一种分子马达脂质囊泡的组合物及其制备方法、应用技术

本发明专利技术涉及一种提高分子马达的溶解性、长效性和促进吸收的作用的分子马达脂质囊泡的组合物及其制备方法、应用，分子马达脂质囊泡的组装结构为含有分子马达ATP合酶及其脂质双分子层，具有生物膜性的闭合结构或细胞区室，亦称为囊泡，囊泡(niosolnes)过去亦称类脂质体，本发明专利技术的含分子马达的生物膜具有脂质双分子层结构，使其在化妆品领域应用时具有保湿、美白、抗衰老的作用，达到提高稳定性、提高分子马达的溶解性、长效性和促进吸收的作用，生产工艺简便，成本低廉，而且避免了因采用磷脂的脂质体需要纯化、易氧化降解等不足。易氧化降解等不足。易氧化降解等不足。

【技术实现步骤摘要】
一种分子马达脂质囊泡的组合物及其制备方法、应用


[0001]本专利技术属于生物和高分子材料领域，具体涉及一种提高分子马达的溶解性、长效性和促进药物或功效成分吸收的作用的分子马达脂质囊泡的组合物及其制备方法、应用。

技术介绍

[0002]分子马达为由生物大分子构成，利用化学能进行机械做功的纳米系统。通常是一类ATP合酶蛋白，是利用跨膜电化学梯度催化合成ATP的膜蛋白复合物家族，跨膜质子梯差驱使ATP合酶合成ATP。在生物体内，糖类和脂肪这些分解产物的小分子在线粒体中被氧化分解时可以释放出能量，这些能量绝大部分储存在一种叫做腺苷三磷酸(ATP)的分子内才能被生物利用。
[0003]分子马达同时也是一组跨膜蛋白，通常嵌入在线粒体、叶绿体以及细菌质膜上，而生物膜是生物最基本的结构与功能单位细胞，以脂质双分子层闭合囊泡为基本框架结构,其各层之间被水隔开,具有亲水和巯水性。ATP合酶(分子马达)是一种跨膜蛋白，它们的含量一般比较低且它们单独在存在时不稳定，容易结构变异失去活性，且其结构中存在疏水亚基，水溶性不太高，从而影响其使用。因此，通常在分子马达ATP合酶制备成带脂质囊泡，即带有类生物膜性的闭合结构或细胞区室的脂质结构有利于保持其活性及其使用。
[0004]将分子马达搭载脂双层膜已应用于作为药物的载体和传感器的研究，文献1ZL200410098929.9提及一种体外重构的分子马达脂质体，作为可调控分子马达微动力生物传感器。
[0005]天然存在的脂分子层膜，具有其他药物载体无法比拟的优势，比如红细胞膜应用于药物载体，由于具有良好的生物相容性和生物可降解性，并且可以增加药物的稳定性、生物靶向性，延长药物的半衰期，并且具有缓释及减轻药物的毒副作用。此外，以磷脂和胆固醇为主的人工构建囊泡脂质体应用也较广泛。
[0006]然而传统双分子层膜，机械性能差，容易破碎，其寿命十分有限，在常温下，大多仅能维持几个小时(很少能超过8个小时)。并且其存在条件也十分苛刻，所以传统双分子层在实际应用中并没有多大进展。而人工的单纯磷脂双分子层脂质体,也称人工膜，同样不太稳定，均具有在体外易氧化、渗漏、储存性不好、易聚集沉淀等缺陷；在体内易被一些酶类物质降解和巨噬细胞吞噬而不能到达靶组织发挥有效作用等缺点，这些都限制了其应用。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于为了解决传统双分子层膜，机械性能差，容易破碎，寿命有限的缺陷而提供一种提高该脂质膜的稳定性和抗氧化性质，从而提升实际应用用途性能的分子马达脂质囊泡组合物。
[0008]本专利技术第二方面是为了提供该一种分子马达脂质囊泡的组合物的制备方法。
[0009]本专利技术第三方面还提供了由该种方法制备的分子马达脂质囊泡在化妆品领域的应用。
[0010]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0011]一种分子马达脂质囊泡组合物，所述组合物包括具有双分子层的分子马达脂质小体，带有电荷的聚合物，生物生长因子与抗氧化酶；
[0012]其中，带有电荷的聚合物，生物生长因子与抗氧化酶利用生物膜重构自组装嵌入双分子层脂质小体，该脂质小体嵌有分子马达。
[0013]本专利技术中，重组分子马达脂质囊泡的组装结构为含有分子马达ATP合酶及其脂质双分子层，具有生物膜性的闭合结构或细胞区室，亦称为囊泡，囊泡(niosolnes)过去亦称类脂质体，是指由非离子表面活性剂(加或不加胆固醇)组成的、体内外性质与脂质体极其相似的一类载药系统，而且避免了因采用磷脂的脂质体需要纯化、易氧化降解等不足。
[0014]ATP酶是天然存在的纳米尺度能量转换装置，也是抗逆性较为优秀的模型，本专利技术所得到的生物膜是完整的或者是片段的，形态上为呈脂质双分子层结构，其组成成分主要是脂质和F0F1
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ATP酶、SOD(嗜热SOD)、带电荷的聚合物、生物生长因子等蛋白质，另有少量糖类通过共价键结合在脂质或蛋白质上。
[0015]本专利技术中，带电荷的聚合物分布在双分子层结构的表面，以电荷同性相斥的原理，使得分子马达脂质囊泡组合物之间可以远离开，从而避免了团聚而形成沉淀的问题；
[0016]在双分子层结构的表面嵌入嗜热SOD，SOD作为超氧化物歧化酶，用于防止分子马达脂质囊泡组合物被氧化；
[0017]生物生长因子，能对皮肤细胞提供靶向作用，并且能够促进皮肤伤口，提升表皮细胞活力。
[0018]根据本专利技术的一个实施例，所述带有电荷的聚氨基酸为带有负电荷的氨基酸聚合物；所述氨基酸聚合物包括聚谷氨酸或聚天冬氨酸中的一种。
[0019]根据本专利技术的一个实施例，所述带有电荷的聚氨基酸为带有正电荷的氨基酸聚合物，所述氨基酸聚合物包括聚组氨酸、聚赖氨酸或聚精氨酸中的一种。
[0020]根据本专利技术的一个实施例，所述带有电荷的聚合物为带有负电荷的多聚唾液酸、透明质酸、硫酸软骨素、硫酸乙酰肝素、壳聚糖中的一种。
[0021]根据本专利技术的一个实施例，所述生物生长因子包括EGF、NGF、KGF中的一种。
[0022]根据本专利技术的一个实施例，所述抗氧化酶为嗜热菌制得的SOD。
[0023]根据本专利技术的一个实施例，所述的嗜热菌包括嗜热栖热菌、嗜热链球菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜热乳酸链球菌、嗜热侧孢霉、嗜热链霉菌中的一种。
[0024]更优选地，本专利技术利用生物膜重构自组装嵌入氨基酸、生物生长因子及SOD。
[0025]最优选地，本专利技术利用生物膜重构自组装嵌入聚谷氨酸、生物生长因子及SOD。
[0026]根据本专利技术的一个实施例，所述生物生长因子包括EGF、NGF、KGF中的一种。
[0027]更优选地，本专利技术的生物生长因子选择KGF
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2。
[0028]一种上述的分子马达脂质囊泡组合物的制备方法，所述制备方法的步骤为：
[0029]1)菌体收集；
[0030]2)菌体破碎：将步骤1)得到的菌体破碎得到细胞破碎液；
[0031]3)制备耐热SOD：将步骤2)得到的细胞破碎液离心，得到沉淀物A与上清液B；将沉淀物A用缓冲液B形成悬浮溶液，酶解反应后离心得到上清液溶液，冻干得到SOD粉末；
[0032]4)F0F1
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ATP酶分子马达脂质小体生物膜的制备：取步骤3)得到的上清液B多次离
心得到沉淀物B，制备得到F0F1
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ATP酶分子马达脂质小体生物膜；
[0033]5)自组装膜材插入准备：取带有电荷的聚合物、生物生长因子及步骤3)得到的SOD粉末溶于无水甲氨酰中，加入亚胺，在冰浴下磁力搅拌，将十八胺溶于DMF中，缓慢滴入上述溶液中，充氮，反应；反应结束后，依次用过量的水醇混合液和去离子水透析，水系膜过滤，干燥，得到复合物；
[0034]6)重组装分子马达膜制备：将步骤4)得到的F0F1
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ATP酶分子马达脂质小体生物膜与步骤5)得到的复合物配合，溶解在氯仿中，再加入同体积的PB本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述组合物包括具有双分子层的分子马达质小体，带有电荷的聚合物，生物生长因子与抗氧化酶；其中，带有电荷的聚合物，生物生长因子与抗氧化酶利用生物膜重构自组装嵌入双分子层脂质小体，该脂质小体嵌有分子马达。2.根据权利要求1所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述带有电荷的聚氨基酸为带有负电荷的氨基酸聚合物；所述氨基酸聚合物包括聚谷氨酸或聚天冬氨酸中的一种。3.根据权利要求1所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述带有电荷的聚氨基酸为带有正电荷的氨基酸聚合物，所述氨基酸聚合物包括聚组氨酸、聚赖氨酸或聚精氨酸中的一种。4.根据权利要求1所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述带有电荷的聚合物为带有负电荷的多聚唾液酸、透明质酸、硫酸软骨素、硫酸乙酰肝素、壳聚糖中的一种。5.根据权利要求1所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述生物生长因子包括EGF、NGF、KGF中的一种。6.根据权利要求1所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述抗氧化酶为嗜热菌制得的SOD。7.根据权利要求6所述的一种分子马达脂质囊泡组合物，其特征在于，所述的嗜热菌包括嗜热栖热菌、嗜热链球菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜热乳酸链球菌、嗜热侧孢霉、嗜热链霉菌中的一种。8.一种如权利要求1所述的分子马达脂质囊泡组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤为：1)菌体收集；2)菌体破碎：将步骤1)得到的菌体破碎得到细胞破碎液；3)制备耐热SOD：将步骤2)得到的细胞破碎液离心，得到沉淀物A与上清液B；将沉淀物A用缓冲液B形成悬浮溶液，并加入MgCl2溶液与DNaseI，反应后离心得到上清液溶液，冻干得到SOD粉末；4)F0...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏建良，颜贵卉，王旻子，张明洲，姚雨辰，章鹏坤，
申请(专利权)人：杭州优玛达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：