提高反刍动物妊娠率的组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率的组合物及其制备方法和应用。所述组合物的有效成分为浓度10～20mg/mL的褪黑素。本发明专利技术通过动物实验证明，在反刍动物同期排卵定时输精方案中最后一次注射GnRH的同时配合使用本发明专利技术的所述组合物，能够调节动物机体内的生殖激素分泌，提高促黄体生成素LH和妊娠母畜的孕酮含量，提高卵子质量、促进排卵，进而提高反刍动物定时输精妊娠率。进而提高反刍动物定时输精妊娠率。

【技术实现步骤摘要】
提高反刍动物妊娠率的组合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及畜牧兽医领域，具体地说，涉及一种提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率的组合物及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]近年来由于奶牛养殖业中单产量的逐步提高，经产奶牛的配种妊娠率呈下降趋势，奶牛产犊间隔长，严重影响了经济效益。如何提高奶牛繁殖效率，成为制约产业发展的当务之急。同期排卵定时输精技术(Timed Artificial Insemination，TAI)是指一群奶牛在同一时期内发情并排卵，定时进行人工授精的技术。该技术使用效果好，效率高，在许多大型牧场中都有所应用。经典的同期排卵定时输精技术包括：Ovsynch方案(GnRH-PG-GnRH)、Presynch方案(PG-PG-GnRH-PG-GnRH)、Richard Pursley方案等。但是在实际应用中，这些方案处理要求高、处理时间长，与此同时大量使用GnRH及其类似物等药物对奶牛机体会产生相应的伤害：如抑制排卵、性腺萎缩等。因此，优化奶牛同期排卵定时输精技术方案，进一步满足生产需求，迫在眉睫。
[0003]褪黑素(Melatonin,MT)化学名称为N-乙酰基-5-羟色胺，是一种主要由松果体分泌的激素，具有强抗氧化性，在动物繁殖中具有重要的调控作用。在卵母细胞体外成熟过程中添加褪黑素，可以促进卵母细胞的体外成熟，提高体外受精或孤雌激活后胚胎发育潜力，这表明褪黑素直接参与卵母细胞成熟调控。在体内的研究发现，排卵前体内LH(luteinizing hormone，促黄体生成素)峰能引起卵巢颗粒细胞中的褪黑素I型受体(MT1)的表达水平急剧上升；而同一时期，卵丘细胞中的褪黑素合成酶AANAT的表达水平也极显著上升，引起卵泡液中的褪黑素水平升高。这表明，褪黑素是LH的下游信号分子，它通过受体MT1发挥作用。在MT1受体峰前注射5mg/kg剂量褪黑素能显著提高小鼠血清中孕酮含量，并上调黄体标志基因Akr1c18、Cyp11a1的表达。
[0004]经产母牛配种妊娠率低是影响奶牛生产效益的主要因素之一。在奶牛正常排卵过程中会产生大量的活性氧(ROS)，严重影响卵母细胞质量。
[0005]因此需要寻求一种有效可行的方法，清除排卵过程中的大量活性氧，提高卵母细胞质量，进而提高奶牛配种妊娠率。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率和繁殖率的组合物及其制备方法和应用。
[0007]为了实现本专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：
[0008]第一方面，本专利技术提供一种提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率和繁殖率的组合物，所述组合物的有效成分包含褪黑素。优选地，所述组合物的有效成分为褪黑素。
[0009]进一步地，所述组合物中，褪黑素的浓度为10～20mg/mL，相当于4.3
×
10-2
～8.6
×
10-2
mol/L。
[0010]作为优选的技术方案，所述褪黑素的浓度为15mg/mL。
[0011]进一步地，所述组合物中还含有无水乙醇和生理盐水。
[0012]优选地，所述无水乙醇与生理盐水的体积比为(1～3):(1～2)，更优选为3:2。
[0013]作为优选的技术方案，所述无水乙醇为纯度99％以上乙醇；所述生理盐水为0.9％生理盐水。
[0014]作为优选的技术方案，所述组合物中，无水乙醇与0.9％生理盐水的体积比为(1～3):(1～2)，优选为3:2。
[0015]更进一步地，所述组合物为注射剂。
[0016]第二方面，本专利技术提供了所述组合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：将褪黑素溶于无水乙醇，然后加入生理盐水，操作过程避光进行。
[0017]作为优选的技术方案，本专利技术进一步提供了所述组合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：将褪黑素溶于无水乙醇，然后添加0.9％生理盐水，操作过程避光进行。
[0018]第三方面，本专利技术提供了所述组合物或由上述方法制备的组合物在提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率中的用途。
[0019]作为优选的技术方案，在本专利技术的所述用途中，在反刍动物同期排卵定时输精的GnRH-PG-GnRH或PG-PG-GnRH-PG-GnRH过程中，在最后1针注射GnRH的同时使用本专利技术所述的组合物或由上述方法制备的组合物，24～48小时后进行输精，优选在24小时后进行输精。
[0020]优选地，所述组合物在每只反刍动物中的用量以褪黑素计为7.5
×
10-2
mg/kg～11.25
×
10-2
mg/kg。
[0021]第四方面，本专利技术还提供了所述组合物或由上述方法制备的组合物在提高反刍动物同期排卵定时输精的繁殖率中的用途。
[0022]作为优选的技术方案，在本专利技术的上述各用途中，在反刍动物同期排卵定时输精的GnRH-PG-GnRH或PG-PG-GnRH-PG-GnRH过程中，在最后1针注射GnRH的同时使用本专利技术所述的组合物或由上述方法制备的组合物，24～48小时后进行输精，优选在24小时后进行输精。
[0023]优选地，所述组合物在每只反刍动物中的用量以褪黑素计为7.5
×
10-2
mg/kg～11.25
×
10-2
mg/kg。
[0024]第五方面，本专利技术所述的组合物或由本专利技术的方法制备的组合物以注射剂的形式施用。
[0025]进一步优选地，所述施用的方式为皮下注射。
[0026]作为优选的技术方案，在反刍动物同期排卵定时输精过程中，在最后一次注射GnRH的同时通过皮下注射施用本专利技术的所述组合物或由本专利技术的方法制备的组合物，以提高反刍动物妊娠率和/或繁殖率。
[0027]作为优选的技术方案，所述组合物在每只反刍动物中的用量以褪黑素计为7.5
×
10-2
mg/kg～11.25
×
10-2
mg/kg，优选7.5
×
10-2
mg/kg～9.4
×
10-2
mg/kg，更优选7.5
×
10-2
mg/kg。
[0028]进一步地，所述组合物的注射剂量为2～3mL，优选的注射剂量为2mL。
[0029]本专利技术所述的反刍动物选自奶牛、黄牛、水牛、山羊、绵羊、骆驼、羊驼、羚羊和牛羚。
[0030]本专利技术的有益效果在于：
[0031]本专利技术出乎意料的发现，利用褪黑素能提高奶牛同期排卵定时输精的妊娠率。将褪黑素与无水乙醇和生理盐水溶解制备注射剂，在奶牛同期排卵定时输精注射GnRH的同时配合注射本专利技术的褪黑素制剂，可以提高奶牛的妊娠率，这也为进一步开展提高奶牛繁殖效率的研究提供有益的参考。
[0032]本专利技术通过动物实验发现，以优选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高反刍动物妊娠率和繁殖率的组合物，其特征在于，所述组合物的有效成分包含褪黑素。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的有效成分为褪黑素。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述组合物中，褪黑素的浓度为10～20mg/mL。4.根据权利要求1-3任意一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物中还含有无水乙醇和生理盐水；优选地，所述无水乙醇与生理盐水的体积比为(1～3):(1～2)，更优选为3:2。5.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物为注射剂。6.权利要求1-5中任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将褪黑素溶于无水乙醇，然后加入生理盐水，操作过程避光进行。7.权利要求1-5中任一项所述的组合物或权利要求6所述的方法制备的组合物在提高反刍动物同期排卵定时输精的妊娠率中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，在反刍动物同期排卵定时输精的GnRH-PG-GnRH或PG-PG-GnRH-PG-GnRH过程中，在最后...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国世，吴昊，张鲁，路永强，王天坤，郭江鹏，姚松阳，关盛宇，姬鹏云，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：