【技术实现步骤摘要】
一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法
本专利技术涉及中药成分鉴定
，具体是一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法。
技术介绍
鹿角盘是鹿科动物马鹿或梅花鹿锯茸后翌年春季脱落的角基，它含有矿物质元素、氨基酸、蛋白质、多肽、多糖、脂类、胆固醇和性激素等多种成分。在传统动物性中药里，鹿角盘药用历史悠久，不但具有温肾阳，强筋骨，行血消肿的功效，从鹿角盘在活组织上自然脱落，不发炎、不化脓、不肿胀的神奇生物学现象再到广泛的民间应用都表明鹿角盘具有良好的抗炎作用。纵观现代医药和学者对鹿角盘的科学研究，对于乳腺炎，至今为止还从未在严格的科学实验中进行过药效实验及抗炎机制的研究，更没有筛选过有效的作用成分，同时现有的针对鹿角盘的药效研究，大多是针对单一组分如蛋白质、多肽进行分析研究，对应的提取方法也是针对依据单体成分的化学性质，选择适合的溶剂、条件进行提取，而单体成分虽然对认识和解析药物中化学成分和药理作用极其有利，但往往忽略了药物成分间的关联性，一定程度上不能更好的体现动物性中药成分的综合作用，同时鹿角盘作为传统动物性中...
【技术保护点】
1.一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：/nS1设置梯度浓度的鹿角盘提取物；/nS2将得到的梯度浓度的鹿角盘提取物进行小鼠动物的免疫实验，提取实验过程中不同阶段的小鼠的乳腺组织，并分离出其中的乳腺上皮细胞，对得到的乳腺上皮细胞进行酶联免疫-实时荧光检测，确定并筛选炎症细胞因子的变化水平；/nS3针对筛选出的炎症细胞因子的变化水平，利用指纹图谱，同时进行灰色关联分析，确定并筛选出效果峰值，收集效果峰值对应的处理液；/nS4将得到的效果峰值对应得到处理液分别进行单组分峰的验证，确定效果峰值的参与量以及相应炎症细胞因子的变化水平，得到验证后的效果峰...
【技术特征摘要】
1.一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1设置梯度浓度的鹿角盘提取物；
S2将得到的梯度浓度的鹿角盘提取物进行小鼠动物的免疫实验，提取实验过程中不同阶段的小鼠的乳腺组织，并分离出其中的乳腺上皮细胞，对得到的乳腺上皮细胞进行酶联免疫-实时荧光检测，确定并筛选炎症细胞因子的变化水平；
S3针对筛选出的炎症细胞因子的变化水平，利用指纹图谱，同时进行灰色关联分析，确定并筛选出效果峰值，收集效果峰值对应的处理液；
S4将得到的效果峰值对应得到处理液分别进行单组分峰的验证，确定效果峰值的参与量以及相应炎症细胞因子的变化水平，得到验证后的效果峰值的处理液，即为所述的有效组分的效果峰值的处理液；
S5针对验证后的效果峰值的处理液，利用液相色谱-质谱联用仪非靶向代谢组学，确定有效组分的化学成分，即为完成所述的有效组分的鉴定。
2.根据权利要求1所述的一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法，其特征在于：所述的酶联免疫—实时荧光检测具体步骤为：
(1)先将提取的乳腺组织和乳腺上皮细胞分别进行酶联免疫吸附剂测定，确定炎症细胞因子的含量变化；
(2)再针对炎症细胞因子的含量变化，通过实时荧光定量PCR检测实验，得到小鼠的乳腺上皮细胞的炎症细胞因子的表达量变化，同时针对小鼠的乳腺上皮细胞进行免疫印迹分析，确定关联性炎症细胞因子的变化水平。
3.根据权利要求1所述的一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法，其特征在于：
所述的鹿角盘提取物通过以下步骤制备而成：
Ⅰ选取不同产地以及生长不同时间的鹿角盘，将选取的鹿角盘经过预处理后，得到鹿角盘的提取物；
Ⅱ将得到的鹿角盘的提取物分多份，经过不同量的去离子水稀释，得到梯度浓度的鹿角盘提取物。
4.根据权利要求3所述的一种鹿角盘治疗乳腺炎的有效组分的鉴定方法，其特征在于：所述的预处理为，
a.将选取的鹿角盘经过研磨粉碎后，得到鹿角盘粉末；
b.将得到的鹿角盘粉末至于超纯水中，边搅拌边梯度加热至沸腾，沸腾2-6h后，趁热分梯度过滤，得到鹿角盘的初步水提物以及鹿角盘的沉淀物；
c.将得到的沉淀物干燥后打...
【专利技术属性】
技术研发人员：关晴，李春义，姚梦杰，
申请(专利权)人：长春科技学院，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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