一种人体内血液中DHA浓度的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种人体内血液中DHA浓度的检测方法，包括如下步骤：S1、血液样品前处理；S2、标准储备液和标准溶液的配制；S3、LC‑MS/MS分析检测，步骤S1的具体操作方法为：准确称取0.3g血液，置于10mL离心管中，依次加入40μL质量浓度为40μg/mL的C23∶0内标液、1.5mL蒸馏水、400μL含有0.05％抗氧化剂(BHT)的甲醇溶液、2mL氯仿，振荡均匀，以2500r/min的转速离心10min，取氯仿层，重复以上提取过程，合并氯仿层至20mL顶空进样瓶中，氮气吹干备用。本发明专利技术采用杂环衍生化结合下对DHA进行分析，并将该方法应用到人血液中DHA的检测，采用内标法定量，而不是归一化法确定其相对含量，该方法操作简便，准确度、灵敏度、精密度均达到满意效果，实用性高，适用于人血液中DHA含量的分析检测。

【技术实现步骤摘要】
一种人体内血液中DHA浓度的检测方法
本专利技术涉及不饱和脂肪酸检测
，具体为一种人体内血液中DHA浓度的检测方法。
技术介绍
二十二碳六烯酸(DHA)，俗称脑黄金，属n-3系多不饱和脂肪酸，是人脑神经细胞膜中主要的脂质成分，DHA能促进婴幼儿的中枢神经系统发育，可保护视力。DHA还有预防心脑血管疾病、抑制肿瘤生长、抗炎及抑制过敏反应等作用。流行病学调查显示，人群中最易发生DHA缺乏的是新生儿、婴幼儿、孕妇和老年人，但DHA也并非摄入越多越好，大量摄入会产生出血倾向，有凝血功能障碍、严重高血压及自身免疫性疾病的患者必须慎用。因此建立快速准确的检测方法测定人血液中的DHA含量，具有一定的现实意义。文献中有采用薄层色谱法对DHA进行分析的，而大部分则使用气相色谱或气相色谱-质谱联用技术由于DHA的极性较强，挥发性、稳定性较低，需要衍生化处理后进行气相色谱检测,其衍生化方法多为甲酯衍生化法，可分为酸催化和碱催化两大类，有关研究发现酸催化比碱催化更适用于酯化DHA等游离脂肪酸，酸催化主要采用氯化氢-甲醇酯化法、硫酸-甲醇酯化法和三氟化硼-乙醚-甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人体内血液中DHA浓度的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：/nS1、血液样品前处理；/nS2、标准储备液和标准溶液的配制；/nS3、LC-MS/MS分析检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种人体内血液中DHA浓度的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1、血液样品前处理；
S2、标准储备液和标准溶液的配制；
S3、LC-MS/MS分析检测。


2.根据权利要求1所述的一种人体内血液中DHA浓度的检测方法，其特征在于：所述步骤S1的具体操作方法为：准确称取0.3g血液，置于10mL离心管中，依次加入40μL质量浓度为40μg/mL的C23∶0内标液、1.5mL蒸馏水、400μL含有0.05％抗氧化剂(BHT)的甲醇溶液、2mL氯仿，振荡均匀，以2500r/min的转速离心10min，取氯仿层，重复以上提取过程，合并氯仿层至20mL顶空进样瓶中，氮气吹干备用，在氮气保护下向上述吹干的顶空进样瓶中加入200μLAMP，充满氮气后密封，在210℃的恒温油浴中反应75min后冷却至室温，加甲醇定容至1mL，样品经0.22μm滤膜过滤后用LC-MS/MS分析检测。


3.根据权利要求1所述的一种人体内血液中DHA浓度的检测方法，其特征在于：所述步骤S2中标准储备液的配制方法为：取DHA标准品12.5mg(精确至0.1mg)于50mL棕色容量瓶中，加入BHT25m...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒙晋宁，邹皓月，王贯宇，
申请(专利权)人：苏州和合医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32