一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法技术

本发明专利技术公开了一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法。在检测试剂管内加入试剂，将核酸扩增反应管放入核酸扩增反应管架中，盖上密封盖，卡盒主体和密封盖形成密闭空间；再向下按压密封盖形成预密封；再继续向下按压密封盖，刀片与核酸扩增反应管接触，并割破核酸扩增反应管的底部，核酸扩增反应管内液体流出至检测试剂管内并然后发生反应；光源照射观察结果确证检测；装置包括卡盒主体、核酸扩增反应管架和密封盖，卡盒主体包括外壳、刀架和刀片。本发明专利技术不改变现有的PCR扩增或是等温核酸扩增操作的任何流程，能对灰区的检测样本确证检测，灰区信号的确证灵敏度高、特异性好，整个确证过程时间短，成本低、操作简单。

【技术实现步骤摘要】
一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法
本专利技术涉及了一种核酸扩增的检测方法，尤其是涉及一种核酸扩增后处于灰区样本的确证检测方法，可避免灰区样本重复检测，防止气溶胶污染，适用于核酸检测领域，属于医学检测、分析化学、食品检测等领域。
技术介绍
核酸是携带遗传信息的载体，不同生物体的核酸序列具有特异性，因此通过核酸检测可有效鉴别和检测待测物质。当前核酸检测技术已广泛应用于食品安全检测、临床诊断、基因分型、分子克隆等各个方面。由于采集的待测样本核酸浓度较低，常需要对核酸样本进行扩增。根据扩增反应中是否需要热循环，可将常见的核酸扩增技术分为变温扩增技术和恒温扩增技术。变温扩增技术即聚合酶链式反应(PCR)。恒温扩增技术包括核酸序列依赖性扩增(NASBA),环介导的等温扩增(LAMP),滚环扩增(RCA),链置换扩增(SDA),依赖解旋酶的扩增(HAD)等。PCR需要反应的升降温过程，需要精密的控温仪器。恒温扩增不需要反复的升降温过程，但往往需要高温预变性、设计复杂引物、其他酶的辅助作用，且对模板特异性要求高等。扩增后的核酸产物需要进行检测来判断本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法，其特征在于：在不破坏核酸扩增管的前提下，将含有需要确证的核酸扩增溶液的核酸扩增管和扩增子特异性检测试剂均预先放入一密闭容器中；然后，在保持密闭容器内部和外部具有隔离的情况下，也即密闭容器内部的生物大分子没有途径离开密闭容器进入到周围环境的情况下，将核酸扩增管打开并和事先已经放入密闭容器中的扩增子特异性检测试剂混合以进行确证检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法，其特征在于：在不破坏核酸扩增管的前提下，将含有需要确证的核酸扩增溶液的核酸扩增管和扩增子特异性检测试剂均预先放入一密闭容器中；然后，在保持密闭容器内部和外部具有隔离的情况下，也即密闭容器内部的生物大分子没有途径离开密闭容器进入到周围环境的情况下，将核酸扩增管打开并和事先已经放入密闭容器中的扩增子特异性检测试剂混合以进行确证检测。


2.根据权利要求1所述的一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法，其特征在于：
首先，在检测试剂管(6)内加入扩增子特异性检测试剂，将带有需要灰区样本确证的核酸扩增反应液体的核酸扩增反应管放入核酸扩增反应管架中，盖上密封盖，卡盒主体和密封盖形成了密闭空间；
然后，再向下按压密封盖，使得密封盖上的柔性密封材料(13)紧密密封接触外壳(1)上端口起到预密封的作用；
再继续向下按压密封盖，柔性密封材料(13)压缩，密封盖上的凸起(11)压力经支撑板(7)传递到核酸扩增反应管架的弹性材料(8)，使得弹性材料(8)压缩，整个核酸扩增反应管架下移，刀片(5)与核酸扩增反应管架中的核酸扩增反应管接触，并割破核酸扩增反应管的底部，核酸扩增反应管内液体流出至检测试剂管(6)内并然后发生反应；
最后，用所需波长的光源从入射窗(2a)处向外壳(1)内照射，并在观察窗(2b)观察结果：若有荧光产生，则为阳性样本；反之则为阴性样本，完成灰区样本的确证检测。


3.根据权利要求2所述的一种核酸扩增后处于灰区样本的确证方法，其特征在于：方法采用以下确证装置，装置包括卡盒主体、核酸扩增反应管架和密封盖；
卡盒主体包括外壳(1)、刀架(4a，4b)和刀片(5)，外壳(1)底部内固定放置有检测试剂管(6)，检测试剂管(6)上方设有刀片(5)，刀片(5)通过...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴坚，陈艳菊，伍辉，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33