一种提高透明质酸产量的方法及菌株技术

本发明专利技术涉及一种提高透明质酸产量的方法与菌株，将glnA基因插入pSET4S::repA::Ppgk(pLH275)载体的多克隆位点处，构建成功pSET4S::repA::Ppgk::GlnA(pLH860)；转入兽疫链球菌ATCC 39920，获得的菌株glnA/OP的HA产量明显高于初始菌株。以菌株glnA/OP进行透明质酸的发酵罐发酵生产，10h时其透明质酸的产量比野生型提高了70％，发酵进行到16h时比野生型提高了21％，最终发酵24h时，工程菌glnA/OP HA产量为3.55g/L，较野生型提高了7.2％。为提升透明质酸产量提供了新方法，并获得一株高产透明质酸的菌株。

【技术实现步骤摘要】
一种提高透明质酸产量的方法及菌株
本专利技术属于基因工程
，尤其是一种用于提高量透明质酸产量的方法及菌株。
技术介绍
透明质酸(hyaluronicacid，HA)因具有的保湿性、生物相容性以及非免疫性，在化妆品、临床医学和保健品等方面极具商业价值。在化妆品行业，HA作为一种性质优良的化妆品添加剂，越来越受到国内外化妆品行业的重视，在化妆品中的应用前景非常可观。在临床医学方面，HA广泛分布于软结缔组织细胞的外基质中，因其具有良好的生物降解性和生物相容性，在临床医学中已被广泛应用。在保健食品中，服用含有HA的保健品，可以增加人体中HA合成的前体物，提高人体中HA的含量，保护关节，增加皮肤弹性，抗衰老。目前，微生物发酵法是HA生产的主要方法之一。但是当前微生物发酵合成HA的生产依然存在很多问题，例如HA合成的限速步骤尚不清楚，提高HA产量的代谢通路改造目标较少；HA的产量达到4-5g/L后，培养基的粘度高达400-500mPas，会严重影响溶氧和传质，从而限制HA的产量；HA合成会与菌体生长竞争前体物质，UDP-N-乙酰葡萄糖胺和UD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒，其特征在于：所述遗传重组质粒是将glnA基因插入基因表达载体pSET4S::repA::Ppgk即pLH275的多克隆位点处，构建成功pSET4S::repA::Ppgk::GlnA即pLH860；/n其中，所述基因表达载体pSET4S::repA::Ppgk的核苷酸序列为SEQ ID NO.2。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒，其特征在于：所述遗传重组质粒是将glnA基因插入基因表达载体pSET4S::repA::Ppgk即pLH275的多克隆位点处，构建成功pSET4S::repA::Ppgk::GlnA即pLH860；
其中，所述基因表达载体pSET4S::repA::Ppgk的核苷酸序列为SEQIDNO.2。


2.根据权利要求1所述的用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒，其特征在于：所述glnA基因的长度为1382bp，其核苷酸序列为SEQIDNO.1，该glnA基因始于起始密码子ATG上游15bp，结束于终止密码子TAA下游20bp。


3.根据权利要求1或2所述的用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒，其特征在于：所述glnA基因来源于兽疫链球菌(Streptococcuszooepidemicus)ATCC39920基因组。


4.一种含有如权利要求1至3任一项所述的用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒的工程菌。


5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的构建方法为：
将用于提高透明质酸产量的遗传重组质粒转...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘浩，高伟霞，张晓亮，张广通，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12