hKDR人源化小鼠模型及其建立方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种hKDR人源化小鼠模型及其建立方法和应用，属于动物模型构建技术领域。该hKDR人源化小鼠模型的建立方法，将人源KDR基因序列插入至小鼠Kdr基因的外显子4中，建立得到hKDR人源化小鼠模型。通过该方法可建立hKDR人源化小鼠模型，利用该人源化小鼠模型进行抗体或药物评价，可更真实地模拟不同抗体或药物的功能。

【技术实现步骤摘要】
hKDR人源化小鼠模型及其建立方法和应用
本专利技术涉及动物模型的构建，特别是涉及一种hKDR人源化小鼠模型及其建立方法和应用。
技术介绍
血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)又称血管通透因子，是一种选择性的内皮细胞有丝分裂原，能特异性地作用于血管内皮细胞，其受体包括VEGFR1(Flt-1)、VEGFR2(Kdr)和VEGFR3。其中，Kdr是一种III型受体络氨酸激酶，能够介导血管和淋巴管的形成，在肿瘤血管生成中起到重要作用。目前，许多实体肿瘤的研究是基于小鼠模型，但随着复杂的生物学进展和伦理技术约束，越来越需要进行人体细胞、组织和器官的体内研究。目前人源化小鼠填补了这些空白，现已成为体内临床前生物医学研究的重要研究工具。人源化小鼠是携带功能性人类基因、细胞、组织和/或器官、免疫系统或微生物的小鼠，用于生物医学研究和临床治疗方案的开发。有些人源化小鼠携带人类细胞，有些则与人类具有某些一致的遗传和生理特性。因为小鼠基因组与人类基因组高度相似，且更易于操作和改变，所以小鼠可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，将人源KDR基因序列插入至小鼠Kdr基因的外显子4中，建立得到hKDR人源化小鼠模型。/n

【技术特征摘要】
1.一种hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，将人源KDR基因序列插入至小鼠Kdr基因的外显子4中，建立得到hKDR人源化小鼠模型。


2.根据权利要求1所述的hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，所述人源KDR基因序列选自：人源KDR基因外显子4至外显子7的蛋白质编码区。


3.根据权利要求2所述的hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，所述人源KDR基因序列的插入序列如SEQIDNO:1所示。


4.根据权利要求1所述的hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，利用CRISPR/Cas9系统将所述人源KDR基因序列插入至小鼠Kdr基因的外显子4中，所述CRISPR/Cas9系统包括Cas9和sgRNA，所述sgRNA的靶向结构域靶向的序列如SEQIDNO:2所示。


5.根据权利要求1-4任一项所述的hKDR人源化小鼠模型的建立方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
1)构建打靶载体：构建得到依次包含5’同源臂、人源KDR基因、终止密码子、WPRE元件、PolyA和3’同源臂的打靶载体；
2)制备sgRNA：根据确定的切割位点设计sgRNA，合成得到作...

【专利技术属性】
技术研发人员：范昌发，曹愿，王佑春，吴勇，刘甦苏，赵皓阳，翟世杰，谷文达，杨远松，孙晓炜，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11