针与两面针。该方法重复性好、准确度高，且简单可行、快速、成本低，适合用于区分单面针与两面针，以及单面针药材的质量控制和真伪鉴别，应用前景好。而且本专利技术的方法中，以乙醇为提取溶剂，安全性更好；GF254薄层板分离度更好，更经济环保；以三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺(40:10:1:0.1)为展开剂，分离度更好，斑点更清晰；显色方法为直接366nm检视，无需显色剂，如10％硫酸乙醇加热处理，可以直接显色，经济安全，效率更高。附图说明图1为单面针及对照品薄层色谱图；1-空白溶剂(乙醇)、2-木兰花碱对照品溶液、3-氯化两面针碱对照品溶液、4～10-单面针供试品、11～14-两面针供试品、15～17-单面针伪品供试品。图2为实施例4中供试品提取溶剂考察结果图；1-对照品混标、2-单面针95％乙醇提取、3-70％乙醇提取、4-甲醇提取、5-乙酸乙酯提取。图3为实施例4中供试品提取方式考察结果图；1-对照品混标、2-单面针Z2019030073-超声提取、3-回流提取、4-水浴提取。图4为实施例4中供试品提取时间考察结果图；1-对照品混标、2-单面针Z2019030073-超声提取30min、3-超声提取60min、4-超声提取90min。图5为实施例4中展开剂-1考察结果；1-对照品混标、2-单面针Z本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备供试品溶液，溶剂乙醇；/n(2)制备对照品溶液，对照品分别为木兰花碱和氯化两面针碱，溶剂乙醇；/n(3)薄层色谱检测：/n对照品溶液和供试品溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺为展开剂，展开剂蒸汽达到饱和后展开，取出，干燥，检视；/n(4)检视结果分析：供试品色谱图中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点：在Rf＝(0.76-0.88)和Rf＝(0.90-0.98)处有两个红色斑点，则供试品为单面针，而两面针和伪品均无此斑点。/n

【技术特征摘要】
1.一种单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备供试品溶液，溶剂乙醇；
(2)制备对照品溶液，对照品分别为木兰花碱和氯化两面针碱，溶剂乙醇；
(3)薄层色谱检测：
对照品溶液和供试品溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺为展开剂，展开剂蒸汽达到饱和后展开，取出，干燥，检视；
(4)检视结果分析：供试品色谱图中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点：在Rf＝(0.76-0.88)和Rf＝(0.90-0.98)处有两个红色斑点，则供试品为单面针，而两面针和伪品均无此斑点。


2.根据权利要求1所述单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中供试品溶液的制备：按照(1.2-2.8g)：(30-50ml)的比例取供试品加入乙醇中，密闭条件下超声处理60-90min，过滤，水浴蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。


3.根据权利要求1所述单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中木兰花碱对照品的浓度为0.8-1.5mg/mL，氯化两面针碱对照品的浓度为0.4-0.7mg/mL。


4.根据权利要求1所述单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，展开剂为三氯甲烷:甲醇:水:二乙胺＝(35-45):(8-12):(0.5-1.2):(0.06-0.12)。


5.根据权利要求1所述单面针薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤(3)中展开剂蒸汽达到饱和15-30min后展开，展至6-12cm。


6.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：凌勇根，龚云，白璐，王月秀，何娟娟，
申请(专利权)人：株洲千金药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43