基因、构建体和玉米事件DP-202216-6制造技术

技术编号:26771968 阅读:80 留言:0更新日期:2020-12-18 23:54
所公开的组合物和方法涉及与具有增加的籽粒产量性状的玉米植物相关的DNA组合物、植物细胞、种子、植物部分。还提供了基于插入到所述玉米基因组中的重组构建体的DNA序列和所述插入位点侧翼的DNA序列来检测所述玉米DP‑202216‑6事件的存在的测定。提供了可用于进行所述测定的试剂盒和条件。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基因、构建体和玉米事件DP-202216-6以电子方式递交的序列表的引用该序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交,文件名为7768WOPCT_ST25.txt,创建于2018年4月18日,且具有51千字节大小,并且与本说明书同时提交。包含在所述ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其整体并入本文。
本文公开的实施例涉及植物分子生物学领域,尤其涉及用于增加植物产量的DNA构建体。本文公开的实施例更具体地涉及与玉米事件DP-202216-6有关的玉米植物、基因、细胞、种子、植物部分、DNA、加工的植物产物和构建体及其方法和组合物。
技术介绍
玉米是一种重要的农业作物,可作为动物、人类的食物和饲料来源以及用于工业用途。玉米植物可以通过多种方式增加籽粒产量,除改进育种以外还包括表达转基因以增加籽粒产量。转基因在植物中的表现(包括农艺参数)可能受到多种因素的影响,例如包括启动子/调控元件等表达元件的使用,插入序列的基因组位置,插入转基因的拷贝数和诸如土壤、温度、光线和湿度等遗传(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含事件DP-202216-6的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述事件包含SEQID NO:7和SEQ ID NO:8中所列出的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180418 US 62/659579;20181004 US 62/7415291.一种包含事件DP-202216-6的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述事件包含SEQIDNO:7和SEQIDNO:8中所列出的核苷酸序列。


2.如权利要求1所述的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述事件包含SEQIDNO:9和SEQIDNO:10中所列出的核苷酸序列。


3.如权利要求1所述的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述事件包含SEQIDNO:11和SEQIDNO:12中所列出的核苷酸序列。


4.如权利要求1所述的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述事件包含SEQIDNO:13或SEQIDNO:14中所列出的核苷酸序列。


5.如权利要求1所述的玉米植物、种子、细胞或植物部分,其中所述植物部分选自由果皮、花粉、胚珠、花、籽粒、枝条、根、茎秆、丝、雄穗、穗和叶组织组成的组。


6.一种包含事件DP-202216-6的玉米植物、种子、细胞或其部分,其中所述玉米事件的代表性种子样品已保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC),登录号为PTA-124653。


7.如权利要求6所述的玉米植物、种子、细胞或植物部分,其中所述植物部分选自由果皮、花粉、胚珠、花、籽粒、枝条、根、茎秆、丝、雄穗、穗和叶组织组成的组。


8.一种包含事件DP-202216-6的玉米种子,其中所述种子包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11、12、13、14及其组合组成的组的DNA分子,其中玉米事件DP-202216-6种子的代表性样品已保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC),登录号为PTA-124653。


9.一种玉米植物或其部分,所述玉米植物或其部分从如权利要求8所述的种子生长。


10.一种分离的核酸分子,所述分离的核酸分子包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11、12及其全长互补序列组成的组的核苷酸序列。


11.一种扩增子,所述扩增子包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11、12及其全长互补序列组成的组的核酸序列。


12.如权利要求11所述的扩增子,其中所述扩增子小于约10kb。


13.一种衍生自玉米事件DP-202216-6植物、组织或种子的生物学样品,其中所述样品包含作为选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11和12组成的组的序列或与其互补的核苷酸序列,其中可使用核酸扩增或核酸杂交方法在所述样品中检测到所述核苷酸序列,其中所述玉米事件DP-202216-6种子的代表性样品已保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC),登录号为PTA-124653。


14.如权利要求13所述的生物学样品,其中所述生物学样品包含转基因玉米事件DP-202216-6的植物、组织或种子的部分、种子的果皮。


15.如权利要求13所述的生物学样品,其中所述生物学样品是从所述转基因玉米植物事件DP-202216-6中提取的DNA样品,并且其中所述DNA样品包含一个或多个选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11、12组成的组的核苷酸序列及其互补序列。


16.如权利要求13所述的生物学样品,其中所述生物学样品选自由玉米细粉、玉米粗粉、玉米糖浆、玉米油、玉米淀粉和以整体或部分制造而包含玉米副产物的谷物组成的组,其中所述生物学样品包含可检测量的所述核苷酸序列。


17.一种衍生自玉米事件DP-202216-6植物、组织或种子的提取物,其包含作为选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11和12组成的组的序列或与其互补的核苷酸序列,其中所述玉米事件DP-202216-6种子的代表性样品已保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC),登录号为PTA-124653。


18.如权利要求17所述的提取物,其中可使用核酸扩增或核酸杂交方法在所述提取物中检测到所述核苷酸序列。


19.如权利要求17所述的提取物,其还包含选自由玉米细粉、玉米粗粉、玉米糖浆、玉米油、玉米淀粉和以整体或部分制造而包含玉米副产物的谷物组成的组的组合物,其中所述组合物包含可检测量的所述核苷酸序列。


20.一种生产杂交玉米种子的方法,其包括:
a)使包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11和12组成的组的核苷酸序列的第一玉米近交系与具有不同基因型的第二近交系有性杂交;
b)使来自所述杂交的后代生长;以及
c)收获由此产生的杂交种子。


21.根据权利要求20所述的方法,其中所述第一玉米近交系是母本。


22.根据权利要求20所述的方法,其中所述第一玉米近交系是父本。


23.一种用于生产表现出增加的田间籽粒产量的玉米植物的方法,所述方法包括:
a)使第一亲本玉米植物与第二亲本玉米植物有性杂交,其中所述第一或第二亲本玉米植物包含事件DP-202216-6DNA,由此产生多个第一代后代植物;
b)使所述第一代后代植物自交,由此产生多个第二代后代植物;以及
c)从包含事件DP-202216-6的第二代后代植物中,选择与不包含所述事件DP-202216-6的对照玉米植物相比表现出增加的田间籽粒产量的植物。


24.如权利要求23所述的方法,其中所述事件DP-202216-6包含如权利要求26所述的重组DNA构建体。


25.如权利要求23所述的方法,其中所述事件DP-202216-6包含编码与SEQIDNO:1至少99%相同的多肽。


26.一种生产杂交玉米种子的方法,其包括:
a)使包含如权利要求26所述的DNA构建体的第一玉米近交系与不包含如权利要求26所述的DNA构建体的第二近交系有性杂交;以及
b)收获由此产生的杂交种子。


27.如权利要求26所述的方法,其还包括如下步骤:将步骤(d)的包含玉米事件DP-202216-6的第二代后代植物与缺少所述玉米事件DP-202216-6的亲本植物回交,由此产生表现出与不包含所述事件DP-202216-6的对照玉米植物相比籽粒产量增加的回交后代植物。


28.一种生产表现出增加的籽粒产量的玉米植物的方法,所述方法包括:
a)使第一亲本玉米植物与第二亲本玉米植物有性杂交,其中所述第一或第二亲本玉米植物是玉米事件DP-202216-6植物,由此产生多个第一代后代植物;
b)选择表现出增加的籽粒产量的第一代后代植物;
c)使步骤(b)的所述第一代后代植物与缺少所述玉米事件DP-202216-6的亲本植物回交,由此产生多个回交后代植物;以及
d)从所述回交后代植物中选择表现出增加的籽粒产量的植物;
其中步骤(d)的所选回交后代植物包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11和12组成的组的序列。


29.根据权利要求28所述的方法,其中所述第一亲本玉米植物的植物是母本或父本。


30.一种杂交种子,其通过如权利要求28所述的方法产生。


31.一种确定生物学样品中包含玉米事件DP-202216-6的玉米植物的DNA的接合性的方法,其包括:
a)使所述样品与第一对DNA分子和不同的第二对分子接触,使得:
1)当用于包含玉米事件DP-202216-6DNA的核酸扩增反应中时,产生诊断玉米事件DP-202216-6的第一扩增子,以及
2)当用于包含除DP-202216-6DNA以外的玉米基因组DNA的核酸扩增反应中时,产生诊断除DP-202216-6DNA以外的玉米基因组DNA的第二扩增子;
b)进行核酸扩增反应;以及
c)检测如此产生的第一和第二扩增子,其中检测到所述第一和第二扩增子的存在表明所述样品对于玉米事件DP-202216-6DNA是杂合的,其中检测到所述第一扩增子表明所述样品对于玉米事件DP-202216-6DNA是纯合的。


32.如权利要求31所述的方法,其中所述第一对DNA分子包含扩增DNA片段的引物对,所述DNA片段包含选自由SEQIDNO:7、8、9、10、11、12及其反向互补序列组成的组的序列。


33.如权利要求31所述的方法,其中所述第一和第二对DNA分子包含可检测标记。


34.如权利要求33所述的方法,其中所述可检测标记是荧光标记。


35.如权利要求33所述的方法,其中所述可检测标记与所述引物分子中的一个或多个共价缔合。


36.如权利要求31所述的方法,其中所述第一和第二对DNA分子分别包含SEQIDNOS:15和16。


37.一种检测样品中事件DP-202216-6独特的或区分事件DP-202216-6的核酸分子的存在的方法,所述方法包括:
a)使所述样品与一对引物或探针接触,所述引物或探针在用于与来自事件DP-202216-6的基因组DNA的核酸扩增反应中时,产生诊断事件DP-202216-6的核酸分子;
b)进行核酸扩增反应,由此产生诊断事件DP-202216-6的核酸分子;以及
c)检测诊断事件DP-202216-6的核酸分子。


38.如权利要求37所述的方法,其中所述诊断事件DP-202216-6的核酸分子是通过核酸扩增链式反应产生的扩增子。


39.如权利要求37所述的方法,其中所述探针包含可检测标记。


40.如权利要求38所述的方法,其中所述可检测标记是荧光标记。


41.如权利要求38所述的方法,其中所述可检测标记与所述探针共价缔合。


42.多个包含一个或多个多核苷酸的多核苷酸引物,所述一个或多个多核苷酸包含至少10个连续碱基的长度,所述多核苷酸引物靶向样品中的事件DP-202216-6DNA模板,以由于聚合酶链式反应扩增方法产生诊断事件DP-202216-6的扩增子。


43.根据权利要求42所述的多核苷酸引物,其中
a)第一多核苷酸引物包含选自由SEQIDNO:31的核苷酸1-425、SEQIDNO:32的核苷酸1_417及其互补序列组成的组的核苷酸序列的至少10...

【专利技术属性】
技术研发人员:H·M·克里斯滕森N·D·科尔斯O·丹尼列夫斯卡亚J·哈本M·A·拉普J·R·舒斯勒B·沈B·P·维尔斯武景瑞
申请(专利权)人:先锋国际良种公司
类型:发明
国别省市:美国;US

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