一种桔梅奇酵母固体制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种桔梅奇酵母固体制剂及其制备方法和应用，属于果蔬保护剂技术领域。桔梅奇酵母固体制剂包括冻干保护剂，固体载体，润湿剂，分散剂和桔梅奇酵母菌。其制备方法为：将桔梅奇酵母接种培养，得到酵母菌悬浮液，然后与冻干保护剂溶液混合，加入固体载体，冻干，粉碎，加入润湿剂和分散剂，混匀，即得。本发明专利技术的桔梅奇酵母固体制剂，以桔梅奇酵母菌为主要原料，并辅以安全无毒的冻干保护剂，以及具有良好悬浮性，湿润性和分散性的固体载体，润湿剂和分散剂，相比于现有的固体化学保鲜剂，具有安全环保，抑菌谱广泛，活性较高，方便使用，生防效力高等优点，在采后果蔬病原菌浸染的防治方面，具有实用价值，适宜推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种桔梅奇酵母固体制剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及果蔬保护剂
，具体涉及一种桔梅奇酵母固体制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
在柑橘果实采收、转运、贮藏以及销售过程中，极易受到各种病原真菌侵染导致果实腐烂。主要的侵染性病害包括：Penicilliumdigitatum引起的柑橘绿霉病，Penicilliumitalicum引起的柑橘青霉病，Geotrochumcitri-aurantii引起的柑橘酸腐病，以及Colletotrichumgloeosporioides引起的柑橘炭疽病。目前对于柑橘果实采后病害的防控措施包括物理防治、化学防治、生物防治。与常用的化学杀菌剂相比，生物防治是一种更安全、健康和环境友好的防治措施，主要利用某些微生物对采后病原菌的拮抗效应，从而降低病原菌在果实表面的群落数量及致病力，达到对病害的防治作用，同时生物防治常表现出一定的广谱抑菌性使其作用范围更加广泛。因此，亟需开发安全有效、环境友好并可弥补化学杀菌剂缺陷的新型制剂。桔梅奇酵母(Metschnikowiacitriensis)作为可效防治柑橘果实采后青霉病、绿霉病、酸腐病和炭疽病的新种酵母，将其开发为新型生物制剂具有极大应用潜力。除液体制剂外，可湿性粉剂是微生物农药制剂的主要应用剂型之一。但可湿性粉剂成功应用的关键在于助剂的加入对微生物无不良影响，以及固体制剂具有较好的润湿性和分散性。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种桔梅奇酵母固体制剂及其制备方法。经研究，本专利技术提供以下技术方案：1、一种桔梅奇酵母固体制剂，所述桔梅奇酵母固体制剂按重量百分比计，包括10～25％冻干保护剂，60～80％固体载体，5～15％润湿剂，5～15％分散剂，其余为桔梅奇酵母菌冻干粉。优选的，所述冻干保护剂按重量份计，由1～9份蔗糖，1～7份谷氨酸钠和1～9份脱脂奶粉组成，或由7.5～12.5份脱脂奶粉，0.5～1.5份抗坏血酸和7.5～12.5份海藻糖组成，或由26～30份脱脂奶粉，22～26份乳糖和4.6～5份抗坏血酸钠组成。更优选的，所述冻干保护剂按重量百分比计，由1～9份蔗糖，1～7份谷氨酸钠和1～9份脱脂奶粉组成。优选的，所述固体载体为惰性固体载体。优选的，所述惰性固体载体为白炭黑、高岭土或硅藻土。更优选的，所述惰性固体载体为硅藻土。优选的，所述润湿剂为十二烷基硫酸钠，十二烷基苯磺酸钠或皂角粉。更优选的，所述润湿剂为皂角粉。优选的，所述分散剂为亚甲基二萘磺酸钠，聚乙二醇，木质素磺酸钠，羧甲基纤维素钠或多聚磷酸钠。更优选的，所述分散剂为亚甲基二萘磺酸钠。2、上述桔梅奇酵母固体制剂的制备方法，包括以下步骤：将桔梅奇酵母菌接种到酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)培养基上，在28℃条件下活化培养48h；用接种环挑取2环YPD培养基上的酵母单菌落至YPD液体培养基中，在28℃条件下，200r/min摇床培养20-24h，得发酵种子液；将发酵种子液按5％的比例加入新的YPD培养基中，在28℃条件下，200r/min摇床培养48h，结束后将培养液在4℃条件下，离心，收集菌体，洗涤，重悬，得酵母菌悬浮液；将保护剂按配方比例溶解至水中，制成冻干保护剂溶液；将酵母菌悬浮液与冻干保护剂溶液混合后，加入固体载体吸附，冷冻干燥，粉碎后得到混合酵母菌粉，然后再加入润湿剂和分散剂，混合均匀，即得桔梅奇酵母固体制剂。优选的，所述冻干保护剂溶液中，每升水中加入物质的质量百分含量为：蔗糖6.06％，谷氨酸钠3.4％和脱脂奶粉5.43％。优选的，所述冻干保护剂溶液中，每升水中加入物质的质量百分含量为：脱脂奶粉10％，抗坏血酸1％和海藻糖10％。优选的，所述冻干保护剂溶液中，每升水中加入物质的质量百分含量为：脱脂奶粉28％，乳糖24％和抗坏血酸钠4.8％。优选的，所述润湿剂和分散剂添加的重量百分比例为酵母菌粉的5％。优选的，所述培养液在4℃条件下，以转速为4000r/min进行离心10min。优选的，所述洗涤采用无菌水洗涤两次。优选的，所述重悬采用无菌水重悬菌体。优选的，所述酵母菌悬浮液中细胞浓度为2×109CFU/mL。3、上述桔梅奇酵母固体制剂在采后果蔬中作为保护剂的应用。桔梅奇酵母(Metschnikowiacitriensis)由西南大学食品贮藏与物流研究中心提供，保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CICCNO.33213。该菌种接种于NYDA斜面，4℃条件下保藏，每两个月活化一次。本专利技术的有益效果在于：1)本专利技术的桔梅奇酵母固体制剂，通过在桔梅奇酵母菌悬浮液中加入保护剂以提高酵母均的生物活性；加入固体载体，以提高桔梅奇酵母菌的悬浮率；加入润湿剂以缩短桔梅奇酵母菌的润湿时间；加入分散剂，以进一步提高桔梅奇酵母菌的悬浮率和分散性；同时，通过优化配比及其相互之间的协同作用，以增强酵母菌的胁迫耐受性，从而提高桔梅奇酵母菌在保存过程中的存活率，以及润湿性和分散性；2)本专利技术的桔梅奇酵母固体制剂的制备方法，通过将桔梅奇酵母接种到YPD培养基上活化培养后，在接种环上挑取2环YPD培养基上的酵母单菌落至YPD液体培养基中进行培养，得发酵液，以发酵液为种子液，加入YPD培养基中进行培养，处理后得酵母菌悬浮液，具有操作简单、条件温和、安全环保等优点；3)本专利技术的桔梅奇酵母固体制剂，以桔梅奇酵母菌为主要原料，并辅以安全无毒，且能提高桔梅奇酵母菌的活菌量的冻干保护剂，以及具有良好悬浮性，湿润性和分散性的固体载体，润湿剂和分散剂，相比于现有的固体化学保鲜剂，具有安全环保，抑菌谱广泛、活性较高，方便使用，生防效力高等优点，在采后果蔬病原菌浸染的防治方面，具有实用价值，适宜推广应用。附图说明图1为本专利技术实施例2中不同保护剂加入桔梅奇酵母菌冻干后酵母菌的存活率；图2为本专利技术实施例7中活菌数，润湿时间和悬浮率交互影响等值线图。具体实施方式下面结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种桔梅奇酵母固体制剂的制备方法，包括以下步骤：将桔梅奇酵母菌接种到酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)培养基上，在28℃条件下活化培养48h；用接种环挑取2环YPD培养基上的酵母单菌落至YPD液体培养基中，在28℃条件下，200r/min摇床培养22h，得发酵种子液；将发酵种子液按5％的比例加入新的YPD培养基中，在28℃条件下，200r/min摇床培养48h，结束后将培养液在4℃条件下，4000r/min离心10min，收集菌体，无菌水洗涤两次后，用无菌水重悬菌体，得酵母菌悬本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述桔梅奇酵母固体制剂按重量百分比计，包括10～25％冻干保护剂，60～80％固体载体，5～15％润湿剂，5～15％分散剂，其余为桔梅奇酵母菌冻干粉。/n

【技术特征摘要】
1.一种桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述桔梅奇酵母固体制剂按重量百分比计，包括10～25％冻干保护剂，60～80％固体载体，5～15％润湿剂，5～15％分散剂，其余为桔梅奇酵母菌冻干粉。


2.根据权利要求1所述桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述冻干保护剂按重量份计，包括1～9份蔗糖，1～7份谷氨酸钠和1～9份脱脂奶粉组成，或由7.5～12.5份脱脂奶粉，0.5～1.5份抗坏血酸和7.5～12.5份海藻糖组成，或由26～30份脱脂奶粉，22～26份乳糖和4.6～5份抗坏血酸钠组成。


3.根据权利要求1所述桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述固体载体为白炭黑、高岭土或硅藻土。


4.根据权利要求1所述桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠或皂角粉。


5.根据权利要求1所述桔梅奇酵母固体制剂，其特征在于，所述分散剂为亚甲基二萘磺酸钠、聚乙二醇、木质素磺酸钠、羧甲基纤维素钠或多聚磷酸钠。


6.如权利要求1至权利要求5任一所述桔梅奇酵母固体制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将桔梅奇酵母菌接种到酵母浸出粉胨葡萄糖(YPD)培养基上，在28℃条件下活化培养48h；
用接种环挑取2环YPD培养基上的酵母...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾凯芳，陈力维，邓丽莉，姚世响，易兰花，阮长晴，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50