【技术实现步骤摘要】
猪盖塔病毒感染性克隆及其建构方法及应用
本专利技术属于分子生物学领域，涉及盖塔病毒的全长基因组感染性克隆及其构建方法和应用，同时也涉及应用GETV载体重组病毒表达外源基因的
技术介绍
猪盖塔病毒(GETV)在全球各地都有分布，主要侵害对象为猪和马。感染猪的临床症状表现为成年猪发热、厌食、抑郁，母猪流产，仔猪腹泻甚至死亡等；感染马的临床症状表现为发烧、后肢水肿、肌肉僵硬、腹痛等；此外也有本病毒侵害野熊和蓝狐的报告。近年来，我国各地养殖场不断分离到盖塔病毒的新毒株，并且常为混合感染。该病毒对于我国养殖业的危害愈加突出。RNA病毒感染性克隆技术是利用病毒感染性cDNA克隆研究RNA病毒结构与功能的一项新技术，包括病毒基因组全长cDNA克隆构建和病毒RNA的感染性转录体制备及导入。该技术的发展实现了对RNA病毒在分子水平上的操作，为RNA病毒基因组的结构和功能研究提供了有效的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是构建一株可用于GETV特性研究的感染性克隆，并且探究外源基因在其中高效表达的条件，用于进一...
【技术保护点】
1.一种猪盖塔病毒感染性克隆，其特征在于，包含如SEQ ID NO:1所示的序列。/n
【技术特征摘要】
1.一种猪盖塔病毒感染性克隆，其特征在于，包含如SEQIDNO:1所示的序列。
2.一种猪盖塔病毒感染性克隆，其特征在于，包含如SEQIDNO:2所示的序列。
3.根据权利要求1或2所述的猪盖塔病毒感染性克隆的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
HuN1株GETV基因组全序列扩增；
重组质粒的构建；
重组病毒的拯救。
4.根据权利要求3所述的猪盖塔病毒感染性克隆的构建方法，其特征在于，采用下列引物：
5.根据权利要求3所述的猪盖塔病毒感染性克隆的构建方法，其特征在于，HuN1株GETV基因组全序列扩增方法为：将全长基因分为4段扩增，分别设计上、下游引物，并加入保护性碱基；将各组分加入PCR管，混匀瞬离后放入PCR仪中进行扩增。
6.根据权利要求3所述的猪盖塔病毒感染性克隆的构建方法，其特征在于，重组质粒的构建包括如下步骤：
将扩增的片段克隆至T载体中，并且通过OverlapPCR，在基因组5’端引入CMV启动子及其增强子序列；将酶切的基因片段和载体片段切胶回收，转化...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈振海，鹿田原，牟春晓，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。