一株非酿酒酵母hsmt-1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株非酿酒酵母hsmt‑1及其应用，属于微生物技术领域，采用了水蜜桃本身自带的酵母菌株，随着水蜜桃的生长自然产生，对水蜜桃具有适应性和协调性，能够充分利用水蜜桃自带的物质，使用此种酵母不仅能够消耗水蜜桃果汁中的糖类物质产生酒精，而且能够分解水蜜桃中的大分子物质产生更多具有香气的小分子物质，与市场上的水蜜桃果酒相比在香气上更加吸引人，当今果酒的消费市场更偏向于低酒精度香味独特的果酒，由该酵母菌发酵所得的水蜜桃果酒具有丰富的酯类物质，香气浓郁，口感酸甜，具有典型的水蜜桃风味。

【技术实现步骤摘要】
一株非酿酒酵母hsmt-1及其应用
本专利技术属于生物
，具体为一株非酿酒酵母hsmt-1及其应用。
技术介绍
在果酒酿造过程中，酵母菌起到了非常重要的作用。具体的酵母菌的质量直接影响到果酒品质，它们对果酒的质量和风味起着决定性的作用，因此选择一种适合水蜜桃酒酿造的品种是非常重要的，酿酒酵母的性能直接关系到发酵工艺的类型和发酵条件，所以找到一株适合水蜜桃酿造的酵母也是至关重要的，但是一般果酒酿造借用的都是葡萄酒酵母菌种，在产香方面比较单一，主要适合葡萄酒的酿造，而筛出的野生酿酒酵母发酵性能比改良过的商业酵母差，且不稳定，所以筛选一株产香能力好的酵母并且有着一定的产酒精的能力，是解决水蜜桃酒香气单薄问题的关键，通过检测水蜜桃酒中有效成分的含量，也为水蜜桃酒品质的好坏提供一定的科学依据。糖类是参加发酵过程中的主要成分，酵母菌的作用贯穿了果酒酿造的整个过程，在发酵过程中产生了大量的香味物质和酒精，这直接影响到果酒的品质。因此为了提高水蜜桃果酒的口感，需要对酵母菌株的发酵性能和产香性能进行筛选与研究，提升水蜜桃果酒的品质。但是，目前的酿酒用酵母菌主要针对葡萄酒，对于水蜜桃没有相适应的酵母菌用于果酒的发酵过程。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株非酿酒酵母hsmt-1，及其在水蜜桃果酒发酵中的应用并且该酵母菌发酵产生的独特的香气。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一株酿酒用的酵母；其中该非酿酒酵母hsmt-1为毕赤酵母属，已于2020年11月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNO.21168。上述非酿酒酵母hsmt-1用于水蜜桃果酒的发酵。上述非酿酒酵母hsmt-1在水蜜桃发酵过程中产生了独特香味。本专利技术筛选出的非酿酒酵母的方法如下所示，包括以下步骤：(1)取健康新鲜的水蜜桃，略微除去污渍泥土等杂质。将水蜜桃带皮灭菌刀具剁碎，去掉茎根和果核，称取100g分别装入500mL无菌三角瓶中，用透气封口膜封住瓶口，放入28℃的生化培养箱中2-3d。待有气泡产生后，取出发酵液用无菌水稀释，得到稀释液。(2)将所述稀释液均与涂布在YPD培养基上，在28℃的恒温培养箱中生长1-2d，选取出具有典型酵母特征的单菌落，接种到液体培养基中培养。根据菌液的浓度对菌液做出稀释，将菌液划线接种到WL培养基上对酵母做进一步纯化(根据分离效果纯化2-3次)，观察酵母的生长状态。(3)将分离的酵母菌进行发酵速度分析、产气性能分析、产酒精能力分析、香气分析和碳源利用分析，筛选出所述酿酒用的酵母菌株。步骤(1)中，所述的水蜜桃成熟多汁，每颗果实都经过认真筛选，清洗。在果实破碎过程中都要超净工作台中进行，避免实验结果受到杂菌的污染。所述步骤(1)中，果实与无菌水的质量比是1:1，保证部分果实表面暴露在空气中。所述步骤(2)中，稀释过程中酵母在固体培养基中生长不宜密集，避免生长过程中形成干扰，影响观察。发酵和培养温度均为28℃，通风的条件下进行。所述步骤(3)中，发酵速度分析通过全自动生长曲线分析仪测定，将水蜜桃果汁过滤，灭菌，得到澄清透明的清汁。将清汁稀释到一定的浓度，之后将酵母接种到清汁中，在28℃的条件下生长24h，测定出酵母的生长曲线。所述步骤(3)中，香气分析如下所示：(Ⅰ)样品预处理：取10mL水蜜桃果酒发酵液装入顶空瓶中，完全密封，以顶空的方式萃取果酒中的挥发性成分。加热条件为60℃，加热时长30min。(Ⅱ)气相色谱条件：HP-5MS(30m×0.25μm×0.25mm)色谱柱，载气为高纯氦气，流速为1mL/min，进样口温度为250℃，不分流进样。程序升温开始的柱箱温度为40℃保持2min，先以5℃/min升温至200℃保持5min，再以8℃/min的速率升至300℃保持5min，检测器温度250℃。(Ⅲ)质谱条件：电离子源(EI)，离子源温度230℃，接口温度180℃，电子能量70eV，四级杆温度150℃，倍增管电压1.2kV，扫描质量范围m/z30-500。所述步骤(3)中，碳源分析包括：将分离的酵母菌接入不同的碳源培养基中，在28℃培育24h后测定生长曲线，确定能够利用的碳源。上述碳源培养基包括蔗糖、葡萄糖和乳糖。本专利技术的有益效果为：酯香味丰富并且能够产生一定量的乙醇含量，吸引人的味觉。本专利技术通过对酵母菌的形态、生理特征等方面进行研究，筛选出一株产酒精能力强，同时能够产生酯类香气为主酵母菌株。由该酵母菌发酵所得的水蜜桃果酒品质优良，产酒精能力较高，酒精含量可以达到6-10％，酸甜适中pH值在3.5-4之间，香气馥郁，酯香味物质占所有挥发性物质80％以上，具有典型的水蜜桃风味。水蜜桃果酒为水蜜桃产业提供一种加工方法延长水蜜桃的供应周期，增加其经济效益。水蜜桃果酒中含有丰富的碳水化合物，抗坏血酸，蛋白质等营养成分，并且铁含量较高，主要具有预防贫血，补气养血，养阴生津的作用，适合饮用。附图说明图1为该非酿酒酵母hsmt-1单菌落形态图。图2为葡糖糖、蔗糖和乳糖的生长曲线对比。图3为不同酵母菌株产生的香气丰度。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施案例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其他实施方式，都属于本专利技术所保护的范围。本专利技术实施案例涉及一株酿酒用的酵母，保藏号为CGMCCNO.21168。该酵母被命名为hsmt-1，是从江苏省无锡市阳山镇的水蜜桃表面分离得到的。该菌种已于2020年11月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏。本专利技术实施案例还涉及该酵母菌的筛选方法，包括以下步骤：(1)取健康新鲜的水蜜桃，略微除去污渍泥土等杂质。将水蜜桃带皮灭菌刀具剁碎，去掉茎根和果核，称取100g分别装入500mL无菌三角瓶中，用透气封口膜封住瓶口，放入28℃的生化培养箱中2-3d。待有气泡产生后，取出发酵液用无菌水稀释，得到稀释液。本专利技术的一个实施例中，每一个水蜜桃都是认真挑选清洗的，水蜜桃必须是成熟多汁富含水分和糖分。破碎和分装过程中都要在超净工作台中进行，避免在自然发酵过程中受到杂菌的污染。本专利技术选用的使江苏无锡阳山镇的水蜜桃。在本专利技术的一个实施例中，破碎果实与无菌水的质量比为1:1，保证有部分果实暴露在空气中。稀释的作用是使发酵液中的酵母菌含量适中，有利于下一步的初步筛选。将所述稀释液均与涂布在YPD培养基上，在28℃的恒温培养箱中生长1-2d，选取出具有典型酵母特征的单菌落，接种到液体培养基中培养。根据菌液的浓度对菌液做出稀释，将菌液划线接种到WL培养基上对酵母做进一步纯化(根据分离效果纯化2-3次)，观察酵母的生长状态。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株非酿酒酵母hsmt-1，其特征在于，该非酿酒酵母hsmt-1为毕赤酵母属，已于2020年11月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNO.21168。/n

【技术特征摘要】
1.一株非酿酒酵母hsmt-1，其特征在于，该非酿酒酵母hsmt-1为毕赤酵母属，已于2020年11月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNO.21168。


2.如权利要求1所述的非酿酒酵母hsmt-1的应用，其特征在于，所述非酿酒酵母hsmt-1用于水蜜桃果酒的发酵。


3.如权利要求1所述的该非酿酒酵母hsmt-1的筛选方法，其特征在于，步骤如下：
（1）取健康新鲜的水蜜桃，略微除去污渍泥土等杂质；将水蜜桃带皮灭菌刀具剁碎，去掉茎根和果核，称取100g分别装入500mL无菌三角瓶中，用透气封口膜封住瓶口...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春雨，何松，张晋，任建军，牛东泽，孙如梦，曾令文，刘梅，魏文亮，郑亚斌，
申请(专利权)人：常州大学，江苏碧奥环保科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32