一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法技术

本发明专利技术公开了一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样本，加入一定量的混合有机溶剂进行萃取，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测。本发明专利技术方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为拉考沙胺的血药浓度测定提供依据；本方法的血浆标准曲线线性范围为100～15000ng/mL，批内和批间精密度RSD均小于±15％，适合于测定血浆中拉考沙胺的浓度。

【技术实现步骤摘要】
一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种药物的测定方法，特别涉及一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法。
技术介绍
目前，全球已经有超过20万癫痫患者使用了拉考沙胺。拉考沙胺目前尚未在日本或中国获得批准用于癫痫治疗。2012优时比公司(UCB)宣布在日本和中国启动拉考沙胺Ⅲ期临床试验，其目的在于研究拉考沙胺作为部分性发作癫痫成年患者辅助疗法的有效性和安全性。拉考沙胺作为抗癫痫作用被认为是调节钠通道缓慢失活，并在一些随机对照试验已显示其疗效和耐受性。一个单中心、大型队列研究中发现，连续服用拉科酰胺片治疗难治性癫痫的保留率，1年为62％，2年为45％，3年为35％。服药期间有18％患者报告发作显著减少或发作停止超过6个月，其中4例发作停止超过1年。长期疗效与唑尼沙胺和普瑞巴林相似。不良事件的报告为61％，绝大多数与中枢神经有关。大多数与中枢神经系统有关。大多数临床因素没有影响保留率，撤出不是因为不良事件的发生，而往往是因为无效。目前，现有关于拉考沙胺测定方法的速度、精度、灵敏度、选择性均有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法，其特征在于：血浆样本经预处理后经高效液相色谱-串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：/n(1)血浆样本预处理：/n血浆以K

【技术特征摘要】
1.一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法，其特征在于：血浆样本经预处理后经高效液相色谱-串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：
(1)血浆样本预处理：
血浆以K2EDTA为抗凝剂，以拉考沙胺-d6为内标；于96深孔板中精密加入100μL的血浆样本，加入5μL体积比为1：1的甲醇水溶液，混匀后加入10μL的5ng/μL的内标拉考沙胺-d6溶液，混匀后加入600μL的乙腈，涡旋混合1min，于20℃以3000rpm离心10min，取上层清液50μL至另一装有600μL混合有机溶剂的96深孔板中，涡旋混匀，于20℃以3000rpm离心5min后作为测试样本待检测；其中：混合有机溶剂为乙腈：水：1M醋酸铵按照体积比15：85：0.1混合得到的混合溶液；
(2)试样测定：
取10μL测试样本注入高效液相色谱-串联质谱仪中，检测样本中拉考沙胺和内标拉考沙胺-d6的色谱峰，并据此计算所述血浆样本中的拉考沙胺浓度；
液相色谱测定条件为：色谱柱为AgilentZORBAXXDB-C18，柱规格为2.1×50mm，5μm；色谱柱温为40℃；流动相A为水：1M醋酸铵按照体积比100：0.1混合得到的混合物；流动相B为乙腈：1M醋酸铵按照体积比100：0.1混合得到的混合物；洗液为甲醇：水按照体积比50：50混合得到的混合物；自动进样器温度为15℃；梯度洗脱，流速为0.4mL/min，进样量为10μL，分析时间2.5min；
质谱测定条件为：离子源为电喷雾离子源，喷雾电压为4500V，雾化温度为450℃，喷雾气压力为30Psi，辅助加热气压力为30Psi，气帘气压力为40Psi，碰撞气压力为8Psi，拉考沙胺和内标拉考沙胺-d6的去簇电压均为60eV；拉考沙胺和内标拉考沙胺-d6的碰撞室入口电压均为15eV；拉考沙胺和内标拉考沙胺-d6的碰撞电压均为70eV；拉考沙胺和内标拉考沙胺-d6的碰撞室出口电压均为15eV；正离子方式检测；扫描方式为多重反应监测；用于定量分析的离子反应分别为：m/z251.1→m/z91.1，其为拉考沙胺；和m/z257.2→m/z91.2，其为拉考沙胺-d6。


2.根据权利要求1所述的一种液质联用测定血浆中拉考沙胺浓度的方法，其特征在于：所述步骤(2)中梯度洗脱的程序为：





3.根据权利要求1或...

【专利技术属性】
技术研发人员：范志鸿，
申请(专利权)人：徐州立顺康达医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32