一种三七叶产品制造技术

本发明专利技术涉及一种利用三七叶制备的富含稀有人参皂苷的产品及其制备方法和用途。该产品中稀有人参皂苷含量高，基本不含常见人参皂苷。制备方法简单、无需使用有机溶剂、无溶剂残留。同时还提供一种具有优异抗肿瘤效果的稀有人参皂苷组合物。人参皂苷组合物。

【技术实现步骤摘要】
一种三七叶产品


[0001]本专利技术涉及一种以三七叶为原料制备的产品，特别是一种富集稀有人参皂苷的三七叶产品。

技术介绍

[0002]三七叶为五加科人参属植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥叶，始载于《本草纲目》，其茎叶可供药用。三七叶具有止血、消肿、止痛之功效，对吐血、外伤出血、痈肿毒疮等具有很好的治疗作用。文献报道三七叶中含有多种活性成分，包括皂苷、黄酮、糖等多类化合物。现代药理研究表明，三七叶具有镇静、镇痛、降血脂、抗炎等药理作用。三七叶总皂苷为主要活性物质，其中人参皂苷Rb3为主要成分。
[0003]20世纪60年代，研究发现，人参皂苷具有抗癌活性，人参皂苷成为抗癌天然药物研究的一个热门领域。后来，研究发现，人参皂苷经过转化后的次级代谢衍生物具有更强的生物活性(刘蓉：生物转化技术制备稀有人参皂苷的研究进展)。这种次级代谢衍生物被命名为“稀有人参皂苷”，目前，已经发现了60多种稀有人参皂苷，其中包括Rk2、Rg3、Rh2、Rg5、Rh1、Rh3、Rk1等多种具备不同抗癌活性的稀有人参皂苷。与稀有人参皂苷相对应人们把直接从五加科植物中提取出来的人参皂苷称为“原型人参皂苷”，把其中含量较高的人参皂苷称为常见人参皂苷，主要有Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd等。
[0004]稀有人参皂苷是人参皂苷中的重要活性成分。研究表明，稀有人参皂苷除了具有较强的抗肿瘤作用外还具有降血压、提高免疫力、抗炎等多种药理活性。三七叶中稀有人参皂苷的含量很少或根本不含，因此至今为止尚没有含有大量稀有人参皂苷的三七叶产品问世。
[0005]2000年，我国已经批准人参皂苷Rg3为处方药，2006年，我国研发的人参皂苷Rh2药品也已批准上市。但在稀有人参皂苷的产业化方面仍处于起步阶段，国内生产高纯度人参皂苷单体的企业严重不足，具备稀有人参皂苷产业化生产能力的企业更少。主要原因是：由于稀有人参皂苷为人参皂苷的次级代谢产物，不仅含量非常少，而且制备困难，分离工艺复杂，收率低。未来抢先具备产业化生产稀有人参皂苷能力的企业必然具有市场话语权。由于三七叶中基本不含稀有人参皂苷，因此只能通过诸如化学反应、生物转化等手段获得这些皂苷。只有积极开展稀有人参皂苷的转化研究才能对大规模产业化制备稀有人参皂苷提供必要的技术支持。
[0006]人参皂苷的转化方法主要包括化学法、微生物法和酶法。微生物法和酶法因其具有对环境友好、专一性强、转化效率高等优点被科研人员广泛使用。
[0007]化学法：由于人参皂苷连接的糖基在遇到酸或碱时糖苷键会发生断裂。在较温和的条件下，人参皂苷的糖苷键依次断裂，得到相应的次生人参皂苷，但若是水解反应的条件过于剧烈，例如使用硫酸或盐酸等强酸作为反应试剂时，人参皂苷的糖链部分会发生完全水解得到人参皂苷元即原人参二醇，甚至得到苷元的结构发生改变了的人参二醇。郭迎迎等将人参皂苷Rd溶解于pH为2.0的甲酸溶液中，60℃水浴加热5h，利用高效液相色谱
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四极
杆
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飞行时间质谱联用技术对人参皂苷Rd酸水解产物进行分离鉴定，通过水解产物的鉴定推断了人参皂苷Rd的化学转化方式。宋长春等将西洋参茎叶总皂苷利用氢氧化钠加热碱水解，然后再利用乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析以及重结晶等方法，制备得到了纯度较高的人参皂苷20(S)人参皂苷Rh1和20(S)人参皂苷Rh2。
[0008]微生物转化法：微生物转化人参皂苷是指利用微生物在适宜的条件下，将底物经过特殊的代谢途径转化为目标产物的过程。近年来，利用微生物转化人参皂苷而提高其药理活性越来越受到人们的关注。微生物转化法具有操作简单，条件温和，人参皂苷的转化效率高，无需提纯粗酶和不会带来二次污染等优点。自1987至今已经对多种天然来源的人参皂苷单体或总皂苷进行了微生物转化的研究。蔡小雨等通过药用真菌发酵，显著提高了西洋参总皂苷中稀有人参皂苷的含量，总皂苷中稀有人参皂苷的含量增加了20
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150％，稀有人参皂苷F1、C
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K和Rg2等人参皂苷含量明显升高。明有山等筛选出一株霉菌，水解人参皂苷Re生成Rg1，经过制备柱层析得到纯度为81.98％的人参皂苷Rg1，产率为71.83％。于珊珊等从土壤中筛选出了一种TH
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20菌株，能够同时转化二醇型和三醇型人参皂苷，可分别将Rb1、Re和Rg1转化为Rd、Rg2和PPT。金艳等从橙汁中分离到的菌株CZ2能够转化人参皂苷Rb1生成F2、Gyp
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XVII。张丽娜等以西洋参提取物为底物进行微生物转化人参皂苷研究，利用高效液相色谱(HPLC)法对人参皂苷Re及其发酵产物进行分析，结果表明，高效菌株S329可以将人参皂苷Re转化人参皂苷Rh1，转化率为27.65％。Cui Lei等利用内生菌JG09将人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1转化为相应稀有人参皂苷F2、C
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K和Rh1，人参皂苷F2和C
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K的最大转化率分别可达到94.53％和66.34％
[0009]酶转化法：由于酶法具有专一性强、反应条件温和、转化效率高、无污染等优点，在人参皂苷的结构修饰和代谢研究中被认为是最有效的工具。利用糖苷酶对糖链进行结构修饰来改善化合物的生物活性，以满足医药行业的发展，也是目前人参皂苷研究的重点。Shin等发现热解纤维菌中的葡萄糖苷水解酶能够水解皂苷C
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20位外侧的L
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阿拉伯糖和D
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葡萄糖，因此，含有L
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阿拉伯糖的人参皂苷Rc可以通过这种酶转化成C
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K。童庆宣等利用一种蜗牛酶，转化三七叶二醇组人参皂苷制备稀有人参皂苷C
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K，经硅胶柱分离得到纯度高于98％的人参皂苷C
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K。王宇等利用糖苷酶对三七叶三醇型人参皂苷进行转化，制备了稀有人参皂苷F1和Rh1。目前，以常见人参皂苷作为底物并对其进行修饰，是稀有人参皂苷制备的有效途径。以人参皂苷Rb2、Rb3和Rc为底物，对其进行C
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3位和C
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20位的修饰，能够得到不同种类的稀有人参皂苷如Rg3、Rh2、F2和PPD等产物。这些稀有人参皂苷的制备工艺越来越完善，其药理活性也较为清晰。
[0010]中国专利CN109824750A中公开了一种以三七叶总皂苷为原料制备稀有人参皂苷方法，该方法以三七叶总皂苷为原料，经过溶解、阳离子催化树脂催化、浓缩水解、真空减压干燥或冷冻干燥得到稀有人参皂苷总产物。此方法需要经过多步反应，工艺复杂，成本较高，且容易引入有害物质。
[0011]中国专利CN101139562A中以真菌发酵转化三七叶总皂苷制备稀有人参皂苷，其制备工艺较为复杂，且其生产的主要为稀有人参皂苷Compound K即C
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K。
[0012]化学法转化稀有人参皂苷存在反应条件难以控制、产物复杂、污染环境等弊端本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备高含量稀有人参皂苷产品的方法，其特征在于，其制备方法为A或B：A：将三七叶干燥粉碎，加入适量水，在常压下加热回流48小时以上，优选的为60小时、72小时、84小时、96小时108小时或120小时以上，过滤，将药渣干燥，得到所需产品；B：将三七叶干燥粉碎，加入适量水，高温高压下煎煮2小时以上，优选的为4小时以上，优选的为6小时以上、8小时以上、10小时以上、12小时以上、14小时以上、16小时以上、18小时以上、20小时以上、22小时以上、24小时以上、28小时以上、30小时以上、32小时以上、34小时以上、36小时以上、38小时以上、40小时以上、42小时以上、44小时以上、48小时以上或者50小时以上，过滤，将药渣干燥，得到所需产品；；所述高温为100℃以上，优选的为不低于110℃、115℃、120℃、125℃、130℃、135℃、140℃、145℃或150℃。2.如权利要求1中的制备方法，其特征在于：在制备方法A中，液料比可以为(30
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5):1，优选的为(25
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8):1，更优选的为(20
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9):1或(15
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10):1，优选为10:1。在制备方法B中，液料比可以为(30
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5):1，优选的为(25
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6):1，更优选的为(20
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7):1或(18
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10):1，优选为15:1。3.如权利要求1或2中的制备方法，其特征在于：任选的对药渣进一步地用有机溶剂或含水有机溶剂提取，得到具有高含量稀有人参皂苷的提取物。4.如权利要求1
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3任一项中的制备方法，其特征在于：提取物或药渣中含有8种稀有人参皂苷，具体的可以为20(S)
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Rg3、20(R)
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Rg3、Rk1、Rg5、20(S)
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Rh2、20(R)
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Rh...

【专利技术属性】
技术研发人员：李绪文，金永日，桂明玉，
申请(专利权)人：吉林瑞诺科技有限公司，
类型：发明
国别省市：