一种免核酸提取快速检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的荧光PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种免核酸提取快速检测新型冠状病毒的试剂盒，包括：Direct RT‑PCR反应液、酶混合液、阴性对照和阳性对照。本发明专利技术增加了寡核苷酸探针Block，有效封闭同源性较高的冠状病毒SARSr‑CoV对检测准确性的影响，使检测的准确性更高。

【技术实现步骤摘要】
一种免核酸提取快速检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的荧光PCR试剂盒
本专利技术涉及一种免核酸提取快速检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的荧光PCR试剂盒，属于生物检测领域。
技术介绍
冠状病毒(Coronaviruses，CoV)为不分截断的单股正链RNA病毒，属于冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒亚科(Coronavirinae)，新型冠状病毒属于β属的新型冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm。其基因特征与SARSr-CoV和MERSr-CoV有明显区别。目前研究显示与蝙蝠SARS样冠状病毒(bat-SL-CoVZC45)同源性达85％以上。其临床表现以发热、乏力、干咳为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状。重型病例多在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。目前依据新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第七版)新型冠状病毒2019-nCoV的确诊为疑似病例具备以下病原学或血清学证据之一者：1.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的实时荧光RT-PCR的引物和探针，其特征在于：/n针对新型冠状病毒开放读码框1a/b和核壳蛋白设计上下游引物和探针，新型冠状病毒开放读码框1a/b和核壳蛋白的基因引物和探针序列如下：/n新型冠状病毒开放读码框1a/b基因上游引物2019nCOV(ORF)-F：GCACGTGCTGGTAAAGCTTCA/n新型冠状病毒开放读码框1a/b基因下游引物2019nCOV(ORF)-R：TTTAATTTCAAAAGGTGTCTGCAAT/n新型冠状病毒开放读码框1a/b基因探针2019nCOV(ORF)-P：TTATTGACACTAAGAGGGGTGTA/...

【技术特征摘要】
1.一种检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的实时荧光RT-PCR的引物和探针，其特征在于：
针对新型冠状病毒开放读码框1a/b和核壳蛋白设计上下游引物和探针，新型冠状病毒开放读码框1a/b和核壳蛋白的基因引物和探针序列如下：
新型冠状病毒开放读码框1a/b基因上游引物2019nCOV(ORF)-F：GCACGTGCTGGTAAAGCTTCA
新型冠状病毒开放读码框1a/b基因下游引物2019nCOV(ORF)-R：TTTAATTTCAAAAGGTGTCTGCAAT
新型冠状病毒开放读码框1a/b基因探针2019nCOV(ORF)-P：TTATTGACACTAAGAGGGGTGTA
TACTGCTGCC
核壳蛋白基因上游引物2019nCOV(N)-F：
TGTCTGATAATGGACCCCAAAAT
核壳蛋白基因下游引物2019nCOV(N)-R：
CCGACGTTGTTTTGATCGC
核壳蛋白基因探针2019nCOV(N)-P：
ACCCTCAGATTCAACTGGCAGTAACCAGAA。


2.一种检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的实时荧光RT-PCR方法，其特征在于：针对封闭SARSr-CoV序列的特异序列的探针命名为Block，其3’端进行磷酸化修饰，Block的序列如下：
SARS(ORF)-B：GCACGCGCGGGCAAGTCAATG-PO4
SARS(N)-B：TGTCTGATAATGGACCCCAATCG-PO4。


3.一种免核酸提取的检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的荧光RT-PCR试剂盒，其特征在于，包括：
DirectRT-PCR反应液、酶混合液、阴性对照和阳性对照，
所述Direc...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈林峰，季琳，宋冬梅，
申请(专利权)人：安徽同科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34