【技术实现步骤摘要】
一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法
[0001]本专利技术涉及一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法。
技术介绍
[0002]在环境研究中,定量评估农药的微生物降解一直是国内外学者的研究热点。传统方法在评估环境中农药的微生物降解时,是通过测定一些微生物活性指标来定性和定量的,如底物和电子受体浓度的降低,微生物量和降解产物的增长等。但这些基于浓度的指标并不能真实反映农药的微生物降解,一些自然过程如挥发、稀释和吸附等也会引起农药浓度的降低,而农药本身并没有发生降解。此外,底物、电子受体和降解产物的物料平衡在复杂的自然环境体系中很难准确获得。
技术实现思路
[0003]本专利技术要解决现有的技术问题是提供一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法,它能够利用稳定同位素分析技术研究同位素组成与生物降解率的关系,对农药的微生物降解进行定性和定量分析,从而获得真实准确的农药的微生物降解数据。
[0004]本专利技术解决上述技术问题采用的技术方案为:
[0005]本专利技术公开一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法,其特征在于,包括如下步骤:第一步,在阴暗干燥、通风良好的实验台上垫一层聚乙烯塑料薄膜,将采来的土壤样品置于聚乙烯塑料薄膜上摊平,压碎土块,剔除石块、动植物残体等杂物后,再铺成薄层,经常翻动土样,使其自然风干;
[0006]第二步,风干之后,过2mm的筛,混匀,用四分法取对角的两份,再混匀,再用四分法取对角的两份,其中一份用于实验,另一份用样品袋包好 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法,其特征在于,包括如下步骤:第一步,在阴暗干燥、通风良好的实验台上垫一层聚乙烯塑料薄膜,将采来的土壤样品置于聚乙烯塑料薄膜上摊平,压碎土块,剔除石块、动植物残体等杂物后,再铺成薄层,经常翻动土样,使其自然风干;第二步,风干之后,过2mm的筛,混匀,用四分法取对角的两份,再混匀,再用四分法取对角的两份,其中一份用于实验,另一份用样品袋包好后保存于阴暗干燥处;第三步,用痕量电子天平称取顺式氯氰菊酯固体标样0.01000
±
0.00005g,溶于正己烷,在100mL容量瓶中定容,配成100mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液,摇匀后备用,再分别量取10mL和50mL的顺式氯氰菊酯标准溶液,在100mL容量瓶中用正己烷稀释定容,分别配成浓度为10mg/L和50mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液;第四步,将浓度为100mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液用正己烷按一定梯度稀释,分别配制成浓度为500μg/L、250μg/L、100μg/L、50μg/L、25μg/L和10μg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液,用GC-MS进行分析测定,绘制标准曲线;第五步,取浓度为50mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液,用GC-C-IRMS进行分析,测定其碳同位素组成(δ
013
C);第六步,测定(δ
013
C)后,对同位素富集因子ε进行计算;第七步,结合同位素富集因子ε,环境中顺式氯氰菊酯的生物降解率(B)可以通过公式进行计算。2.根据权利要求1所述的一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法,其特征在于:在定量同位素分馏时,通常采用Rayleigh模型公式式中R
t
,R0和C
t
,C0分别为化合物在时间t和反应初始时的同位素比和浓度,ε为同位素富集因子,其将同位素比变化与浓度变化相关联,对于自然丰度的稳定碳同位素比(R=
13
C/
12
C),可以假设R+1≈1,因此上式可以简化为接着将简化的Rayleigh公式取对数,可以求得碳同位素富集因子ε;最后将ln(C
t
/C0)对ln[(δ
t13
C+1)/(δ
013
C+1)]作图,如说明书附图图1,线性拟合后直线的斜率即为碳同位素富集因子ε。3.根据权利要求1所述的一种土壤中拟除虫菊酯微生物降解的同位素分析方法,其特征在于:碳同位素组成(δ
013
C)可通过土壤微生物的活化及对照设置方式分析得到;使用土壤微生物的活化及对照设置方式时,首先取96个50mL锥形瓶(带橡胶塞),用分析电子天平称取5.0000
±
0.0250g土壤样品分别加入锥形瓶中并使其在瓶底摊平,用1mL移液枪在每个
锥形瓶中均匀喷洒3mL的自来水,塞上橡胶塞后称量记录下每个锥形瓶的总质量;然后,将锥形瓶放入恒温摇床,以30℃,120r/min振荡30min,接着放入恒温培养箱,在30℃下避光培养2周;然后,从恒温培养箱取出锥形瓶,均分为A、B两组,将A组置于高压灭菌锅,在121℃下灭菌3次,每次20min,接着再将A、B两组分别均分为A1、A2组和B1、B2组,用1mL移液枪在A1和B1每个瓶中均匀喷洒1mL浓度为10mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液,在A2和B2中均匀喷洒1mL浓度为50mg/L的顺式氯氰菊酯标准溶液;然后,将锥形瓶置于恒温摇床以30℃,120r/min振荡10min,使顺式氯氰菊酯均匀分布于土壤样品中,松下瓶塞使正己烷挥发殆尽后塞紧瓶塞,通过称重在A、B组中分别补加灭菌的和不灭菌的自来水后再塞紧瓶塞。再放入恒温培养箱,在30℃下避光培养;最后,每隔10天从培养...
【专利技术属性】
技术研发人员:丁佳敏,杨方星,丁锦建,徐泽民,
申请(专利权)人:浙江大学台州研究院,
类型:发明
国别省市:
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