抗OX40抗体、其抗原结合片段及其医药用途制造技术

本申请提供抗OX40抗体、其抗原结合片段及其医药用途。进一步地，本申请提供一种嵌合抗体、人源化抗体，其包含来自所述抗OX40抗体及其抗原结合片段的CDR区，以及还提供包含所述抗OX40抗体及其抗原结合片段的药物组合物，及其作为治疗癌症的药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗OX40抗体、其抗原结合片段及其医药用途本申请要求2018年09月26日提交的201811128669.3和2018年11月26日提交的201811417666.1的优先权。
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种抗OX40抗体、其抗原结合片段，包含所述抗OX40抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体，以及包含人抗OX40抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗癌药物的用途。
技术介绍
癌症是当今人类社会长期面临的严峻健康挑战。对于已扩散的实体肿瘤，传统的手术、化疗和放疗等疗法往往收效甚微。肿瘤免疫治疗是肿瘤治疗领域一个持续热点。最近研究已证明，增强抗肿瘤T细胞功能可以用于抵抗癌症。有大量证据表明，肿瘤细胞通过诱导主要由调节T淋巴细胞(Treg；Quezdaetal.ImmunolRev2011；241:104-118)介导的主动免疫耐受，而“逃避”免疫系统。因此，效应T淋巴细胞(Teff)与耐受原性(tolerogenic)Treg之间的平衡，对于有效抗肿瘤免疫治疗至关重要。因此，可以通过增强肿瘤特异性Teff的效应功能和/或通过减弱肿瘤特异性Treg的抑制功能，获得有效的抗肿瘤免疫应答。CD134(OX40)受体已被证明是介导这些应答的一种关键受体(Sugamura,K,Ishii,N,Weinberg,A.TherapeutictargetingoftheeffectorT-cellco-stimulatorymoleculeOX40.NatureRevImm2004；4:420-431)。<br>OX40是肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族的成员之一，是一种在细胞表面表达的分子量约50kDa的糖蛋白。OX40的胞外配体结合结构域由4个富含半胱氨酸的结构域(CRD)组成。OX40的天然配体是OX40L(CD252)，两者形成OX40-OX40L复合物。OX40主要表达在激活的T细胞上，OX40是次级共刺激分子，在激活后24-72小时后表达。OX40的配体OX40L主要表达在在激活的抗原递呈细胞上。表达OX40的T淋巴细胞已被证实存在于各种人恶性肿瘤及癌症患者的引流淋巴结中。在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型中，OX40与OX40L结合结构域相互作用可增强抗肿瘤免疫，导致各种人恶性肿瘤细胞系，如淋巴瘤、前列腺癌、结肠癌及乳腺癌的肿瘤生长抑制。目前，有多家国际制药公司在研发针对OX40的单克隆抗体。OX40抗体通过特异性刺激，激活免疫，提高患者自身对肿瘤的免疫系统反应，达到对肿瘤细胞进行杀伤的目的。相关专利如WO2013038191、WO2015153513、WO2016179517、WO2017096182、CN110078825A、WO2016196228等。迄今为止，阿斯利康、BMS等公司各自开发的抗OX40抗体已在II期临床试验之中，而基因泰克、GSK等公司的相关产品也已处在临床试验阶段。但是，上述药物在治疗效果方面仍有可提高的空间。因此，有必要继续开发具有高选择性、高亲和力和良好药效的抗OX40抗体。
技术实现思路
本公开提供一种抗OX40抗体或其抗原结合片段，所述抗体与人OX40特异性结合，并包如下所示的CDR：(i)分别如SEQIDNO：3、4、5所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3或与SEQIDNO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；和/或，分别如SEQIDNO：6、7、8所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3或与SEQIDNO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；具体地，分别如SEQIDNO：3、4、5所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQIDNO：6、7、8所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；或(ii)分别如SEQIDNO：11、12、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3或与SEQIDNO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；和/或，分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3或与SEQIDNO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；具体地，分别如SEQIDNO：11、12、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；或(iii)分别如SEQIDNO：11、33、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3或与SEQIDNO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；和/或，分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3或与SEQIDNO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；具体地，分别如SEQIDNO：11、33、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；或(vi)分别如SEQIDNO：11、34、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3或与SEQIDNO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；和/或，分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3或与SEQIDNO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；具体地，分别如SEQIDNO：11、34、13所示的重链HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3。在一些实施方案中，所述抗OX40抗体或其抗原结合片段为鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体或其片段，具体地，人源化抗体。在一些实施方案中，所述单克隆抗体或抗原结合片段的CDR(包括3个重链CDR和3个轻链CDR)允许包含3、2或1个氨基酸差异(即CDR变体)，CDR变体是通过亲和力成熟方法筛选获得的。在一些实施方案中，所述单克隆抗体或抗原结合片段与OX40的亲和力(KD)小于10-8M、小于10-9M或小于10-10M。在一些实施方案中，其中所述的鼠源抗体包含如下所示的重链可变区和轻链可变区：(i)重链可变区氨基酸序列如SEQIDNO：1所示；或与SEQIDNO：1具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗OX40抗体或其抗原结合片段，其中：/n重链可变区，包含：/n(I)分别如SEQ ID NO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQ ID NO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；/n(II)分别如SEQ ID NO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQ ID NO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；/n(III)分别如SEQ ID NO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQ ID NO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；或/n(IV)分别如SEQ ID NO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQ ID NO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；/n和/或，轻链可变区，包含：/n(I)分别如SEQ ID NO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；或与SEQ ID NO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；或/n(II)分别如SEQ ID NO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；或与SEQ ID NO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；/n优选地，所述抗OX40抗体或其抗原结合片段包含：/n(i)分别如SEQ ID NO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQ ID NO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；/n(ii)分别如SEQ ID NO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQ ID NO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；/n(iii)分别如SEQ ID NO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQ ID NO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；或/n(iv)分别如SEQ ID NO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQ ID NO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180926 CN 2018111286693;20181126 CN 201811417666一种抗OX40抗体或其抗原结合片段，其中：
重链可变区，包含：
(I)分别如SEQIDNO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQIDNO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；
(II)分别如SEQIDNO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQIDNO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；
(III)分别如SEQIDNO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQIDNO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；或
(IV)分别如SEQIDNO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；或与SEQIDNO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的HCDR变体；
和/或，轻链可变区，包含：
(I)分别如SEQIDNO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；或与SEQIDNO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；或
(II)分别如SEQIDNO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；或与SEQIDNO：14、15、16所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3分别具有3、2或1个氨基酸差异的LCDR变体；
优选地，所述抗OX40抗体或其抗原结合片段包含：
(i)分别如SEQIDNO：3、4、5所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQIDNO：6、7、8所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；
(ii)分别如SEQIDNO：11、12、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；
(iii)分别如SEQIDNO：11、33、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3；或
(iv)分别如SEQIDNO：11、34、13所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3和分别如SEQIDNO：14、15、16所示的轻链LCDR1、LCDR2、LCDR3。


根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合片段，其为鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体或其片段。


根据权利要求1或2所述的抗OX40抗体或其抗原结合片段，其中：
所述抗原结合片段选自：Fab、Fab’、Fv、scFv、F(ab')2片段；
所述抗体的重链可变区还包含重链框架区，所述重链框架区源自人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或其变体。


根据权利要求1或2所述的抗OX40抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体包含恒定区；
优选地，重链恒定区源自人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或其突变序列；
优选地，轻链恒定区源自人κ、λ链或其突变序列；
更优选地，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQIDNO：35所示或与SEQIDNO：35具有至少90％的序列同一性，
更优选地，所述轻链恒定区的氨基酸序列如SEQIDNO：36所示或与SEQIDNO：36具有至少90％的序列同一性。


根据权利要求1或2所述的抗OX40抗体或其抗原结合片段，其中：
重链可变区，包含：
(I)如SEQIDNO：1所示或与SEQIDNO：1具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(II)如SEQIDNO：9所示或与SEQIDNO：9具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(III)如SEQIDNO：17、18、31、32任一所示；或与SEQIDNO：17、18、31、32具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或
(IV)如SEQIDNO：26、27、28、29、30任一所示；或与SEQIDNO：26、27、28、29、30具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
和/或，轻链可变区，包含：
(I)如SEQIDNO：2所示或与SEQIDNO：2具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(II)如SEQIDNO：10所示或与SEQIDNO：10具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(III)如SEQIDNO：19、20任一所示或与SEQIDNO：19、20具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(IV)如SEQIDNO：21、2...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖成，徐祖朋，蒋家骅，叶鑫，张连山，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32