脱细胞基质水凝胶及其制备方法和应用技术

本申请公开一种脱细胞基质水凝胶的制备方法，包括以下步骤：获得组织块；将所述组织块移入含0.02％的胰酶和0.05％的乙二胺四乙酸的溶液中搅拌2～3h；再将所述组织块移入含3％的Triton X的溶液中搅拌2～3h；再将所述组织块移入含4％的脱氧胆酸钠的溶液中搅拌2～3h；将所述组织块移入去离子水中浸泡12～18h，获得脱细胞支架；将所述脱细胞支架移入75％酒精中，浸泡30min，再移入含0.1％的过氧乙酸的溶液中搅拌2～3h；将所述脱细胞支架进行冻干和研磨成基质粉末之后，将所述基质粉末移入含盐酸胃蛋白酶的溶液中搅拌消化2～3d，获得预凝胶；所述预凝胶稀释成预设浓度，静置后获得脱细胞基质水凝胶。本申请从脐带组织中高效提取脱细胞基质水凝胶，且最大程度的保留了脱细胞基质内部结构的完整性。

【技术实现步骤摘要】
脱细胞基质水凝胶及其制备方法和应用
本申请涉及一种生物材料领域，尤其涉及一种脱细胞基质水凝胶及其制备方法和应用。
技术介绍
在生物体内，细胞的更新和分化与不断变化的环境协调一致，这种环境的特征是通过与邻近细胞的相互作用，多种因素的时空梯度变化，这在标准的二维培养条件下很难实现。开发模仿天然组织微环境的3D培养系统成为研究热点。细胞外基质(ECM)是组织和器官的细胞分泌到胞外的复合物，分布于细胞表面和细胞间隙。其成分复杂，是结构蛋白和功能蛋白的复合体，具体包含I型胶原蛋白、III型胶原蛋白、纤维连接蛋白、层粘连蛋白、糖胺聚糖(GAG)和多种细胞生长因子等。ECM经胰蛋白酶消化后可获得ECM水凝胶，在组织工程领域所有的生物材料中，它被认为是一种理想的工具。现有的ECM水凝胶包括：肝脏、小肠粘膜下层、真皮、膀胱基质，但是人体ECM来源的健康组织非常有限、涉及伦理问题，动物ECM来源的存在种属差异性，容易造成物种间病毒传染及免疫原性，人工合成的水凝胶成分单一，生物组织相容性差。动物脱细胞ECM水凝胶因存在物种差异，涉及伦理、来源有限，提取过程复本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脱细胞基质水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n获得组织块；/n将所述组织块移入含0.02％的胰酶和0.05％的乙二胺四乙酸的溶液中，在37℃的条件下，以350rmp的转速搅拌2～3h；/n再将所述组织块移入含3％的Triton X的溶液中，在27℃的条件下，以250rmp的转速搅拌2～3h；/n再将所述组织块移入含4％的脱氧胆酸钠的溶液中，在27℃的条件下，以250rmp的转速搅拌2～3h；/n将所述组织块移入去离子水中，在27℃的条件下浸泡12～18h，获得脱细胞支架；/n将所述脱细胞支架移入75％酒精中，浸泡30min，再移入含0.1％的过氧乙酸的溶液中，以150rmp...

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞基质水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
获得组织块；
将所述组织块移入含0.02％的胰酶和0.05％的乙二胺四乙酸的溶液中，在37℃的条件下，以350rmp的转速搅拌2～3h；
再将所述组织块移入含3％的TritonX的溶液中，在27℃的条件下，以250rmp的转速搅拌2～3h；
再将所述组织块移入含4％的脱氧胆酸钠的溶液中，在27℃的条件下，以250rmp的转速搅拌2～3h；
将所述组织块移入去离子水中，在27℃的条件下浸泡12～18h，获得脱细胞支架；
将所述脱细胞支架移入75％酒精中，浸泡30min，再移入含0.1％的过氧乙酸的溶液中，以150rmp的转速搅拌2～3h；
将所述脱细胞支架进行冻干和研磨成基质粉末之后，将所述基质粉末移入含盐酸胃蛋白酶的溶液中搅拌消化2～3d，获得预凝胶；
所述预凝胶在37℃的条件下稀释成预设浓度，静置后获得脱细胞基质水凝胶。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组织块来源于脐带。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组织块裁切成3～4cm宽的块段。


4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组织块和...

【专利技术属性】
技术研发人员：高毅，易笑，
申请(专利权)人：广东乾晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44