检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种检测Prader‑Willi综合征/Angelman综合征的qMS‑PCR试剂盒。该试剂盒包括用于检测SNRPN启动子区域甲基化的引物对和TaqMan‑MGB探针、用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的引物对和TaqMan‑MGB探针；引物对中的上游引物5’端连接有能够与PCR目的片段形成茎环结构的自身封闭序列。5’端设置独特的自身互补序列的甲基化引物与非特异性结合至非甲基化序列模板上时，该序列能够与模板上的非甲基化序列完全结合并自延伸，进而阻断非特异性扩增，大大提升甲基化转化序列的扩增效率，产生的taqman探针水解信号Ct值更能准确判断SNRPN的甲基化状态。

【技术实现步骤摘要】
检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒
本专利技术属于医学检测领域，特别涉及一种检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒。
技术介绍
Prader-Willi综合征(Prader-Willisyndrome,PWS)和Angelman综合征(Angelmansyndrome,AS)是两种临床上明显不同的神经遗传性疾病。PWS(MIM176270)的特点为：胎动减少、肥胖、婴儿期肌张力减退、智力障碍、身材短小,促性腺激素分泌不足的性腺机能减退和手足异常。AS(MIM105830)的特点是严重运动、智力障碍、共济失调、肌张力低下、癫痫、语言障碍和以巨大下颌及张口吐舌为特征的特殊面容。PWS和AS均为染色体15q11-13区域印记基因功能缺陷导致,其发病率约为1/10000～1/30000，是目前发病率最高的基因印记疾病。PWS是症状性病态肥胖的重要病因之一，早期诊断和合理干预对改善患儿生活质量、预防严重并发症至关重要。PWS/AS发病有多种分子缺陷类别，其中包本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：包括用于检测SNRPN启动子区域甲基化的引物对、用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的引物对、用于检测SNRPN启动子区域甲基化的TaqMan-MGB探针和用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的TaqMan-MGB探针；其中，用于检测SNRPN启动子区域甲基化的引物对中的上游引物的5’端连接有能够与PCR目的片段形成茎环结构的5’自身封闭序列，用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的引物对中的上游引物的5’端连接有能够与PCR目的片段形成茎环结构的5’自身封闭序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：包括用于检测SNRPN启动子区域甲基化的引物对、用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的引物对、用于检测SNRPN启动子区域甲基化的TaqMan-MGB探针和用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的TaqMan-MGB探针；其中，用于检测SNRPN启动子区域甲基化的引物对中的上游引物的5’端连接有能够与PCR目的片段形成茎环结构的5’自身封闭序列，用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的引物对中的上游引物的5’端连接有能够与PCR目的片段形成茎环结构的5’自身封闭序列。


2.根据权利要求1所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：还包括TaqManPCR试剂。


3.根据权利要求1或2所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：所述的5’自身封闭序列的设计是依据与其互补的片段含有尽可能多的甲基化位点。


4.根据权利要求3所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：所述的5’自身封闭序列的长度为10～30bp；进一步为15～25bp；进一步为15～20bp。


5.根据权利要求1或2所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：所述的用于检测SNRPN启动子区域甲基化的TaqMan-MGB探针上修饰的荧光标记和所述的用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的TaqMan-MGB探针上修饰的荧光标记不同。


6.根据权利要求5所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，其特征在于：
所述的用于检测SNRPN启动子区域甲基化的TaqMan-MGB探针上修饰的荧光标记为VIC；
所述的用于检测SNRPN启动子区域非甲基化的TaqMan-MGB探针上修饰的荧光标记为FAM。


7.根据权利要求1或2所述的检测Prader-Willi综合征/Angelman综合征的qMS-PCR试剂盒，...

【专利技术属性】
技术研发人员：马健，张亮，周香城，雷雯，李泌，黄淑君，
申请(专利权)人：广东省妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：广东;44