一种3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法技术

本发明专利技术属于农药领域，具体涉及一种3‑吲哚乙基(3’‑甲基‑2’‑酮)戊酰胺(Nematophin)的分离方法，包括：嗜线虫致病杆菌属细菌的发酵液进行柱层析分离，收集含有3‑吲哚乙基(3’‑甲基‑2’‑酮)戊酰胺的组分；含有3‑吲哚乙基(3’‑甲基‑2’‑酮)戊酰胺的组分依次经减压浓缩及溶媒萃取即得；所述的溶媒为石油醚，石油醚与萃取对象的体积比为1:1。该方法分离步骤简单，分离材料易得，为微生物源农药的开发提供了一条新途径。

【技术实现步骤摘要】
一种3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法
本专利技术属于农药领域，具体涉及一种3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺(以下简称Nematophin)的分离方法。
技术介绍
昆虫病原线虫共生菌是研究共生关系的一种模式生物，目前已成为生物制药研究领域的开发热点。昆虫病原线虫共生细菌是一种肠杆科的革兰氏阴性细菌，寄生于昆虫病原线虫肠道内，包括致病杆菌(Xenorhabdus)和发光杆菌(Photorhabdus)属，分别与斯氏线虫(Steinernema)和异小杆线虫(Heterorhabditis)共生。共生的昆虫病原线虫可以直接作为一种生物制剂，主要通过提高植物免疫从而达到杀虫效果，已经成功应用在植物保护领域。除了具有防虫效果外，共生菌的次生代谢产物是抑菌、杀线虫、抗病毒、细胞毒素等化合物的丰富来源。因此，昆虫病原线虫共生菌的次生代谢产物已成为一类新型具有开发潜力和应用前景的新型生物资源。目前，国内外对昆虫病原线虫共生菌的代谢产物的化学成分进行了大量的研究，至今已从共生菌代谢产物中分离得到上百种成分，主要为吲哚类化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，包括：/n致病杆菌属细菌(Xenorhabdus)的发酵液进行柱层析分离，收集含有3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的组分；/n含有3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的组分依次经减压浓缩及溶媒萃取即得；/n所述的溶媒为石油醚，石油醚与萃取对象的体积比为1:1。/n

【技术特征摘要】
1.一种3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，包括：
致病杆菌属细菌(Xenorhabdus)的发酵液进行柱层析分离，收集含有3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的组分；
含有3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的组分依次经减压浓缩及溶媒萃取即得；
所述的溶媒为石油醚，石油醚与萃取对象的体积比为1:1。


2.根据权利要求1所述的3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，含有3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的组分依次经减压浓缩、水复溶及溶媒萃取即得；
所述的溶媒为石油醚，石油醚与水复溶物的体积比为1:1。


3.根据权利要求1或2所述的3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，所述的柱层析分离过程包括：
嗜线虫致病杆菌细菌的发酵液经大孔树脂静态吸附12h，依次用5倍柱体积水、1倍柱体积的体积浓度为50％甲醇、1倍柱体积的体积浓度80％甲醇及3倍柱体积甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液。


4.根据权利要求3所述的3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，所述的大孔树脂选自XAD-11大孔树脂、XAD-12大孔树脂、PorapakS大孔树脂、HPD-600大孔树脂、XAD-9大孔树脂、XAD-10大孔树脂、XAD-7HP大孔树脂、LSA-10大孔树脂、LX-28大孔树脂、AB-8大孔树脂、DA大孔树脂、X-5大孔树脂、D320大孔树脂、D101大孔树脂、CAD-40大孔树脂、GDX-105大孔树脂、D大孔树脂和DM2大孔树脂。


5.根据权利要求1或2所述的3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，溶媒萃取包括：
溶媒与待萃取对象每隔30min混匀一次，反复3～4次后收集石油醚萃液。


6.根据权利要求1或2所述的3-吲哚乙基(3’-甲基-2’-酮)戊酰胺的分离方法，其特征在于，发酵液制备包括：
①种子液制备：菌种于LB培养基中，在28℃、摇床转速180r/min条件下，培养至对数期，用划线法在NBTA平板上室温培养48h，挑取蓝色单菌落于LB培养基中，培养温度28℃，转速180r/min，培养至对数期备用；
②发酵培养：将种子液以10％(V/V)接种于TSB培养基中，于温度28℃、摇床转速180r/min条件下培养3d。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王永红，张淑静，刘启，张璟，闫合，冯俊涛，马志卿，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61