一种TIM3抗体药物组合物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种TIM3抗体药物组合物及其用途。具体而言，所述药物组合物包含在缓冲液中的TIM3抗体或其抗原结合片段。除此之外，该药物组合物还包含糖和非离子型表面活性剂。本发明专利技术中的药物组合物具备良好的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种TIM3抗体药物组合物及其用途
本公开属于药物制剂领域，具体涉及一种包含TIM3抗体或其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗癌药物的用途。
技术介绍
这里的陈述仅提供与本专利技术有关的背景信息，而不必然地构成现有技术。T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tcellimmunoglobulinandmucin-domain-containingmolecule3，TIM-3)，又称甲型肝炎病毒细胞受体2(hepatitisAviruscellularreceptor2，HAVCR-2)，是一种I型膜表面蛋白分子，属TIM家族成员。人类TIM-3分子由301个氨基酸组成，包含信号肽、Ig可变区(IgV区)、富含丝氨酸/苏氨酸的黏蛋白区、跨膜区和胞质区，人鼠之间的同源性63％。TIM-3选择性地表达在分泌IFN-γ的T辅助细胞(Th1和Th17)、T调控细胞(Treg)、树突状细胞(DCs)、单核细胞、肥大细胞、NK细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TILs)上(see,e.g.,Claytonetal.,J.Immunol.,192(2):782-791(2014)；Jonesetal.,J.Exp.Med.,205:2763-2779(2008))。目前已知的TIM-3的受体包括磷脂酰丝氨酸半乳糖凝集素9(Galectin-9，Gal-9)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和癌胚抗原细胞粘附分子1(CEACAM1)。TIM-3可从多方面调节免疫系统的功能，在Th1细胞表面与配体Gal-9结合可下调Th1细胞应答，并能诱导Th1细胞凋亡，在自身和异体免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、哮喘)以及免疫耐受中起着重要作用。在单核-巨噬细胞表达的TIM-3与磷脂酰丝氨酸相互作用，促进凋亡细胞的吞噬；在肿瘤浸润DC中，TIM-3则与HMGB1配体结合，抑制核酸正确转运，从而抑制核酸免疫反应，参与免疫逃逸。TIM-3不仅表达于免疫细胞，在卵巢癌、脑膜瘤、黑色素瘤等肿瘤细胞中也有过表达，并直接促进肿瘤的增长。下调TIM-3的表达可以明显抑制Hela细胞的侵袭和转移。TIM-3的过表达均与肺癌、胃癌、前列腺癌和宫颈癌的不良预后密切相关。在血液系统肿瘤中，TIM-3过表达于急性髓系白血病的白血病干细胞、MDS患者的造血干细胞上，且TIM-3+造血干细胞具有低分化、低凋亡及高增殖的恶性生物学特征。因此，通过抑制TIM-3的活性(如TIM-3抗体)以提高固有免疫系统的功能，有望成为治疗肿瘤的新方法(see,e.g.,Ngioweta1.,CancerRes.,71(21):1-5(2011)；Guoetal.,JournαlofTranslationαlMedicine,11:215(2013)；andNgiowetal.,CancerRes.,71(21):6567-6571(2011))。抗体药物的稳定性是影响抗体成药性的关键因素之一，其中天冬酰胺(Asn)和谷氨酰胺(Gln)的非酶促脱酰胺作用，能够引起抗体的不稳定和异质性，是抗体分子常见化学降解途径之一。已有文献报道，多个IgGl亚型抗体因为其CDR区氨基酸的脱酰胺和异构化作用，而失去了其生物学活性。Huang等人发现，位于IgG1单克隆抗体重链可变区2(CDR2)的Asn55的脱酰胺作用，明显降低了其结合活性。因此，在抗体的研发过程中应尽量避免或者突变相应氨基酸以降低抗体脱酰胺情况的发生，以增加抗体的稳定性和生物利用率。尽管目前已有专利报道了有关TIM-3的抗体，如WO2011159877、WO2013006490、WO2015117002、WO2016144803、WO2016161270、US20150218274，但就国内外而言，仅有两个TIM-3抗体处于临床研究阶段，其他抗体药物仍处于发现和研究阶段，尚没有TIM-3抗体进入临床应用。因此，有必要进一步开发具有更高活性、高亲和力和高稳定性的TIM-3的抗体，以进行TIM-3相关疾病的治疗研究和应用。本公开提供一种更利于生产和给药，性能稳定的包含TIM3抗体或其抗原结合片段的药物组合物。
技术实现思路
本公开提供一种药物组合物，其包含TIM3抗体或其抗原结合片段，以及缓冲剂，所述缓冲剂选自醋酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、枸橼酸盐缓冲剂，优选醋酸盐缓冲剂或组氨酸盐缓冲液。在一些实施方案中，药物组合物中所述的醋酸盐缓冲剂选自醋酸-醋酸钠缓冲剂，所述的组氨酸盐缓冲剂选自组氨酸-醋酸缓冲剂或组氨酸-盐酸缓冲剂；所述的琥珀酸盐缓冲剂选自琥珀酸-琥珀酸钠缓冲剂；所述磷酸盐缓冲剂选自磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲剂；所述枸橼酸盐缓冲剂选自枸橼酸-枸橼酸钠；优选组氨酸-盐酸、醋酸-醋酸钠或组氨酸-醋酸缓冲剂，最优选组氨酸-醋酸缓冲剂。在一些实施方案中，药物组合物中所述缓冲剂浓度为大约5mM至30mM，优选为大约10mM-30mM，优选为大约5mM至20mM，优选大约10mM至20mM；非限制性实施例包括10mM、12mM、14mM、16mM、18mM、20mM、30mM，最优选为大约10mM。在一些实施方案中，药物组合物中所述TIM3抗体或其抗原结合片段浓度为大约1mg/ml至100mg/ml，优选为大约40mg/ml至60mg/ml，优选为50mg/ml至60mg/ml；非限制性实施例包1mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、41mg/ml、42mg/ml、43mg/ml、44mg/ml、45mg/ml、46mg/ml、47mg/ml、48mg/ml、49mg/ml、50mg/ml、51mg/ml、52mg/ml、53mg/ml、54mg/ml、55mg/ml、56mg/ml、57mg/ml、58mg/ml、59mg/ml、60mg/m、70mg/m、80mg/m、90mg/m、100mg/ml，最优选为50mg/ml。在一些实施方案中，药物组合物中所述缓冲剂的pH值约为5.0到6.5，优选为大约5.0至6.0，优选为大约5.2至5.8，或优选为大约5.5至6.0，最优选5.5，非限制的实施例包括约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.5。进一步的，在一些实施方案中，前述药物组合物还包含糖。本公开的“糖”包含常规组合物(CH2O)n及其衍生物，包括单糖，二糖，三糖，多糖，糖醇，还原性糖，非还原性糖等等。可选自葡萄糖，蔗糖，海藻糖，乳糖，果糖，麦芽糖，右旋糖苷，甘油，赤藻糖醇，丙三醇，阿拉伯糖醇，木糖醇，山梨糖醇，甘露醇，密里二糖，松三糖，蜜三糖，甘露三糖，水苏糖，麦芽糖，乳果糖，麦芽酮糖，山梨醇，麦芽糖醇，乳糖醇，异-麦芽酮糖等等。优选的糖是非还原性二糖，更优选为海藻糖或蔗糖，最优选为蔗糖。在一些实施方案中，前述药物组合物中糖的浓度为约50mg/ml至约100mg/ml，优选为约60mg/ml至约90mg/ml，优选为约70mg/ml至约90mg/ml，优选为70m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，其包含TIM3抗体或其抗原结合片段，以及缓冲剂，所述缓冲剂选自醋酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、枸橼酸盐缓冲剂，所述缓冲剂优选是醋酸盐缓冲剂或组氨酸盐缓冲剂，所述缓冲剂的pH为5.0-6.5，优选为5.5-6.0，最优选为大约5.5。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180828 CN 2018109871383一种药物组合物，其包含TIM3抗体或其抗原结合片段，以及缓冲剂，所述缓冲剂选自醋酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、枸橼酸盐缓冲剂，所述缓冲剂优选是醋酸盐缓冲剂或组氨酸盐缓冲剂，所述缓冲剂的pH为5.0-6.5，优选为5.5-6.0，最优选为大约5.5。


根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述的醋酸盐缓冲剂选自醋酸-醋酸钠缓冲剂；所述的组氨酸盐缓冲剂选自组氨酸-醋酸缓冲剂或组氨酸-盐酸缓冲剂；所述的琥珀酸盐缓冲剂选自琥珀酸-琥珀酸钠缓冲剂；所述磷酸盐缓冲剂选自磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲剂；所述缓冲剂优选为组氨酸-盐酸、醋酸-醋酸钠或组氨酸-醋酸缓冲剂，最优选为组氨酸-醋酸缓冲剂。


根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述缓冲液浓度为5mM至30mM，优选为10mM至20mM，最优选为大约10mM。


根据权利要求1至3任一所述的药物组合物，其中所述TIM3抗体或其抗原结合片段浓度为1mg/ml至100mg/ml，优选为40mg/ml至60mg/ml，最优选为约50mg/ml。


根据权利要求1至4任一所述的药物组合物，其还包括糖，所述糖优选为海藻糖或蔗糖，最优选为蔗糖。


根据权利要求5所述的药物组合物，其中所述糖浓度为50mg/ml至100mg/ml，选为70mg/ml至90mg/ml，最优选为约80mg/ml。


根据权利要求1至6任一所述的药物组合物，其还包括表面活性剂，所述表面活性剂优选为聚山梨醇酯，更优选为聚山梨醇酯80。


根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述的表面活性剂的浓度为0.2mg/ml至0.8mg/ml，优选为0.4mg/ml至0.6mg/ml，最优选为约0.4mg/ml。


根据权利要求1至8任一所述的药物组合物，其包含：
(a)大约1mg/ml-100mg/ml的TIM3抗体或其抗原结合片段，
(b)大约5mM-30mM的醋酸盐缓冲剂或组氨酸盐缓冲剂，
(c)大约50mg/ml-100mg/ml的糖，和
(d)大约0.2mg/ml-0.8mg/ml的表面活性剂；
所述药物组合物优选包含：(a)40mg/ml-60mg/ml的TIM3抗体或其抗原结合片段，(b)10mM-30mM的组氨酸-醋酸缓冲剂或醋酸-醋酸钠缓冲剂，pH约为5.0至6.0，(c)70mg/ml-90mg/ml的蔗糖或海藻糖，和(d)0.4mg/ml-0.6mg/ml的聚山梨醇酯；
所述药物组合物最优选包含：(a)约50mg/ml的TIM3抗体或其抗原结合片段，(b)约10mM的组氨酸-醋酸缓冲剂或醋酸-醋酸钠缓冲剂，pH约为5.5，(c)约80mg/ml的蔗糖，和(d)约0.4mg/ml的聚山梨醇酯80。


根据权利要求1至9任一项所述的药物组合物，其中所述的TIM-3抗体或其抗原结合片段选自下面(i)或(ii)所述的任一种单克隆抗体或其抗原结合片段：
(i)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、43和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列或与其具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，和/或分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列或与其具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
其中所述的SEQIDNO:43如DIIPX
1X
2X
3GSKYNQKFKD序列所示，其中，X
1选自N、L、V、M或E，X
2选自N、E、M、H、K、L、A或V，X
3选自G或A；或

(ii)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：14、15和16所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列或与其具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，和/或分别如SEQIDNO：17、18和19所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列或与其具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。


根据权利要求10所述的药物组合物，其中所述的TIM-3抗体或其抗原结合片段选自下面(a)至(m)中的任一种单克隆抗体或其抗原结合片段：
(a)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、9和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(b)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、62和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(c)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、63和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(d)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、64和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(e)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、65和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(f)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、66和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(g)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、67和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(h)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如SEQIDNO：8、68和10所示的抗体重链可变区HCDR1-3区序列，和分别如SEQIDNO：11、12和13所示的抗体轻链可变区LCDR1-3区序列；
(i)单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含分别如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：田晨敏，李皓，刘洵，曹卓晓，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，上海恒瑞医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32