一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法技术

技术编号:26885722 阅读:18 留言:0更新日期:2020-12-29 15:43
本发明专利技术提供一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,涉及核苷三磷酸合成领域。该高效制备核苷三磷酸生物合成方法,包括以下步骤:S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2‑3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4‑5,得到基础溶液;S2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5‑1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用。通过对合成方法的设计,使得该方法在进行合成时具有操作简单的优点,并且在合成过程中所得物质的纯度高、生产成本低,进而对生产具有促进作用。

【技术实现步骤摘要】
一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法
本专利技术涉及核苷三磷酸合成
,具体为一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法。
技术介绍
核苷三磷酸(NTP)是一种含有三个磷酸基团的核苷酸。自然界常见的型态包括腺苷三磷酸(ATP)、鸟苷三磷酸(GTP)、胞苷三磷酸(CTP)、胸腺苷三磷酸(TTP)以及尿苷三磷酸(UTP)等。这些分子中包含一个核糖,若是将核糖替换常去氧核糖,那么会使核甘三磷酸变成去氧核苷三磷酸,写成dNTP,如去氧腺苷三磷酸(dATP)、去氧鸟苷三磷酸(dGTP)等。核苷三磷酸在生物学中具有重要的意义,因此,现在对核苷三磷酸的需求时日益增加,但是,现在无论是从国外进口亦或者是国内的自主合成,其都存在着纯度不高的问题,并且,以往对于核苷三磷酸的制备其存在着工艺复杂、成本高、合成困难的缺点。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,解决了现在对于核苷三磷酸的合成存在着纯度不高的问题,并且,以往对于核苷三磷酸的制备其存在着工艺复杂、成本高、合成困难的问题。(二)技术方案为实现以上目的,本专利技术通过以下技术方案予以实现:一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,包括以下步骤:S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;S2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5-1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用;S3.对S2中得到的混合物中加入10%-15%金属离子与1-2倍有机溶剂,并对其进行混合搅拌,之后得到二次混合物;S4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母细胞与氢氧化钠,调节PH至6-8,并在30-45℃的环境下进行,使其产生化学效应进而制取得到核苷三磷酸溶液,之后对核苷三磷酸溶液进行层析分离得到93%-98%的核苷三磷酸优选的,所述S1中盐酸的浓度为1-1.5mol/L。优选的,所述S2中的营养物为蛋白胨1-2份、葡萄糖5-10份、蔗糖0.5-1份、维生素1-2份、牛肉膏3-4份,所述加热处理温度为40℃-55℃。优选的,所述S3中的金属离子为钾离子、钠离子、铁离子、镁离子、钙离子、磷离子、硫离子中的一种或多种混合物。优选的,所述S3中有机溶剂为山梨醇、甘露醇、木糖醇、三羟甲基乙烷、乙酸乙脂、甲苯、二甲苯、脂肪酶中的至少一种,所述有机溶剂的浓度为10-20ml/L。优选的,所述S4中通透性的酵母细胞为经过化学方法或物理方法对酵母细胞膜改变的细胞。优选的,所述S4中的氢氧化钠浓度为1-3mol/L。(三)有益效果本专利技术提供了一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法。具备以下有益效果:1、通过对合成方法的设计,使得该方法在进行合成时具有操作简单的优点,并且在合成过程中所得物质的纯度高、生产成本低,进而对生产具有促进作用。2、通过营养物质的介入,保证合成过后才能中反应的高效进行,进而能够增加合成的速率。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范围。实施例一:本专利技术实施例提供一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,包括以下步骤:S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;S2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5-1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用;S3.对S2中得到的混合物中加入10%-15%金属离子与1-2倍有机溶剂,并对其进行混合搅拌,之后得到二次混合物;S4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母细胞与氢氧化钠,调节PH至6-8,并在30-45℃的环境下进行,使其产生化学效应进而制取得到核苷三磷酸溶液,之后对核苷三磷酸溶液进行层析分离得到93%-98%的核苷三磷酸。其中S1中盐酸的浓度为1-1.5mol/L。其中S2中的营养物为蛋白胨1份、葡萄糖5份、蔗糖0.5份、维生素1份、牛肉膏3份,其中加热处理温度为40℃-55℃。其中S3中的金属离子为钾离子、钠离子、铁离子、镁离子、钙离子、磷离子、硫离子中的一种或多种混合物。其中S3中有机溶剂为山梨醇、甘露醇、木糖醇、三羟甲基乙烷、乙酸乙脂、甲苯、二甲苯、脂肪酶中的至少一种,其中有机溶剂的浓度为10-20ml/L。其中S4中通透性的酵母细胞为经过化学方法或物理方法对酵母细胞膜改变的细胞。其中S4中的氢氧化钠浓度为1-3mol/L。实施例二:本专利技术实施例提供一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,包括以下步骤:S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;S2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5-1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用;S3.对S2中得到的混合物中加入10%-15%金属离子与1-2倍有机溶剂,并对其进行混合搅拌,之后得到二次混合物;S4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母细胞与氢氧化钠,调节PH至6-8,并在30-45℃的环境下进行,使其产生化学效应进而制取得到核苷三磷酸溶液,之后对核苷三磷酸溶液进行层析分离得到93%-98%的核苷三磷酸。其中S1中盐酸的浓度为1-1.5mol/L。其中S2中的营养物为蛋白胨1.5份、葡萄糖7份、蔗糖1.8份、维生素1.5份、牛肉膏3.6份,其中加热处理温度为40℃-55℃。其中S3中的金属离子为钾离子、钠离子、铁离子、镁离子、钙离子、磷离子、硫离子中的一种或多种混合物。其中S3中有机溶剂为山梨醇、甘露醇、木糖醇、三羟甲基乙烷、乙酸乙脂、甲苯、二甲苯、脂肪酶中的至少一种,其中有机溶剂的浓度为10-20ml/L。其中S4中通透性的酵母细胞为经过化学方法或物理方法对酵母细胞膜改变的细胞。其中S4中的氢氧化钠浓度为1-3mol/L。实施例三:本专利技术实施例提供一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,包括以下步骤:S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;S2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,其特征在于:包括以下步骤:/nS1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;/nS2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5-1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用;/nS3.对S2中得到的混合物中加入10%-15%金属离子与1-2倍有机溶剂,并对其进行混合搅拌,之后得到二次混合物;/nS4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母细胞与氢氧化钠,调节PH至6-8,并在30-45℃的环境下进行,使其产生化学效应进而制取得到核苷三磷酸溶液,之后对核苷三磷酸溶液进行层析分离得到93%-98%的核苷三磷酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1.以DNMP与磷酸根为原料,然后将其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物,向混合物中加入盐酸溶液调节混合物的PH至4-5,得到基础溶液;
S2.向S1中得到的基础溶液内加入1.5-1倍营养物进行供能,然后在对其加热处理并均匀搅拌使其得到充分混合,之后得到混合物,然后将混合物放置容器中进行存储,留以后期备用;
S3.对S2中得到的混合物中加入10%-15%金属离子与1-2倍有机溶剂,并对其进行混合搅拌,之后得到二次混合物;
S4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母细胞与氢氧化钠,调节PH至6-8,并在30-45℃的环境下进行,使其产生化学效应进而制取得到核苷三磷酸溶液,之后对核苷三磷酸溶液进行层析分离得到93%-98%的核苷三磷酸。


2.根据权利要求1所述的一种高效制备核苷三磷酸生物合成方法,其特征在于:所述S1中盐酸的浓度为1-1.5mol/L。


3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈勇李静简宋艳民
申请(专利权)人:天津全和诚科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:天津;12

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