用作爱帕琳肽受体拮抗剂的化合物制造技术

本发明专利技术涉及与A类G蛋白偶联受体爱帕琳肽受体结合的合成多肽化合物。这些化合物可以充当爱帕琳肽受体拮抗剂。这些化合物和包含其的组合物可用于治疗疾病，例如癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用作爱帕琳肽受体拮抗剂的化合物
本专利技术涉及具有爱帕琳肽(apelin)受体拮抗剂活性的化合物和组合物，其可以用于治疗诸如癌症等病症。
技术介绍
爱帕琳肽爱帕琳肽受体，一种在1993[1]中首次鉴定的A类GPCR，一直保持孤儿状态，直到在1998[2]中鉴定出爱帕琳肽作为同源配体。内源性爱帕琳肽来源于77个氨基酸前体前-原爱帕琳肽的C末端。蛋白水解切割表明爱帕琳肽-17、爱帕琳肽-13和[pyr1]爱帕琳-13是最生物学相关的。在人心脏[3]和血浆[4]中，检测到[pyr1]爱帕琳-13(Pyr1-RPRLSHKGPMPF)是主要的同工型。爱帕琳肽响应与通过募集β-抑制蛋白(一种引发受体内化以及下游信号传导的蛋白质)经由Gai和经由G蛋白依赖方式的偶联一致[5]。爱帕琳肽在许多体内平衡和信号传导过程中，例如在心血管系统中控制血压和血管生成中，作为HIV的共受体和对于调节全身代谢和体内平衡过程至关重要[6，7]。值得注意的是，最近发现的另一种爱帕琳肽激动剂Elabela/Toddler[8，9](ELA)，也通过爱帕琳肽受体起作用，并且在心脏发育中是关键的[8]，尽管与已建立的配体爱帕琳肽具有很少的序列同源性。APELA基因表达包含32个氨基酸的成熟肽(ELA-32)的54个氨基酸的蛋白质。降解产物产生活性肽ELA-21(LRKHNCLQRRCMPLHSRVPFP)和ELA-11。据报道，爱帕琳肽在许多疾病过程中是多因素的病因，包括例如糖尿病、心血管疾病、HIV感染、肾病、血管生成。[10-22]爱帕琳肽涉及许多不同亚型癌症的病因学[refs.Cancer23-53，US20140005181A1]。最近的工作已经鉴定爱帕琳肽为胶质母细胞瘤的持续内分泌因子[60]。爱帕琳肽受体拮抗剂最近提交了许多关于爱帕琳肽受体拮抗剂的专利。要求保护爱帕琳肽受体拮抗剂作为癌症靶标的推定机制(US2017146518(A1))。已经要求保护爱帕琳受体拮抗剂和血管生成抑制剂的组合(WO2017/174758)以减少或克服针对抗血管生成疗法的抗性。已经报道了功能性拮抗剂(爱帕琳肽-13(F13A))和爱帕琳肽受体拮抗剂。[54-60]对于体外的人爱帕琳肽受体，爱帕琳肽-13(F13A)表现出与(Pyr1)爱帕琳肽-13相似的结合、钙动员和内化响应，而在人心脏组织中，F13A在左心室竞争与[125I]-(Pyr1)爱帕琳肽-13的结合并有效地收缩内皮剥脱的隐静脉。因此，尽管已报道爱帕琳肽-13(F13A)作为功能拮抗剂起作用，但是它实际上可以作为体外爱帕琳肽受体激动剂起作用。[15]MM54[环(1-6)CRPRLC-KH-环(9-14)CRPRLC是竞争性大环爱帕琳肽受体拮抗剂[57]。MM54在胶质母细胞瘤中显示抗肿瘤性质。此外，MM54与抗癌化合物替莫唑胺的组合在胶质母细胞瘤模型中显示协同性质[60]。MM54的药理学在表达爱帕琳肽的hCHO细胞中显示了82nM的结合亲和力，358nM的与人左心室结合(Kd)，并且在DRxβ-抑制蛋白测定中MM54是拮抗剂，pA2＝6.63。然而，在DRxcAMP测定中，MM54显示弱的激动剂活性(pD2＝5.86，EC50＝1.40μM)。在人前臂研究中，MM54出乎意料地显示了由血管舒张指示的功能激动剂活性。为此，可能存在与该药理学性质相关的另外的作用，包括经由cAMP由爱帕琳肽信号传导介导的血压降低。此外，与大环类似物的合成相关的复杂性和成本增加。出乎意料地，观察到MM54的线性肽类似物表现出爱帕琳受体拮抗作用。MM107，MM54的线性序列CRPRLCKHCRPRLC，在表达爱帕琳受体的hCHO细胞中显示180nM的结合亲和力，并且在DRxβ-抑制蛋白测定中是拮抗剂(pA2＝7.03)，但是令人惊讶地，并且与MM54不同，在DRxcAMP测定中在100μM没有显示激动剂作用。线性结构的进一步修饰导致鉴定到在爱帕琳肽受体处显示出较高亲和力的拮抗剂，在DRxβ-抑制蛋白和DRxcAMP测定中增强了对爱帕琳肽受体的拮抗作用，而没有爱帕琳肽受体激动剂作用的证据。线性爱帕琳肽拮抗剂MM193在胶质母细胞瘤模型中也显示出显著的抗癌作用[60]。
技术实现思路
本专利技术人已经发现了许多能够作为竞争性爱帕琳肽受体拮抗剂的线性肽。这些包括与已知的大环爱帕琳肽受体拮抗剂MM54相比是更有效的拮抗剂并且具有改善的药理学特性的化合物。在一个方面，本专利技术提供了化合物，其包含式I的序列：(R1-Lc)-X1-L1-X2-L2-X3-L3-X4-L4-X5-L5-X6-L6-X7-L7-X8-L8-X9-L9-X10-L10-X4-[11-X11-L12-X12-L13-X13-L14-X14(-Lc-R2)(式I)其中X1可以是任何氨基酸；X2可以选自由R、H和K组成的组；X3是P；X4是R；X5可以选自由Nle、L、A、V、I、M、F、Y和W组成的组；X6可以选自由Abu、C、A、V、I、L、M、F、Y、W和P组成的组；X7可以选自由H、K、A、V、I、L、M、F、Y、W和R组成的组；X8可以选自由K、H、A、V、I、L、M、F、Y、W和R组成的组；X9可以选自由Abu、C、A、V、I、L、M、F、Y、W和P组成的组；X10可以选自由R、H和K组成的组；X11可以选自由Aib和P组成的组；X12可以选自由R、H和K组成的组；X13可以选自由Nle、Aib、L、V、I和A组成的组；X14可以选自由无、C、F、其他疏水性氨基酸(包括丙氨酸(A)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、蛋氨酸(M)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W)、缬氨酸(V)、脯氨酸(P)、甘氨酸(G))组成的组，并且X14可以特别是3，4，5-三氟苯丙氨酸(Tfpa或(3，4，5-三氟)F)、β-环己基丙氨酸(Cha)、萘基丙氨酸(Nal)、4-氯苯丙氨酸(4cpa)、4-甲氧基苯丙氨酸、4-甲基苯丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、D-(-)-α-苯基甘氨酸、高苯丙氨酸、3-苯乙烯基丙氨酸、O-苄基-L-酪氨酸、4-苯甲酰基-L-苯丙氨酸、α-甲基-L-苯丙氨酸、α-甲基-D-苯丙氨酸、氨基茚满、2-氨基茚满、O-苄基酪氨酸或4-氨基哌啶-4-羧酸中的一种；其中：1)对于X1至X14，列出的任何天然氨基酸可以独立地被任选修饰，并且其中2)对于X1至X14，列出的任何经修饰氨基酸可以独立地被任选进一步修饰，并且在选项1)和2)中，可以对选项1)的修饰和选项2)中的进一步修饰任选地进行烷基化、酯化、N-烷基酰胺化、氢被任何卤素基团或羟基取代或通过缀合接头Lc与R3部分缀合；L1至L14中的每一个独立地是适合于将两个氨基酸连接在一起的键，例如酰胺键、N-甲基化酰胺、脲、酯、氨基甲酸酯、类肽、磺酰胺、亚烷基、硫代酰胺、硫醚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化合物，其包括式I的序列：/n(R

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180405 GB 1805675.41.一种化合物，其包括式I的序列：
(R1-Lc)-X1-L1-X2-L2-X3-L3-X4-L4-X5-L5-X6-L6-X7-L7-X8-L8-X9-L9-X10-L10-X4-L11-X11-L12-X12-L13-X13-L14-X14(-Lc-R2)
(式I)
其中
X1是任何氨基酸；
X2选自由R、H和K组成的组；
X3是P；
X4是R；
X5选自由Nle、L、A、V、I、M、F、Y和W组成的组；
X6选自由Abu、C、A、V、I、L、M、F、Y、W和P组成的组；
X7选自由H、K、A、V、I、L、M、F、Y、W和R组成的组；
X8选自由K、H、A、V、I、L、M、F、Y、W和R组成的组；
X9选自由Abu、C、A、V、I、L、M、F、Y、W和P组成的组；
X10选自由R、H和K组成的组；
X11选自由Aib和P组成的组；
X12选自由R、H和K组成的组；
X13选自由Nle、Aib、L、V、I和A组成的组；
X14选自由无、C、F、其他疏水性氨基酸(包括丙氨酸(A)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、蛋氨酸(M)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W)、缬氨酸(V)、脯氨酸(P)、甘氨酸(G))组成的组，并且X14可以特别是3,4,5-三氟苯丙氨酸(Tfpa或(3,4,5-三氟)F)、β-环己基丙氨酸(Cha)、萘基丙氨酸(Nal)、4-氯苯丙氨酸(4cpa)、4-甲氧基苯丙氨酸、4-甲基苯丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、D-(-)-α-苯基甘氨酸、高苯丙氨酸、3-苯乙烯基丙氨酸、O-苄基-L-酪氨酸、4-苯甲酰基-L-苯丙氨酸、α-甲基-L-苯丙氨酸、α-甲基-D-苯丙氨酸或氨基茚满、2-氨基茚满、O-苄基酪氨酸或4-氨基哌啶-4-羧酸中的一种；
其中：
1)对于X1至X14，列出的任何天然氨基酸可以独立地被任选修饰，并且其中2)对于X1至X14，列出的任何经修饰氨基酸可以独立地被任选进一步修饰，并且在选项1)和2)中，可以对选项1)的修饰和选项2)中的进一步修饰任选地进行烷基化、酯化、N-烷基酰胺化、氢被任何卤素基团或羟基取代或通过缀合接头Lc与R3部分缀合；
L1至L14中的每一个独立地是适合于将两个氨基酸连接在一起的键，例如酰胺键、N-甲基化酰胺、脲、酯、氨基甲酸酯、类肽、磺酰胺、亚烷基、硫代酰胺、硫醚、氟代亚烷基、氮杂肽二氟酮或环氧化物；
R1、R2和R3独立地不存在或独立地表示化合物的其余部分，例如R1、R2和R3能够独立地是肽、乙酰基、甲酰基、丙炔基、生物素、肉豆蔻酰基或棕榈酰基部分、甲基部分、饱和或不饱和脂肪酰基部分、聚乙二醇聚合物部分、免疫球蛋白部分、免疫球蛋白Fc结构域部分、白蛋白、甲基化部分、酯化部分或天然爱帕琳肽化合物的一部分；
每个Lc独立地不存在或为缀合接头，其将R1连接至X1、将R2连接至X14或将R3部分连接至X1至X14中的任何一个，并且选自适于将R1连接至X1、将R2连接至X14或将R3部分连接至X1至X14中的任何一个的任何键，
或者所述化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物、酰胺、酯、前药或氘代类似物。


2.根据权利要求1所述的化合物，其包括式I的序列：
(R1-Lc)-X1-L1-X2-L2-X3-L3-X4-L4-X5-L5-X6-L6-X7-L7-X8-L8-X9-L9-X10-L10-X4-L11-X11-L12-X12-L13-X13-L14-X14(-Lc-R2)
(式I)
其中
X1选自由V、I、L、M、P、Y、W、C、Q、Glp和A组成的组；
X2是R；
X3是P；
X4是R；
X5选自由A、V、I、Nle和L组成的组；
X6选自由Abu、M、P和C组成的组；
X7选自由H、R和K组成的组；
X8选自由R、K和H组成的组；
X9选自由Abu、M、P和C组成的组；
X10是R或K；
X11选自由Aib和P组成的组；
X12是R、K或H；
X13选自由A、V、I、Nle和L组成的组；
X14选自由无、C、F、其他疏水性氨基酸(丙氨酸(A)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、蛋氨酸(M)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W)、缬氨酸(V)、脯氨酸(P)、甘氨酸(G))组成的组，并且X14可以特别是3,4,5-三氟苯丙氨酸(Tfpa或(3,4,5-三氟)F)、β-环己基丙氨酸(Cha)、萘基丙氨酸(Nal)、4-氯苯丙氨酸(4cpa)、4-甲氧基苯丙氨酸、4-甲基苯丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、D-(-)-α-苯基甘氨酸、高苯丙氨酸、3-苯乙烯基丙氨酸、O-苄基-L-酪氨酸、4-苯甲酰基-L-苯丙氨酸、α-甲基-L-苯丙氨酸、α-甲基-D-苯丙氨酸或氨基茚满、2-氨基茚满、O-苄基酪氨酸或4-氨基哌啶-4-羧酸中的一种；
其中：
1)对于X1至X14，列出的任何天然氨基酸可以独立地被任选修饰，并且其中2)对于X1至X14，列出的任何经修饰氨基酸可以独立地被任选进一步修饰，并且在选项1)和2)中，可以对选项1)的修饰和选项2)中的进一步修饰任选地进行烷基化、酯化、N-烷基酰胺化、氢被任何卤素基团或羟基取代或通过缀合接头Lc与R3部分缀合；
L1至L14中的每一个独立地是适合于将两个氨基酸连接在一起的键，例如酰胺键、N-甲基化酰胺、脲、酯、氨基甲酸酯、类肽、磺酰胺、亚烷基、硫代酰胺、硫醚、氟代亚烷基、氮杂肽二氟酮或环氧化物；
R1、R2和R3独立地不存在或独立地表示化合物的其余部分，例如R1、R2和R3能够独立地是肽、乙酰基、甲酰基、丙炔基、生物素、肉豆蔻酰基或棕榈酰基部分、甲基部分、饱和或不饱和脂肪酰基部分、聚乙二醇聚合物部分、免疫球...

【专利技术属性】
技术研发人员：安东尼·皮特·达文波特，罗伯特·查尔斯·格伦，珍妮特·朱莉·马奎尔，
申请(专利权)人：剑桥企业有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB