一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法技术

本发明专利技术公开了一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样本，加入一定量的混合有机溶剂进行萃取，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测。本发明专利技术方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为普芦卡必利的血药浓度测定提供依据；本方法的血浆标准曲线线性范围为0.1～10ng/mL，批内和批间精密度RSD均小于±15％，适合于测定血浆中普芦卡必利的浓度。

【技术实现步骤摘要】
一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种药物的测定方法，特别涉及一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法。
技术介绍
普芦卡必利作为新一代的高选择性及高亲和力5-羟色胺4(5-HT4)受体激动剂，普芦卡必利自2009年在欧盟上市以来，从实质上改善了慢性便秘(CC)患者的治疗效果，带来了明显获益。普芦卡必利通过特异性、选择性地刺激肠道5-HT4受体，刺激肠道产生高幅推进性收缩，促进肠道(特别是结肠)的蠕动，在提升肠道动力和重塑排便功能方面有显著作用。大量循证证据已充分证实，普芦卡必利治疗CC有效，可提升肠道动力、重塑排便功能，并已得到众多国内外指南推荐，成为了CC患者新的治疗选择。目前，普芦卡必利已在30个国家和地区上市，用于治疗成年女性患者中通过轻泻剂难以充分缓解的CC症状，在新加坡、澳大利亚等国家同时获批用于男性CC患者。2013年，普芦卡必利在中国上市，为我国的CC患者带来了新的治疗选择。目前，现有关于普芦卡必利测定方法的速度、精度、灵敏度、选择性均有待提高。
技术实现思路
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【技术保护点】
1.一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于：血浆样本经预处理后经高效液相色谱-串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：/n(1)血浆样本预处理：/n血浆以K

【技术特征摘要】
1.一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于：血浆样本经预处理后经高效液相色谱-串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：
(1)血浆样本预处理：
血浆以K2EDTA为抗凝剂，以普芦卡必利-13C-d3为内标；于96深孔板中精密加入100μL的血浆样本，加入5μL体积比为1：1的甲醇水溶液，混匀后加入5μL的0.04ng/μL的内标普芦卡必利-13C-d3溶液，混匀后加入500μL乙腈，涡旋混合1min，于20℃以3000rpm离心10min，取上层清液60μL至另一装有600μL混合有机溶剂的96深孔板中，于20℃以3000rpm离心5min后作为测试样本待检测；其中：混合有机溶剂为乙腈：水：甲酸按照体积比60：40：0.1混合得到的混合溶液；
(2)试样测定：
取10μL测试样本注入高效液相色谱-串联质谱仪中，检测样本中普芦卡必利和内标普芦卡必利-13C-d3的色谱峰，并据此计算所述血浆样本中的普芦卡必利浓度；
液相色谱测定条件为：色谱柱为RestekAllurePFPP，柱规格为2.1×50mm；色谱柱温为40℃；流动相A为水：甲酸按照体积比100：0.1混合得到的混合物；流动相B为乙腈：甲酸按照体积比100：0.1混合得到的混合物；洗液为甲醇：水按照体积比50：50混合得到的混合物；自动进样器温度为15℃；梯度洗脱，流速为0.4mL/min，进样量为10μL，分析时间3.0min；
质谱测定条件为：离子源为电喷雾离子源，喷雾电压为5000V，雾化温度为450℃，喷雾气压力为90Psi，辅助加热气压力为80Psi，气帘气压力为25Psi，碰撞气压力为8Psi，普芦卡必利和内标普芦卡必利-13C-d3的去簇电压均为40eV；普芦卡必利和内标普芦卡必利-13C-d3的碰撞室入口电压均为8eV；普芦卡必利和内标普芦卡必利-13C-d3的碰撞电压均为50eV；普芦卡必利和内标普芦卡必利-13C-d3的碰撞室出口电压均为10eV；正离子方式检测；扫描方式为多重反应监测；用于定量分析的离子反应分别为：m/z368.0→m/z196.0，其为普芦卡必利；和m/z371.9→m/z195.9，其为普芦卡必利-13C-d3。


2.根据权利要求1所述的一种液质联用测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于：所述步骤(2)中梯度洗脱的程序为：





3.根据权利要求1或2所述的一种液质联用测定血...

【专利技术属性】
技术研发人员：范志鸿，
申请(专利权)人：徐州立顺康达医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32