基于移动反应界面的核酸扩增-芯片电泳滴定传感的核酸检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于移动反应界面的核酸扩增‑芯片电泳滴定传感的核酸检测方法，该方法为：设计核酸扩增‑芯片电泳滴定传感，并进行核酸扩增以形成双链DNA，对双链DNA进行芯片电泳滴定传感，使双链DNA进入电泳通道进行反应形成移动反应界面；先测定一系列已知浓度的核酸扩增后的双链DNA界面迁移距离，建立起界面迁移距离与核酸浓度的标准曲线；再对待测核酸进行扩增‑电泳滴定传感，得到待测核酸的界面迁移距离，根据建立的标准曲线，得到待测核酸的浓度。本发明专利技术具有定量可视、操作简便、灵敏度高、特异性好和成本低等优点。

【技术实现步骤摘要】
基于移动反应界面的核酸扩增-芯片电泳滴定传感的核酸检测方法
本专利技术涉及医药检测领域，具体涉及一种基于移动反应界面的核酸扩增-芯片电泳滴定传感的核酸检测方法。
技术介绍
作为生物遗传信息的载体，核酸广泛存在于所有生物体内，并在许多生物学过程中都起着重要作用，包括细胞增殖，基因表达和细胞凋亡。核酸的异常表达与多种疾病(如肿瘤、病毒感染、细菌感染、代谢性疾病)密切相关。因此，核酸检测对临床诊断具有重要意义，同时核酸检测在农业生产、微生物鉴定分析、药物研发、环境分析中具有不可替代的作用。众多核酸生物分析方法已经建立起来。这些方法涉及Northernblotting(Pall,G.S.,Codony-Servat,C.,Byrne,J.,Ritchie,L.,Hamilton,A.,2007.NucleicAcidsRes.35,e60.)、聚合酶链式反应(PCR)(Li,J.,Yao,B.,Huang,H.,Wang,Z.,Sun,C.H.,Fan,Y.,Chang,Q.,Li,S.L.,Wang,X.,Xi,J.Z.,2009.A本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于移动反应界面的核酸扩增-芯片电泳滴定传感的核酸检测方法，其特征在于，该方法为：设计核酸扩增-芯片电泳滴定传感，并进行核酸扩增以形成双链DNA，对双链DNA进行芯片电泳滴定传感，使双链DNA进入电泳通道进行反应形成移动反应界面；/n先测定一系列已知浓度的核酸扩增后的双链DNA界面迁移距离，建立起界面迁移距离与核酸浓度的标准曲线；再对待测核酸进行扩增-电泳滴定传感，得到待测核酸的界面迁移距离，根据建立的标准曲线，得到待测核酸的浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于移动反应界面的核酸扩增-芯片电泳滴定传感的核酸检测方法，其特征在于，该方法为：设计核酸扩增-芯片电泳滴定传感，并进行核酸扩增以形成双链DNA，对双链DNA进行芯片电泳滴定传感，使双链DNA进入电泳通道进行反应形成移动反应界面；
先测定一系列已知浓度的核酸扩增后的双链DNA界面迁移距离，建立起界面迁移距离与核酸浓度的标准曲线；再对待测核酸进行扩增-电泳滴定传感，得到待测核酸的界面迁移距离，根据建立的标准曲线，得到待测核酸的浓度。


2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法具体包括以下步骤：
(1)设计并制作具有阴极池、电泳通道和阳极池的电泳滴定传感芯片；
(2)在电泳通道中预先填充含缓冲液的水凝胶，在阳极池中加入电极缓冲液；
(3)进行核酸扩增形成双链DNA，并去除残留的单链核酸；
(4)在阳极池与阴极池之间加载一定的直流电压，使扩增的双链DNA进入电泳通道，与缓冲液反应形成移动反应界面，测定一系列已知浓度的核酸扩增后形成的双链DNA在特定时间内的界面迁移距离，建立界面迁移距离与核酸浓度的标准曲线；
(5)对待测核酸进行扩增和电泳传感，得到待测核酸扩增后形成的双链DNA的界面迁移距离，根据标准曲线，得到待测核酸浓度。


3.根据权利要求1或2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸扩增的方法包括但不限于聚合酶链式反应(PCR)、杂交链反应扩增(HCR)、催化茎环自组装扩增(CHA)、环介导等温扩增(LAMP)、滚环扩增(RCA)或等温指数扩增。...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹成喜，陈玲，张强，刘伟文，刘小平，王宇兴，李红根，肖华，樊柳荫，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31