一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；2)对照品溶液的制备；3)测定。本发明专利技术还进一步提供了上述正气片的气相指纹图谱在正气片中成分的质量检测中的应用及其质量检测方法。本发明专利技术更进一步提供了一种正气片中多味药材的气相指纹图谱的筛选方法。本发明专利技术提供的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其应用，建立了正气片的气相指纹图谱，并对正气片中各单味药材色谱峰进行了归属确证，能够从原料源头进行有效监测，严格控制原药材的质量，保证正气片成分中有效成分的量相对稳定，从而保证临床用药的安全有效。

【技术实现步骤摘要】
一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其应用
本专利技术属于中药成分检测的
，涉及一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其应用，具体涉及一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其在质量检测中应用。
技术介绍
COVID-19发病具有典型的湿毒致病特点，属于中医“疫病”范畴，表现为湿困脾闭肺，肺失宣降，气郁身热，患者多有舌苔白腻，大便稀溏，病程比一般呼吸道感染疾病更长，极易耗气伤阴，因此宜用化湿方辅以治疗。《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》(试行)第七版于2020年3月3日发布，其中将包括藿香正气口服液在内的藿香正气系列制剂作为医学观察期乏力伴胃肠不适者的预防推荐药物，而正气片亦属于藿香正气系列产品，具有发散风寒、化湿和中之功效，用于伤风感冒，头痛胸闷，吐泻腹胀。正气片处方由十味药组成，分别为广藿香油、紫苏叶油、木香、苍术、甘草、茯苓、陈皮、制半夏、姜厚朴和生姜。由于正气片处方药材多，化学成分复杂，仅靠对单一化合物进行鉴别或含测，无法全面反映正气片的物质基础和化学成分群的整体性和复杂性，难以全面控制正气片的内在质量。中药指纹图谱具有整体、宏观、模糊分析等特点，可通过对中药整体特征的描述，采用适当模糊处理方式，达到整体质量控制的目的，因此成为中药质量控制的有效手段。其中色谱指纹图谱分析可以使中药所含多种化学组分的整体特征可视化，从而披露出常规检验难以发现的质量问题。指纹图谱是根据中药多组分、多靶点的整体综合作用的特点，从“全成分”的角度出发的一种现代重要质量控制方法，对非单一成分药物的质量控制更加全面。正气片药材组成中含有大量的挥发性成分，目前缺乏对正气片挥发性成分的系统的定性研究，因此有必要建立正气片的气相指纹图谱，能够完成对正气片中成分的定性分析，以便有效的控制正气片质量。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种正气片的气相指纹图谱的检测方法及其应用，采用优化条件的前处理及气相色谱方法，建立了正气片的气相指纹图谱，从不同侧面突出反映不同类别化学成分对正气片指纹图谱系统的贡献，从而实现对正气片全方化学成分的检测，较全面的反映正气片中各成分的现状，为整体控制和评价正气片质量提供参考依据。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：将正气片样品，加入无水乙醇，超声提取、离心后，过滤，即得供试品溶液；2)对照品溶液的制备：将木香烃内酯、去氢木香内酯、苍术素对照品，加入无水乙醇溶解，配成对照品溶液；3)测定：采用相同色谱条件的气相色谱(GC)法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得正气片的气相指纹图谱。优选地，步骤1)中，所述正气片样品为将正气片粉碎后获得的粉末样品。优选地，步骤1)中，所述正气片样品加入的重量(g)与所述无水乙醇加入的体积(mL)之比为10：15-25。更优选地，所述正气片样品加入的重量(g)与所述无水乙醇加入的体积(mL)之比为10：20。所述正气片样品和无水乙醇称取时，应当精密称取。优选地，步骤1)中，所述超声提取时间为20-40min。更优选地，所述超声提取时间为30min。优选地，步骤1)中，所述正气片样品加入无水乙醇后，需精密称重。优选地，步骤1)中，所述超声提取后需再称重，并用无水乙醇补足失重。优选地，步骤1)中，所述离心条件为：离心时间：15-25min；离心转速：2000-4000r/min。更优选地，所述离心条件为：离心时间：20min；离心转速：3000r/min。优选地，步骤1)中，所述过滤的方式为滤膜过滤方式。更优选地，所述滤膜的孔径为0.22μm。优选地，步骤2)中，所述木香烃内酯的CAS号为553-21-9，去氢木香内酯的CAS号为74299-48-2，苍术素的CAS号为55290-63-6。优选地，步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：木香烃内酯为50-200μg/mL、去氢木香内酯为50-200μg/mL、苍术素为50-200μg/mL。更优选地，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：木香烃内酯为100μg/mL、去氢木香内酯为100μg/mL、苍术素为100μg/mL。优选地，步骤2)中，所述对照品溶液采用逐级稀释制得。更优选地，所述对照品溶液的逐级稀释包括以下步骤：A1)将木香烃内酯、去氢木香内酯、苍术素对照品，加入无水乙醇稀释并定容，配成对照品储备溶液；A2)将对照品储备溶液，加入无水乙醇稀释并定容，配成所需对照品溶液。进一步优选地，步骤A1)中，所述对照品储备溶液中各成分的浓度均为0.5mg/mL。进一步优选地，步骤A1)中，所述对照品储备溶液的储存温度为0-5℃。最优选地，所述对照品储备溶液的储存温度为4℃。所述对照品储备溶液于冰箱避光保存。优选地，步骤3)中，所述供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，是根据对照品溶液的指纹图谱中的已知特征峰，通过相对保留时间，指认出供试品溶液的指纹图谱中的相应特征峰，从而对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位。优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中采用的色谱柱为AgilentHP-5色谱柱(30m×0.32mm，0.25μm)。优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中采用的检测器为火焰离子化检测器(FID)。优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中，采用的升温程序为：初始温度为118-122℃保持1-3min，以1-3℃/min的速率升温至128-132℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至158-162℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至198-202℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至218-222℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至238-242℃，保持4-6min。更优选地，所述气相色谱法中，采用的升温程序为：初始温度为120℃保持2min，以2℃/min的速率升温至130℃，保持2min；以2℃/min的速率升温至160℃，保持2min；以2℃/min的速率升温至200℃，保持2min；以2℃/min的速率升温至220℃，保持2min；以2℃/min的速率升温至240℃，保持5min。优选地，步骤3)中，所述气相色谱法还包括以下检测条件：样口温度为260-300℃；进样量为1-5μL；载气为高纯氦气，载气纯度≥99.999％；载气流速为0.5-2.0mL/min；进样方式为分流进样，分流比为20-40:1。更优选地，所述气相色谱法还包括以下检测条件：样口温度为280℃；进样量为2μL；载气为高纯氦气，载气纯度≥99.999％；载气流速为1.0mL/mi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：/n1)供试品溶液的制备：将正气片样品，加入无水乙醇，超声提取、离心后，过滤，即得供试品溶液；/n2)对照品溶液的制备：将木香烃内酯、去氢木香内酯、苍术素对照品，加入无水乙醇溶解，配成对照品溶液；/n3)测定：采用相同色谱条件的气相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得正气片的气相指纹图谱。/n

【技术特征摘要】
1.一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：
1)供试品溶液的制备：将正气片样品，加入无水乙醇，超声提取、离心后，过滤，即得供试品溶液；
2)对照品溶液的制备：将木香烃内酯、去氢木香内酯、苍术素对照品，加入无水乙醇溶解，配成对照品溶液；
3)测定：采用相同色谱条件的气相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得正气片的气相指纹图谱。


2.根据权利要求1所述的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)中，包括以下条件中任一项或多项：
A1)所述正气片样品加入的重量与所述无水乙醇加入的体积之比为10：15-25，g/mL；
A2)所述超声提取时间为20-40min；
A3)所述离心条件为：离心时间：15-25min；离心转速：2000-4000r/min。


3.根据权利要求1所述的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：木香烃内酯为50-200μg/mL、去氢木香内酯为50-200μg/mL、苍术素为50-200μg/mL。


4.根据权利要求1所述的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述气相色谱法的检测条件为：色谱柱为AgilentHP-5色谱柱，30m×0.32mm、0.25μm；检测器为火焰离子化检测器；样口温度为260-300℃；进样量为1-5μL；载气为高纯氦气，载气纯度≥99.999％；载气流速为0.5-2.0mL/min；进样方式为分流进样，分流比为20-40:1。


5.根据权利要求1所述的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述气相色谱法中，采用的升温程序为：初始温度为118-122℃保持1-3min，以1-3℃/min的速率升温至128-132℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至158-162℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至198-202℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至218-222℃，保持1-3min；以1-3℃/min的速率升温至238-242℃，保持4-6min。


6.根据权利要求1-5任一所述的一种正气片的气相指纹图谱的检测方法在正气片中成分的质量检测中的用途。


7.一种正气片的质量检测方法，包括采用权利要求1-5任一所述的正气片的气相指纹图谱的检测方法获得正气片的气相指纹图谱，将得到的正气片的气相指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的正气片的标准气相指纹图谱进行相似度比较。


8.根据权利要求7所述的一种正气片的质量检测方法，其特征在于，采用与权利要求1-5任一所述的正气片的气相指纹图谱的检测方法相同的条件得到正气片的标准气相指纹图谱，所述正气片的标准气相指纹图谱包括15个共有指纹峰，以8号峰为参照峰S峰，保留时间为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈丹萍，张正光，詹常森，姜鹏，温方方，
申请(专利权)人：上海和黄药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31