Actinoxocine及其异构体制备和应用制造技术

本发明专利技术涉及新化合物(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的化学结构、制备方法，以及在抗肿瘤、抗炎及抗菌新药研发中的应用。(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine是本发明专利技术申请人从海洋放线菌Streptomyces griseus sp.KCB-132的次生代谢产物中发现的新化合物，药理活性研究发现，2个新化合物对多种细菌及真菌具有较好的生长抑制作用，同时，(-)-Actinoxocine对人胃腺癌AGS细胞的生长具有良好的抑制作用，而(+)-Actinoxocine对TNF-α蛋白释放表现出抑制作用，具有研发成为新型抗菌、抗肿瘤及抗炎药物的潜力。(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的化学结构、制备方法及其抗肿瘤、抗炎及抗菌活性均为首次公开，因此具有突出的实质性特点。因此具有突出的实质性特点。因此具有突出的实质性特点。

【技术实现步骤摘要】
Actinoxocine及其异构体制备和应用


[0001]本专利技术中涉及的Actinoxocine及其异构体指的是(+)-Actinoxocine与(-)-Actinoxocine，以及(+)-Actinoxocine与(-)-Actinoxocine的结构、制备方法，在抗菌、抗炎及抗肿瘤新药研发中的应用。

技术介绍

[0002]当今，肿瘤、炎症等重大疾病不但严重威胁着我国人民健康及生命安全，同时也对国民经济带来了沉重的负担。因此，研发新型、高效低毒且作用机制独特的抗肿瘤及抗炎新药具有重要的社会及经济意义。
[0003]创新药物研发经验表明，从天然产物中寻找活性先导物进而创制新药是最有效途径之一，天然产物特有的化学结构复杂性和生物活性多样性，奠定了从天然产物中发现活性先导物进而创制新药的成功几率。海洋放线菌是一类重要的药源微生物，生活在大洋中的放线菌，因其生理生化和16S rRNA等分子生物学特征与陆生放线菌有明显差别，致使其次生代谢产物结构类型更加新颖、生物活性更加显著，因此，从海洋放线菌中寻找新型先导化合物进而研发抗炎及抗肿瘤新药具有巨大的潜力。
[0004]本专利技术所涉及的(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine为新化合物，是专利技术申请人从海洋活性放线菌Streptomyces griseus sp.KCB-132的次生代谢产物中分离得到的新结构化合物。药理活性实验发现，(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine对多种细菌及真菌具有较好的生长抑制作用，同时，(-)-Actinoxocine对人胃腺癌AGS细胞的生长具有良好的抑制作用，而(+)-Actinoxocine对TNF-α蛋白释放表现出抑制作用，因此，2个新化合物具有开发成新型抗炎、抗菌及抗肿瘤药物的潜力。(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的化学结构、制备方法及其抗菌、抗炎及抗肿瘤活性研究均为首次公开，因此具有突出的实质性特点。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供新化合物(+)-Actinoxocine与(-)-Actinoxocine的制备方法，以及在抗肿瘤、抗炎及抗菌新药研发中的应用。
[0006]本专利技术所涉及的用于抗肿瘤、抗炎及抗菌新药研发的2个新化合物为一对对映异构体，命名为(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine，其分子式为C
20
H
16
O4，化学结构式分别如下：
[0007][0008]本专利技术所涉及的(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的制备方法为：将海洋活性放线菌Streptomyces griseus sp.KCB-132划线接种于固体培养基上，于28℃培养3-4天，直至长出白色的孢子，然后将孢子接种到液体培养基，在28℃及150-220转/分钟条件下，摇床培养8-12天，收获发酵物。过滤发酵物获得发酵液和菌丝体，发酵液经大孔吸附树脂柱吸附、洗脱及浓缩，菌丝体经丙酮破碎提取，减压浓缩提取物；合并浓缩物，利用有机溶剂萃取，减压浓缩得总浸膏。总浸膏通过硅胶柱层析，梯度洗脱，收集洗脱液体积比1:20的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集35-45％有机醇洗脱部分，洗脱液浓缩，冷藏结晶；结晶液过滤，减压干燥，即得到(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的混合物。通过手性填料的HPLC，即将对映异构体混合物分为纯度达98％以上的(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine单体化合物。
[0009]本工艺中所用涉及的培养基，为半海水ISP2培养基、纯海水ISP2培养基的一种,优选为半海水ISP2培养基。
[0010]本工艺中所涉及的用作提取溶剂的有机醇，为甲醇、乙醇中的一种，优选为乙醇作为提取剂。
[0011]本工艺中所涉及的大孔吸附树脂柱，为弱极性或非极性的大孔吸附树脂，优选弱极性型号。
[0012]本工艺中所涉及的萃取剂，为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇中的一种，优选为乙酸乙酯作为萃取剂。
[0013]本工艺中所涉及的重结晶溶剂，为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷等溶剂中的一种或几种，优选甲醇作为重结晶溶剂。
[0014]本工艺中所涉及的手性分离填料，可用Chiralpak AS-H、Chiralpak AD-H、Chiralcel OD-H及(R,R)WHELK 01，优选(R,R)WHELK 01作为分离填料。
[0015]本专利技术还提供了(+)-Actinoxocine与(-)-Actinoxocine的抗肿瘤、抗炎及抗菌实验方法、结果及新药研发中的应用前景。
[0016]本专利技术涉及的新化合物(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine，其化学结构、制备方法及其抗炎、抗菌及抗肿瘤活性研究，均为首次公开，不存在通过其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，且有望用于一种新型抗炎、抗菌或抗肿瘤药物的开发。
附图说明
[0017]图1、新化合物(
±
)-Actinoxocine的核磁共振氢谱
[0018]图2、新化合物(
±
)-Actinoxocine的核磁共振碳谱
[0019]图3、新化合物(
±
)-Actinoxocine的DEPT-135图谱
[0020]图4、新化合物(
±
)-Actinoxocine的氢-氢相关图谱
[0021]图5、新化合物(
±
)-Actinoxocine的HSQC图谱
[0022]图6、新化合物(
±
)-Actinoxocine的HMBC图谱
[0023]图7、新化合物(
±
)-Actinoxocine的NOESY图谱
[0024]图8、新化合物(
±
)-Actinoxocine的高分辨质谱
[0025]图9、新化合物(+)-Actinoxocine的单晶X-射线衍射图
[0026]图10、新化合物(-)-Actinoxocine的单晶X-射线衍射图
[0027]图11、新化合物(+)-Actinoxocine的CD图谱
[0028]图12、新化合物(-)-Actinoxocine的CD图谱
[0029]图13、新化合物(+)-Actinoxocine的紫外吸收图谱
[0030]图14、新化合物(-)-Actinoxocine的紫外吸收图谱
[0031]图15、(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的抗炎活性
具体实施方式
[0032]下面的实施例用以解释本专利技术，但是并非对本专利技术实质内容的限制。
[0033]实施例1、(+)-Actinoxocine及本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.新化合物(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的化学结构如下图所示：2.权利要求1所述的2个新化合物的制备方法，其特征为：将海洋放线菌Streptomyces griseus sp.KCB-132划线接种于固体培养基上，于28℃培养3-4天，直至长出白色的孢子，接种到液体培养基，于28℃及150-220转/分钟条件下，摇床培养8-12天收获发酵物；发酵液通过大孔吸附树脂柱层析吸附、洗脱、减压浓缩，菌丝体经丙酮破碎、提取、减压浓缩，浓缩物合并得总浸膏；总浸膏过硅胶柱层析，梯度洗脱，收集洗脱液体积比为1:20的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集35-45％有机醇洗脱部分，洗脱液浓缩，冷藏结晶；结晶液过滤，减压干燥，即得(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的混合物结晶体；混合物借助手性填料HPLC分离，即得到纯度达98％以上的(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine单体化合物。3.根据权利要求2所述的新化合物(+)-Actinoxocine及(-)-Actinoxocine的制备方法，其特征为：工艺中所用涉及的培养基，为半海水ISP2培养基、纯海水ISP2培养基的一种，优选为半海水ISP2培养基。4.根据权利要求2所述的新化合物(+)-Actinoxocine及(-)-Ac...

【专利技术属性】
技术研发人员：张淑敏，张露，谢则平，李诚博，宫世周，戴胜军，申胜标，
申请(专利权)人：权利要求书一页说明书五页附图一一页，
类型：发明
国别省市：