腺苷脱氨酶及其相关生物材料与应用制造技术

本发明专利技术公开了腺苷脱氨酶及其相关生物材料与应用。该腺苷脱氨酶是氨基酸序列是序列表中序列2的第1‑167位的蛋白质，其名称为TadA9。TadA9与SpCas9(D10A)、SpCas9‑NG(D10A)、ScCas9(D10A)和SpRY(D10A)融合后介导的腺嘌呤碱基编辑技术的编辑效率显著高于TadA7.10和TadA‑R突变体介导的腺嘌呤碱基编辑技术，并且可以扩展其编辑活性窗口，提高了腺嘌呤碱基编辑技术的效率和扩宽了其应用范围。本发明专利技术可以提高腺嘌呤碱基编辑的效率且能够精确地介导靶位点的碱基突变，并且能够在水稻甚至其它植物细胞中广泛适用。

【技术实现步骤摘要】
腺苷脱氨酶及其相关生物材料与应用
本专利技术涉及酶、变异和遗传工程领域中的腺苷脱氨酶及其相关生物材料与应用。
技术介绍
基因组编辑技术是利用人工核酸酶对生物体基因组特定位置进行改造的一种基因工程技术。这一过程主要依赖于特定的核酸酶对靶标位点进行切割，产生DNA双链断裂，而后生物体利用非同源末端连接（Non-homologousend-joining,NHEJ）修复或同源重组修复（Homology-directedrepair,HDR）的方式引入碱基的缺失、插入和错配等现象，从而达到突变的目的。近年来，以ZFN、TALEN和CRISPR为主的人工核酸酶技术陆续开发成功。尤其CRISPR/Cas技术，因其易操作、效率高以及普适性受到了研究人员的广泛关注。单核苷酸多态性（Single-nucleotidepolymorphism,SNP）是农作物农艺性状的遗传基础，植物中有许多重要农艺性状是由单个核苷酸位点决定。目前，SNP被越来越多的发现和用于植物表型性状的筛选。随着CRISPR/Cas技术的发展，以此为基础建立的在基因组上引起单个碱基改变本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白质，其特征在于：所述蛋白质的氨基酸序列是序列表中序列2的第1-167位。/n

【技术特征摘要】
1.蛋白质，其特征在于：所述蛋白质的氨基酸序列是序列表中序列2的第1-167位。


2.权利要求1所述的蛋白质的相关的生物材料，为下述B1）-B7）中的至少一种：
B1）编码所述蛋白质的核酸分子；
B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；
B3）含有B1）所述核酸分子的重组载体或含有B2）所述表达盒的重组载体；
B4）含有B1）所述核酸分子的重组微生物、含有B2）所述表达盒的重组微生物或含有B3）所述重组载体的重组微生物；
B5）含有B1）所述核酸分子的转基因植物细胞系、含有B2）所述表达盒的转基因植物细胞系或含有B3）所述重组载体的转基因植物细胞系；
B6）含有B1）所述核酸分子的转基因植物组织、含有B2）所述表达盒的转基因植物组织或含有B3）所述重组载体的转基因植物组织；
B7）含有B1）所述核酸分子的转基因植物器官、含有B2）所述表达盒的转基因植物器官或含有B3）所述重组载体的转基因植物器官。


3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：B1）所述核酸分子为如下B11）或B12）所示的基因：
B11）其编码链的编码序列是序列1的第7-507位所示的cDNA分子或DNA分子；
B12）与B11）限定的核苷酸序列具有80%或80%以上同一性，且编码所述蛋白质的cDNA分子或DNA分子。


4.融合蛋白质，其特征在于：所述融合蛋白质是含有Cas蛋白和腺苷脱氨酶的蛋白质，所述腺苷脱氨酶是权利要求1所述的蛋白质。


5.根据权利要求4所述的融合蛋白质，其特征在于：所述Cas蛋白为ScCas9(D10A)、SpRY(D10A)、SpCas9(D10A)或SpCas9-NG(D10A)。


6.根据权利要求4或5所述的融合蛋白质，其特征在于：所述融合蛋白是由所述腺苷脱氨酶、所述Cas蛋白和核定位信号连接而成的蛋白质。


7.根据权利要求6所述的融合蛋白质，其特征在于：所述融合蛋白质是TadA9-ScCas9(D10A)、TadA9-SpRY(D10A)、TadA9-SpCas9(D10A)或TadA9-SpCas9-NG(D10A)，所述TadA9-SpCas9(D10A)为氨基酸序列是序列2的蛋白质，所述TadA9-SpCas9-NG(D10A)为氨基酸序列是序列4的蛋白质，所述TadA9-ScCas9(D10A)为氨基酸序列是序列6的蛋白质，所述TadA9-SpRY(D10A)为氨基酸序列是序列8的蛋白质。


8.权利要求4-7中任一所述的融合蛋白质的相关的生物材料，为下述D1）-D7）中至少一种：
D1）编码所述融合蛋白质的核酸分子；
D2）含有D1）...

【专利技术属性】
技术研发人员：周焕斌，严芳，任斌，闫大琦，柳浪，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11