一种具有双荧光发射的荧光探针在检测RNA中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种具有双荧光发射的荧光探针在检测RNA中的应用，属于分子检测技术领域。该荧光探针与单链(脱氧)核糖核苷酸相互作用时，只会发出640nm左右的红色荧光，当与双螺旋结构的双链(脱氧)核糖核苷酸结合时，会出现一个新的540nm左右的绿色荧光峰。540nm的绿色荧光峰与双链(脱氧)核糖核苷酸的双螺旋结构密切相关，可以用540nm的荧光峰来特异性的检测双链(脱氧)核糖核酸的存在。利用该荧光染料的这一特性，开发了一种快速检测RNA以及RNA碱基突变的新应用，与商业染料SYBR Green I相比具有更宽的检测范围和更好的线性相关性。

【技术实现步骤摘要】
一种具有双荧光发射的荧光探针在检测RNA中的应用
本专利技术属于分子检测
，更具体地，涉及一种具有双荧光发射的荧光探针在检测RNA中的应用。
技术介绍
影响新型冠状病毒防治的一个主要瓶颈就是对潜在新冠感染病人的诊断，无论是试剂盒的产能还是诊断所需时间都难以在短时间内满足快速检测病毒感染、有效隔断病毒传染的需求。确诊病例的核心方法是核酸检测，但目前核酸检测受制于成本和时间，同时准确率也不高，常出现假阳性和假阴性结果而贻误病情。因此，提高核酸检测的速度和准确性对增强新型冠状病毒疫情防治至关重要。同时，对其它非病毒性的RNA检测也亟需开发新的检测探针。目前，检测病毒RNA最常用的方法是实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)，也是这次新型冠状病毒(2019-nCoV)检测的“金标准”。RT-PCR对病毒RNA的检测主要有两种方法，TaqMan探针法和SYBRGreen染料法。TaqMan探针通过空间上的荧光共振能力转移(FRET)而淬灭目标序列的荧光来特异性检测目标序列，但合成特异性的探针成本较高，且荧光信号淬灭不彻底，本底信号较高；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有双荧光发射的荧光探针在检测待测物中是否含一定序列的RNA中的应用，该荧光探针的结构式如式I所示；/n

【技术特征摘要】
1.一种具有双荧光发射的荧光探针在检测待测物中是否含一定序列的RNA中的应用，该荧光探针的结构式如式I所示；





2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以与目标RNA互补的单链DNA为单链探针DNA，所述目标RNA为序列已知的RNA；将所述待测RNA与单链探针DNA进行混合，不同的待测RNA与单链探针DNA会有不同程度的配对；
(2)将所述荧光探针溶于水中，再加入过量肝素钠溶液，制备得到的检测试剂；将步骤(1)所得样品滴加至所述检测试剂中，在350-550nm的激发波长激发下进行荧光光谱检测；
(3)若所述待测RNA与单链探针DNA的碱基能逐个互补配对而形成DNA-RNA双螺旋结构时，则会在540±10nm处出现荧光发射峰；若所述待测RNA与单链探针DNA的碱基有错配且仍然能形成DNA-RNA双螺旋结构时，随着错配的增多，540±10nm处出现的荧光发射峰减弱；若所述待测RNA与单链探针DNA的...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗亮，高玉婷，孟凡玲，何珍艳，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42