3’,3’-cGAMP的水合物晶体制造技术

3’,3’‑cGAMP通常以冻干产品所知,但冻干产品在制造过程中需要冷冻干燥机,因此扩大规模以进行批量生产自然是受限制的。因此,期望开发一种无需使用冷冻干燥机等特殊装置就可以简单大量获得的晶体。另外,由于现已知的冻干产品或乙醇沉淀物表现出高吸湿性,因此本发明专利技术的目的是提供具有优异的可操作性和优异的储存性的晶体。本发明专利技术的3’,3’‑cGAMP的水合物晶体,无论是碱金属盐晶体还是游离酸晶体,都比现有粉末具有更低的吸湿性,因而易于在各种用途中处理,并且可用作药物的原料。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】3’,3’-cGAMP的水合物晶体
本专利技术涉及被认为可用作佐剂的物质3’，3’-环化GMP-AMP(3’,3’-cGAMP)的水合物的晶体以及该晶体的制造方法。
技术介绍
3',3'-cGAMP是一种参与细胞中I型干扰素(IFN)产量增加的信号传导剂,并有望在近年来用作佐剂,抗病毒剂和抗癌剂(专利文献1)。作为合成3',3'-cGAMP的方法,例如,已知有使用衍生自Geobactersulfreducens和Vibriocholerae的环状GMP-AMP合酶的合成方法以及化学合成方法(非专利文献1、2、3)。当前,出售的3',3'-cGAMP是冻干产品或乙醇沉淀物。一些市售产品以晶体性固体(“crystallinesolid”)的形式出售,但是购入分析的结果,它们都是无固定形状的,压碎时不会延展,此时的外观例如如图1所示。此外,它具有高度吸湿性,并在几分钟内糖状化。因此,澄清了市售的3’,3’-cGAMP晶体性固体均不是晶体。【现有技术文献】【专利文献】【专利文献1】日本专利再公开2016-079899号公报【非专利文献】【非专利文献1】MingC.Hammond,etal.,PNAS,2016,113(7),1790-1795【非专利文献2】JohnJ.Mekalanos,etal.,Cell,2012,149,358-370【非专利文献3】DinshawJ.Patel,etal.,Cell,2013,153(5),1094-1107r>
技术实现思路
【专利技术要解决的问题】3’,3’-cGAMP通常以冻干产品所知,但冻干产品在制造过程中需要冷冻干燥机,因此扩大规模以进行批量生产自然是受限制的。因此,期望开发一种无需使用冷冻干燥机等特殊装置就可以简单大量获得的晶体。另外,由于现已知的冻干产品或乙醇沉淀物表现出高吸湿性,因此本专利技术的目的是提供具有优异的可操作性和优异的储存性的晶体。【解决问题的方法】本专利技术人对3’,3’-cGAMP的结晶化深入研究的结果,初次获取了3’,3’-cGAMP的水合物晶体从而完成了本专利技术。【专利技术的效果】本专利技术的3’,3’-cGAMP的水合物晶体,无论是碱金属盐晶体还是游离酸晶体,都比现有粉末具有更低的吸湿性,因而易于在各种用途中处理,并且可用作药物的原料。应予说明,在本说明书中,低吸湿性是指(A)在温度为30℃且湿度为43％的条件下静置1天,然后(B)在温度为30℃且湿度为93％的条件下静置3天时,(B)结束时的水分含量为25％以下,(A)结束时的水分含量的差在±5％之内。另外,本专利技术的3’,3’-cGAMP的水合物晶体中,碱金属盐晶体可通过将3’,3’-cGAMP水溶液调节为pH4～11后添加有机溶剂的简单的方法制备,游离酸晶体可通过向3’,3’-cGAMP水溶液添加酸降低至pH1～3的简单的方法制备。【附图说明】图1表示延展市售3’,3’-cGAMP结晶性固体时的外观照片。图2表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的晶体照片。图3表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的X射线衍射谱。图4表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的红外吸收光谱。图5表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的热重测量/差热分析结果。图6表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的晶体照片。图7表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的X射线衍射谱。图8表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的红外吸收光谱。图9表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的热重测量/差热分析结果。图10表示3’,3’-cGAMP冻干产品的X射线衍射谱。图11表示3’,3’-cGAMP冻干产品的红外吸收光谱。图12表示3’,3’-cGAMP冻干产品的热重测量/差热分析结果。【具体实施方式】本专利技术提供以下的结构式表示的3’,3’-cGAMP的水合物晶体。应予说明,本专利技术中的“3’,3’-cGAMP”在没有特别限定的情况下,指以下所示的c[G(3’,5’)pA(3’,5’)p]。【化学式1】本专利技术的3’,3’-cGAMP的水合物晶体可以是碱金属盐晶体、游离酸晶体中的任一个。即,上述化学式1中所示的X可以是碱金属(Li,Na,K,Rb,Cs,Fr)或者氢(H)。另外,上述碱金属盐晶体中,特别优选钠盐晶体。以下,作为碱金属盐晶体的记载的说明,例示钠盐晶体。用Karl-Fischer法测定水分含量时,如后述实施例所示,本专利技术的水合物晶体的水分含量为5.0～30.0％,其中优选5.0～25.0％。即,相对于3’,3’-cGAMP1分子,本专利技术的3’,3’-cGAMP的水合物晶体结合或附着2.0～16.1分子的水分子,其中优选2.0～12.0分子。本专利技术的碱金属盐晶体中,若以优选晶体的钠盐晶体作为例示说明,钠盐晶体将得到立方体晶体(参照图2)。另外,若使用Cu-Kα射线粉末X射线衍射仪分析本专利技术的钠盐晶体,如后述实施例所示,在衍射角(2θ)9.3、10.0、11.7、14.4、17.3、19.1、20.3、22.6、23.3、23.8、24.3、25.6、28.2(°)附近示出了特征峰(参照图3)。应予说明,通常,从粉末X射线衍射中的衍射角(2θ)包括小于5％的误差范围的情况出发,除粉末X射线衍射中的峰的衍射角完全一致的晶体之外,峰的衍射角以小于5％的误差一致的晶体也包括在本专利技术的钠盐晶体。例如,粉末X射线衍射中,衍射角(2θ)在9.3±0.5、10.0±0.5、11.7±0.6、14.4±0.7、17.3±0.9、19.1±1.0、20.3±1.0、22.6±1.1、23.3±1.2、23.8±1.2、24.3±1.2、25.6±1.3、28.2±1.4(°)具有特征峰。在测定红外吸收光谱时,本专利技术的钠盐晶体在3328、3200、1677、1629、1604、1225、1209、1073、1052(cm-1)附近具有特征峰(参照图4)。应予说明,从红外吸收光谱测定通常包括小于2(cm-1)的误差范围的情况出发,除上述数值与红外吸收光谱中的峰的位置完全一致的晶体之外,以峰小于2cm-1的误差一致的晶体也包括于本专利技术的钠盐晶体。例如,测定红外吸收光谱时,在3328±1.9、3200±1.9、1677±1.9、1629±1.9、1604±1.9、1225±1.9、1209±1.9、1073±1.9、1052±1.9(cm-1)具有特征峰。用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析时,本专利技术的钠盐晶体不具有吸热峰(参照图5)。本专利技术的钠盐晶体通过原子吸收分光光度法测定时的钠含量为3～9.5％w/w。即,本专利技术的钠盐晶体可以包括1～3分子的钠。另外,考虑到溶解时的pH成为中性的高便利性,优选5～7％w/w,即,包括2分子钠的晶体。另一方面本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种3’,3’-环化GMP-AMP的水合物晶体。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180627 JP 2018-1222551.一种3’,3’-环化GMP-AMP的水合物晶体。


2.根据权利要求1所述的晶体,其特征在于,
通过Karl-Fischer法测定时的水分为5～30％。


3.根据权利要求1或2所述的水合物晶体,其特征在于,
所述水合物晶体为碱金属盐晶体。


4.一种权利要求1至3中...

【专利技术属性】
技术研发人员：高松美沙树，吉田晃，石毛和也，
申请(专利权)人：雅玛山酱油株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP