【技术实现步骤摘要】
纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法及核酸检测方法
本专利技术涉及分子生物学及基因检测
，尤其是涉及一种纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法及核酸检测方法。
技术介绍
自Mirkin课题组将纳米金颗粒表面修饰核酸分子并实现多种核酸和蛋白的可视化检测后，纳米金修饰探针已经被广泛应用在生物大分子的检测领域。在核酸检测中，通常是通过纳米金探针与目标核酸ssDNA(单链DNA)模板杂交，并在金属离子诱导下实现纳米金探针的聚集，若不存在目标核酸ssDNA模板，纳米金探针就会呈现分散状态。由此，在有、无目标核酸模板存在时，纳米金探针溶液在颜色上能够产生肉眼可分辨的显著性差异。此外，这种纳米金探针杂交后呈现的不同状态还可以通过紫外-可见光吸收曲线来判别。这种纳米金探针杂交后分散与聚集的状态在颜色上和紫外-可见光吸收曲线上出现的差异可以作为判断溶液中是否存在目标核酸模板的标准。通过纳米金显色的检测方式是并列于荧光检测方式的另一种便捷的核酸分子检测方式，其具有重要的作用。目前关于常规纳米金探针热稳定性...
【技术保护点】
1.一种纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，包括如下步骤：/n配制纳米金杂交反应体系；/n在预设反应温度下记录所述纳米金杂交反应体系对不同波长光的吸收强度值，获取关于该纳米金杂交反应体系的特征吸收波长；/n在预设反应温度下依次间隔第一预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少一特征吸收波长下的吸收强度值随时间的变化，比较在当前特征吸收波长下的阳性吸收强度值与阴性吸收强度值，根据阳性吸收强度值与阴性吸收强度值之间的差值随时间的变化获取第一区分时间；或者，/n在预设反应温度下依次间隔第二预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少两个不同特征吸收波长下的吸收强...
【技术特征摘要】
1.一种纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，包括如下步骤：
配制纳米金杂交反应体系；
在预设反应温度下记录所述纳米金杂交反应体系对不同波长光的吸收强度值，获取关于该纳米金杂交反应体系的特征吸收波长；
在预设反应温度下依次间隔第一预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少一特征吸收波长下的吸收强度值随时间的变化，比较在当前特征吸收波长下的阳性吸收强度值与阴性吸收强度值，根据阳性吸收强度值与阴性吸收强度值之间的差值随时间的变化获取第一区分时间；或者，
在预设反应温度下依次间隔第二预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少两个不同特征吸收波长下的吸收强度值之差随时间的变化，比较在当前两个特征吸收波长下的阳性吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差，根据阳性吸收强度值之差与阴性吸收强度值之差之间的差值随时间的变化获取第二区分时间。
2.如权利要求1所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述纳米金杂交反应体系中含有纳米金探针和纳米金杂交反应探针。
3.如权利要求2所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述纳米金杂交反应体系中还含有PCR扩增引物和/或连接探针。
4.如权利要求1～3中任一项所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述在预设反应温度下记录所述纳米金杂交反应体系对不同波长光的吸收强度值是在反应温度达到所述预设反应温度时就开始记录所述吸收强度值；和/或
所述不同波长光为全波长可见光。
5.如权利要求1～3中任一项所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述在预设反应温度下依次间隔第一预设时间记录所述纳米金杂交反应体系在至少一特征吸收波长下的吸收强度值随时间的变化，是按照梯度关系设计多个所述第一预设时间分别进行实验，获取阳性吸收强度值与阴性吸收强度值之间的差值出现明显变化时的最短时间作为所述第一区分时间。
6.如权利要求5所述的纳米金杂交反应体系特征波长与区分时间的获取方法，其特征在于，所述明显变化是指开始记录后随时间推移所述差值开始小于当前特征吸收波长下的预设吸收差值，或者开始记录后随...
【专利技术属性】
技术研发人员：王建平，
申请(专利权)人：广州市宝创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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