靶向GPC3的CAR-NK细胞及其制备方法和应用技术

一种靶向GPC3的CAR‑NK细胞，其嵌合抗原受体结构为：GC33‑NKP44TM‑CD3ζ‑CD244‑DNAM1‑DAP10。所述靶向GPC3的CAR‑NK细胞的制备方法：以GC33作为scFv序列；选取CD3ζ、CD244、DNAM1、DAP10、DAP12的胞内段活化结构域串联，作为CAR的胞内段结构域；将NKp44跨膜区与胞浆区含ITAM基序且带有负电荷的DAP12结合，进而介导下游信号转导；去除胞内段结构域DAP12；将CD3ζ与NKp44跨膜区直接连接，以NK‑92细胞系为载体建系。该CAR‑NK细胞中CAR结构更加简单，效果更优，能够在预防或治疗肝癌药物中进行应用，同时也保证了临床使用的安全。

【技术实现步骤摘要】
靶向GPC3的CAR-NK细胞及其制备方法和应用
本专利技术涉及抗体药物的
，更具体地说涉及一种靶向GPC3的CAR-NK细胞及其制备方法和应用。
技术介绍
肿瘤是严重威胁人类健康的恶性疾病，而肝癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率呈逐年上升趋势，严重威胁着人类的健康，有研究显示，肝癌的发病率在恶性肿瘤中排名世界第5位，死亡率则位居第3位。在中国，由于存在较为严重的乙型肝炎病毒（HBV）感染等致癌风险因素，肝癌的发病率和死亡率态势尤为严峻，每年有超过10万人死于肝癌及其并发症。尽管医学工作者对肝癌进行了较为深入的研究，并开展了大量的临床实践活动，先后提出了诸如肝移植、肿瘤切除及非切除性局部疗法如肝动脉化疗栓塞等治疗方法和手段，但是仍然难以有效攻克该疾病，尤其是晚期患者难以进行手术治疗，死亡率更高。目前的常规疗法，如手术切除，化学药物疗法，放射疗法等副作用大，严重影响患者的生活质量。因此，临床上迫切需要开发新型的肿瘤治疗手段，以便满足患者的需求。嵌合抗原受体（CAR）是基因工程改造的具有特异靶向性的生物大分子，可以在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向GPC3的CAR-NK细胞，其嵌合抗原受体结构为：GC33-NKP44

【技术特征摘要】
1.一种靶向GPC3的CAR-NK细胞，其嵌合抗原受体结构为：GC33-NKP44TM-CD3ζ-CD244-DNAM1-DAP10。


2.一种权利要求1所述靶向GPC3的CAR-NK细胞的制备方法：以GC33作为scFv序列；选取CD3ζ、CD244、DNAM1、DAP10、DAP12的胞内段活化结构域串联，作为CAR的胞内段结构域；将NKp44跨膜区与胞浆区含ITAM基序且带有负电荷的DA...

【专利技术属性】
技术研发人员：王俊捷，贡波，
申请(专利权)人：梅奥浙江细胞工程有限责任公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33