基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种基于重组单克隆抗体制备的IL‑6免疫比浊法检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2。将制备得到的两种抗IL‑6抗体胶乳微球母液作为本试剂盒R2的一种成分，并在R1按一定比例添加PEG6000，试剂R1由缓冲液、表面活性剂、稳定剂及防腐剂构成，试剂R2由缓冲液、表面活性剂、稳定剂、防腐剂及抗体构成。还公开了一种基于重组单克隆抗体制备的IL‑6免疫比浊法检测试剂盒的制备方法。与同类胶乳增强免疫透射比浊法测定IL‑6的试剂盒相比，本发明专利技术试剂盒采用两株抗人IL‑6的单克隆抗体联用的方式，能够分别识别两个抗原表位，较单一使用单克隆抗体试剂盒有更高的灵敏度，较多克隆抗体试剂盒有更好的特异性。

【技术实现步骤摘要】
基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及基因工程
及免疫学测定分析领域，具体涉及一种基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒(AnIL-6immunoturbidimetricassaykitbasedonrecombinantmonoclonalantibody)及其制备方法。
技术介绍
白细胞介素-6，简称白介素6(IL-6)，活化的T细胞和成纤维细胞产生的淋巴因子。能使B细胞前体成为产生抗体的细胞；和集落刺激因子协同，能促进原始骨髓源细胞的生长和分化，增强自然杀伤细胞的裂解功能。IL-6可调节多种细胞的生长与分化，具有调节免疫应答、急性期反白细胞介素-6。是一种多效性细胞因子，能调节多种细胞功能，包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。IL-6与多种肿瘤发生、发展关系密切，它通过干预细胞的黏附性和活动力、血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖,从而影响肿瘤的进展。它还能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等并在机体的抗感染免本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2：/n所述试剂R1包括以下组分：/n

【技术特征摘要】
1.一种基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2：
所述试剂R1包括以下组分：



调节pH值至7.50，用纯化水定容；
所述试剂R2包括以下组分：



调节pH值至7.80，用纯化水定容。


2.根据权利要求1所述的基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，还包括校准液，所述校准液包括以下组分：



调节pH值至7.00，用纯化水定容。


3.根据权利要求1或2所述的基于重组单克隆抗体制备的IL-6免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述抗IL-6胶乳微球母液的制备方法包括以下步骤：
(1)清洗：取300nm粒径的胶乳微球至离心管中，加入10倍体积的20—50mMMES活化缓冲液(pH5.0—6.0)，振荡混匀，20000r/min离心30min，得到胶乳微球液；
(2)重悬：向胶乳微球液中加入同样体积的20—50mMMES活化缓冲液(pH5.0—6.0)，用Tip吸头吹打混匀，转移至15ml离心管中，超声混匀，超声参数为：功率60—80W，工作1s间歇1s，总时间2—3min，超声3个循环，得到胶乳微球悬液；
(3)活化：按照微球/EDC等于1mg/(0.1—0.01)mg的比例称取EDC，放入离心管中，取纯水溶解，添加溶解后的EDC至胶乳微球悬液中，振荡30s，放入37℃水浴中振荡25min，然后转移至50ml离心管中，20000r/min离心30min，加入同样体积的20—50mMMES结合缓冲液(pH5.0—6.0)，重悬微球备用，步骤同(2)，得到胶乳微球重悬液；
(4)结合：取两株抗IL-6单克隆抗体，分别记做抗体IL-6-001和抗体IL-6-0...

【专利技术属性】
技术研发人员：芮双印，符修乐，
申请(专利权)人：安徽大千生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34